一种阿霉素复合物及其制备方法与应用技术

本发明专利技术公开了一种阿霉素复合物及其制备方法与应用。该阿霉素复合物的制备方法，它包括如下步骤：(1)将阿霉素加入水性介质中，超声，得到阿霉素溶液；(2)在搅拌条件下将步骤(1)所述的阿霉素溶液加入到以水性介质为溶剂的聚合物溶液中，继续搅拌，即可得到所述阿霉素复合物；所述阿霉素复合物中，阿霉素分子与聚合物分子通过分子间作用力结合。本发明专利技术制备方法简单易行，不存在任何化学反应的进行，避免了复杂的反应制备及后处理过程。阿霉素复合物不仅具有高的载药量，还能在生理条件下缓慢释放阿霉素，这利于药物对肿瘤组织的长期作用；对多种肿瘤细胞中均表现出良好的抗肿瘤活性，具有广阔的发展和应用前景。

Adriamycin complex and its preparation method and Application

The present invention discloses a adriamycin complex and its preparation method and application. The doxorubicin complex preparation method, which comprises the following steps: (1) will join the ultrasound adriamycin aqueous medium, obtained adriamycin solution; (2) the steps under the stirring condition (1) the adriamycin solution added to aqueous polymer solution as solvent, stirring. You can get the doxorubicin complex; the doxorubicin complex, combined with adriamycin molecules and polymer molecules by intermolecular forces. The preparation method of the invention is simple and easy, without any chemical reaction, and avoids complicated reaction preparation and post treatment process. Doxorubicin complex not only has high drug loading, but also under physiological conditions of slow release of doxorubicin, which is beneficial to long-term effects of drugs on tumor tissue; the tumor cells showed good anti-tumor activity, has broad prospects for development and application.

【技术实现步骤摘要】
一种阿霉素复合物及其制备方法与应用
本专利技术涉及一种阿霉素复合物及其制备方法与应用。
技术介绍
阿霉素(Doxorubicin,DOX)是目前临床上常用的抗肿瘤药物之一，属于蒽环类抗生素，可抑制DNA和RNA的合成，抗瘤谱较广，主要用于治疗急性白血病、淋巴瘤腺癌、肺癌及多种其他实体肿瘤。然而阿霉素毒性较大，对正常组织和器官如心脏、肾脏等具有明显的毒副作用，长期服用会产生不可逆的心肌病变,骨髓抑制,脱发,消化道症状等。为了降低毒副作用，目前，使用药物载体(如：脂质体、纳米粒和聚合物胶束等)对药物进行物理包埋成为一个常用的纳米药物制备方法。F.Qiu等人(F.Qiu,D.L.Wang,Q.Zhu,L.J.Zhu,G.S.Tong,Y.F.Lu,D.Y.YanandX.Y.Zhu,Real-timemonitoringofanticancerdrugreleasewithhighlyfluorescentstar-conjugatedcopolymerasadrugcarrier,Biomacromolecules,2014,15,1355-1364)利用聚合物胶束负载阿霉素来进行药物传输，使药物有效地得到缓释，并降低药物自身毒性。另外将抗癌药键合到亲水载体上也同样是一种构建纳米药物的有效方式。公开号为CN103961715A的中国专利文献公开了一种自组装的阿霉素纳米药物前体及其制备方法，通过将阿霉素键合到亲水的聚合物链(PEG2000)上，形成阿霉素纳米药物前体，研究结果表明该方法延长了纳米药物的血循环时间并在KB、MCF-7、MCF-7/DAR、KBv200等多种敏感及耐药肿瘤细胞系中均表现出良好的抗肿瘤活性。聚-γ-谷氨酸是一种水溶性，生物降解，不含毒性的生物高分子。聚-γ-谷氨酸可以在人体内被降解成内源性物质谷氨酸，不易产生积蓄和毒副作用。C.Li在文献中列出了与聚谷氨酸偶联的许多抗癌药(C.Li,Poly(L-glutamicacid)-anticancerdrugconjugates,Adv.DrugDel.Rev.,2002,54,695-713)。但是化学键合引入抗癌药，反应程序繁多，后处理复杂，而且一般载药率较低。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种阿霉素复合物及其制备方法与应用，该方法通过静电作用力将疏水的阿霉素分子复合到亲水的聚-γ-谷氨酸(链段分子量在10000～100000)，显著减缓了阿霉素的释放速度，并证实在高剂量给药的前提下，该复合物对MCF-7、Hela等多种肿瘤细胞中均表现出良好的抗肿瘤活性。本专利技术提供的一种阿霉素复合物的制备方法，它包括如下步骤：(1)将阿霉素加入水性介质中，超声，得到阿霉素溶液；(2)在搅拌条件下将步骤(1)所述的阿霉素溶液加入到以水性介质为溶剂的聚合物溶液中，继续搅拌，即可得到所述阿霉素复合物；所述阿霉素复合物中，阿霉素分子与聚合物分子通过分子间作用力结合。上述的制备方法，步骤(1)中，所述阿霉素溶液的浓度可为50～1000μg/mL，具体可为100μg/mL。所述阿霉素以其药学上可接受的盐的形式进行添加，所述阿霉素药学上可接受的盐具体可为阿霉素盐酸盐。所述的水性介质为以水为介质的溶剂，包括但不限于缓冲溶液(pH为7.4～5.0)、生理盐水或超纯水，具体可为磷酸盐缓冲溶液，优选浓度为10mM的磷酸盐缓冲溶液。所述超声的时间可为10～90分钟，具体可为15分钟；功率可为60～200W，具体可为100W。上述的制备方法，步骤(2)中，所述聚合物溶液的浓度可为1～4mg/mL，具体可为1mg/mL；所述的水性介质为以水为介质的溶剂，包括但不限于缓冲溶液(pH为7.4～5.0)、生理盐水或超纯水，具体可与所述阿霉素溶液的溶剂相同，如磷酸盐缓冲溶液，优选浓度为10nM的磷酸盐缓冲溶液。所述聚合物为聚合物分子可与阿霉素分子之间通过分子间作用力结合的聚合物，如亲水性且侧链多羧基、氨基、羟基的聚合物，包括但不限于：聚谷氨酸、聚赖氨酸、聚唾液酸或修饰过的聚谷氨酸、聚赖氨酸、聚唾液酸及其可接受的盐中的一种或几种。所述的修饰可为叶酸、RGD、半乳糖等靶向基团修饰、穿膜肽修饰或蛋白修饰。所述聚合物具体可为聚-γ-谷氨酸。所述聚合物的重均分子量可为10000～100000，优选为15000～50000，具体可为15000。上述的制备方法，步骤(3)中，所述阿霉素溶液和所述聚合物溶液的体积比可为(0.5～1)：1，具体可为1：1。所述搅拌的速度可为500～1500rpm，具体可为1000rpm。所述继续搅拌的时间可为4～12h，具体可为4h。所述分子间作用力选自静电作用、氢键作用等，优选静电作用。上述的制备方法对温度和压强没有过多限制，在常温常压，有氧或无氧条件下均可进行。由上述的制备方法制备得到的阿霉素复合药物，均在本专利技术的保护范围内，该阿霉素复合物以阿霉素为活性成分，亲水性聚-γ-谷氨酸为载体，通过分子间作用力结合而成。该作用力的强弱变化与阿霉素释放的快慢相关。此处的分子间作用力选自静电作用、氢键作用等。作为优选，所述的分子间作用力为静电作用，可以获得pH响应释放功能，保证阿霉素复合物在肿瘤组织处有效释放药物。上述的阿霉素复合物在制备抗肿瘤药物中的应用，也在本专利技术的保护范围内。所述肿瘤可为癌。所述癌可为实体癌，优选为乳腺癌、膀胱癌、卵巢癌、子宫癌、淋巴癌、肺癌、肝癌、皮肤癌或胃癌。给药方式优选为静脉注射、瘤旁注射或瘤内注射。本专利技术具有如下有益效果：与现有技术相比，本专利技术通过结合阿霉素与聚-γ-谷氨酸，极大的克服了阿霉素毒副作用大的缺陷，尤其是在高浓度阿霉素的情况下，毒性依然较阿霉素自身小。阿霉素复合物制备方法简单易行，不存在任何化学反应的进行，避免了复杂的反应制备及后处理过程。本专利技术制备的阿霉素复合物不仅具有高的载药量，还能在生理条件下缓慢释放阿霉素，这利于药物对肿瘤组织的长期作用。制备得到的阿霉素复合物对多种肿瘤细胞中均表现出良好的抗肿瘤活性，具有广阔的发展和应用前景。附图说明图1为实施例1配制的阿霉素溶液中阿霉素的透射电镜照片。图2为实施例1制备的聚-γ-谷氨酸/阿霉素复合抗癌药的透射电镜照片。图3为实施例2为阿霉素、聚-γ-谷氨酸/阿霉素复合抗癌药随时间变化的体外累积释放百分比图。图4为实施例1制备的聚-γ-谷氨酸/阿霉素复合抗癌药的毒性效果图，其中图4(A)为对MCF-7人乳腺癌细胞的毒性效果图、图4(B)为Hela人宫颈癌细胞的毒性效果图。图5为实施例1制备的聚-γ-谷氨酸/阿霉素复合抗癌药作用于MCF-7人乳腺癌细胞后的细胞对药物摄取的效果图。图6为实施例1制备的聚-γ-谷氨酸/阿霉素复合抗癌药抑制雌性荷瘤BALB/c小鼠肿瘤的生长(n＝6)。其中，图6(A)为各组小鼠体重随时间的变化曲线；图6(B)为肿瘤体积随时间的变化；图6(C)为各组小鼠生存期曲线。具体实施方式下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。磷酸盐缓冲液的pH为7.4，制备过程如下：将体积为8.1mL，浓度为0.2M的磷酸一氢钠溶液和体积为1.9mL，浓度为0.2M的磷酸二氢钠溶液混合得到磷酸盐缓冲本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种阿霉素复合物的制备方法，它包括如下步骤：(1)将阿霉素加入水性介质中，超声，得到阿霉素溶液；(2)在搅拌条件下将步骤(1)所述的阿霉素溶液加入到以水性介质为溶剂的聚合物溶液中，继续搅拌，即可得到所述阿霉素复合物；所述阿霉素复合物中，阿霉素分子与聚合物分子通过分子间作用力结合。

【技术特征摘要】
1.一种阿霉素复合物的制备方法，它包括如下步骤：(1)将阿霉素加入水性介质中，超声，得到阿霉素溶液；(2)在搅拌条件下将步骤(1)所述的阿霉素溶液加入到以水性介质为溶剂的聚合物溶液中，继续搅拌，即可得到所述阿霉素复合物；所述阿霉素复合物中，阿霉素分子与聚合物分子通过分子间作用力结合。2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤(1)中，所述阿霉素溶液的浓度为50～1000μg/mL；所述阿霉素以其药学上可接受的盐的形式进行添加；所述水性介质为缓冲溶液、生理盐水或超纯水。3.根据权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于：步骤(1)中，所述超声的时间为10～90分钟，功率为60～200W。4.根据权利要求1-3中任一项所述的制备方法，其特征在于：步骤(2)中，所述聚合物溶液的浓度为1～4mg/mL；所述水性介质为缓冲溶液、生理盐水或超纯水。5.根据权利要求1-4中...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨振忠，杨赛娜，屈小中，
申请(专利权)人：中国科学院化学研究所，
类型：发明
国别省市：北京,11