The invention provides a dextran g poly (L lysine) VAPG nucleic acid carrier and preparation method and application thereof. The nucleic acid carrier including dextran, poly (L lysine) and VAPG targeting peptide; among them, the poly lysine modified by dextran induced n-benzyloxycarbonyl-l-glutamic epsilon L lysine cyclic anhydride monomer open-loop preparation; then VAPG targeting peptide and dextran g poly (L lysine) by thiol ethylene addition reaction with target nucleic acid vector of. The invention is simple and easy to obtain. After compound with nucleic acid drugs, the nanoparticles with homogeneous particle size and good water solubility can be obtained. In addition, the nucleic acid carrier provided by the invention can effectively protect nucleic acid drugs from entering the smooth muscle cells, reduce the toxic and side effects of non-specific contacts, improve the transfection efficiency, have good biocompatibility and biodegradability, and have potential application prospects in the field of gene therapy.
【技术实现步骤摘要】
一种葡聚糖-g-聚(L-赖氨酸)-VAPG核酸载体及其制备方法和应用
本专利技术涉及一种葡聚糖-g-聚(L-赖氨酸)-VAPG核酸载体及其制备方法和应用,属于生物医学基因治疗领域。
技术介绍
近年来,RNA干扰逐渐发展成为一种用于癌症和心血管等疾病治疗的新技术。RNA干扰通过RNA效应分子siRNA和miRNA在体内诱导靶基因mRNA特异性降解或沉默,进而调节目的基因的表达,作用迅速高效,在疾病治疗中有较高的医用价值。然而,裸露的核酸药物pDNA、miRNA和siRNA容易受到核酸酶的降解,而且较高的分子量和表面负电的特性使其难以通过细胞内吞进入细胞中发挥作用,因此安全有效的传递载体成为基因治疗的关键。阳离子聚合物是一类应用广泛的核酸载体,其表面的正电荷可以与带负电的核酸药物通过静电作用形成稳定的复合物,延缓核酸药物的降解,同时可以与带负电的细胞膜相互结合,促进细胞内吞作用。但是,表面过量的正电荷,可与细胞膜以及体内带负电的蛋白血浆之类的活性物质非特异性结合,造成细胞毒性并引发免疫反应,同时降低了转染效率,因此在临床上的进一步推广也受到限制(JinL,ZengX,LiuM,DengY,HeNY.Currentprogressingenedeliverytechnologybasedonchemicalmethodsandnano-carriers.Theranostics,2014,4(3):240-255.)。因此,需要设计和合成一种具有靶向性、低毒和高转染效率的核酸载体辅助核酸药物进入靶细胞。公布号为CN105153439A的中国专利公开了一种聚乙二醇 ...
【技术保护点】
一种葡聚糖‑g‑聚(L‑赖氨酸)‑VAPG核酸载体,其特征是包括葡聚糖、聚(L‑赖氨酸)和靶向平滑肌细胞的多肽VAPG,结构式如下:
【技术特征摘要】
1.一种葡聚糖-g-聚(L-赖氨酸)-VAPG核酸载体,其特征是包括葡聚糖、聚(L-赖氨酸)和靶向平滑肌细胞的多肽VAPG,结构式如下:式中,k=18~24,r=13~19,n=1~8,l=7~22。2.如权利要求1所述的葡聚糖-g-聚(L-赖氨酸)-VAPG核酸载体,其特征是葡聚糖所采用的分子量为6kDa,所述的VAPG小肽序列为半胱氨酸-缬氨酸-甘氨酸-缬氨酸-丙氨酸-脯氨酸-甘氨酸(Cys-VAVAPG),所述的聚赖氨酸为改性的葡聚糖引发苄氧羰基保护的赖氨酸环状单体(Cbz-lysineNCA)制备而成,聚合度为8~30。3.如权利要求1所述的葡聚糖-g-聚(L-赖氨酸)-VAPG核酸载体的制备方法,其特征是包括步骤:(1)制备葡聚糖-g-聚(L-赖氨酸)聚合物;(2)制备葡聚糖-g-聚(L-赖氨酸)-VAPG聚合物。4.如权利要求3所述的制备方法,其特征是所述的步骤(1)制备葡聚糖-g-聚(L-赖氨酸)聚合物:将氨基改性的葡聚糖和Cbz-lysineNCA单体分别溶解在无水二甲基亚砜中,其中改性葡聚糖中氨基与Cbz-lysineNCA单体的摩尔比为1:15~1:100,氮气环境下反应2d~4d,乙醚沉淀洗涤除去未反应的单体,真空干燥;然后,以三氟乙酸为溶剂,加入含33%乙酸的氢溴酸,反应24~48h,丙酮沉...
【专利技术属性】
技术研发人员:袁晓燕,周培琼,刘波,赵蕴慧,任丽霞,
申请(专利权)人:天津大学,
类型:发明
国别省市:天津,12
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