葫芦巴碱在制备体外治疗细粒棘球蚴病的药物中的应用制造技术

本发明专利技术公开了葫芦巴碱在制备体外治疗细粒棘球蚴病的药物中的应用，涉及医药技术领域。本发明专利技术的葫芦巴碱用于制备体外治疗细粒棘球蚴病的药物，所述葫芦巴碱为葫芦巴植物的提取物，对人类产生的副作用较小。

Application of fenugreek in the preparation of drugs for echinococcosis in vitro

The invention discloses the application of fenugreek in the preparation of drugs for treating echinococcosis in vitro, and relates to the field of medical technology. The alkaloid of the present invention is used for the preparation of drugs for treating echinococcosis in vitro, which is a extract of fenugreek plants, and has less side effects on human beings.

【技术实现步骤摘要】
葫芦巴碱在制备体外治疗细粒棘球蚴病的药物中的应用
本专利技术涉及治疗细粒棘球蚴病
，尤其涉及葫芦巴碱在制备体外治疗细粒棘球蚴病的药物中的应用。
技术介绍
葫芦巴碱，豆科植物葫芦巴的提取物，可以从植物中广泛提取和相比不太对人类有毒的化学药品。葫芦巴碱是一种化合物,一直声称具有抗癌、抗偏头痛及降胆固醇和抗糖尿病活动。同时也有报道,葫芦巴碱对2型糖尿病大鼠的治疗效应,通过口服葫芦巴碱导致血清胰岛素水平下降。囊型包虫病(CE)是一个世界性的人畜共患病，影响人类和家畜寄生绦虫的幼虫阶段造成的棘球绦虫，它是一个全球性的公共卫生和经济问题。CE如果不及时治疗会导致严重的发病率和死亡。人类感染寄生虫的主要途径是口腔摄入虫卵。虫卵孵化在胃肠道,穿透肠道壁,进入血液中,并最终定位主要在肝脏和肺。目前,手术是最有效的选择CE治疗,因为它有可能通过完整的切除囊肿达到治愈的条件。然而,术后复发CE是由于囊肿破裂或在手术过程中囊肿内容物的泄漏，这是一个主要的外科手术的并发症包虫病。因此,使用有效的药物治疗是一个重要的手术技术的一部分,有助于降低手术中原头节泄漏的风险。手术过程中使用药物一种是口服的方式，另外一种是在暴露手术视野的情况下将药物覆盖在有原头节的区域以期能够杀死原头节降低其存活能力。然而,现有使用的药物,包括食盐水,硝酸银,溴棕三甲铵,乙醇。众所周知,包虫病所引起的不良反应包括动脉粥样硬化,肝坏死,变性血红素症等。因此，急需寻找新的安全有效的药物来治疗细粒棘球蚴病，并且可在手术过程中安全使用。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术实施例提供了葫芦巴碱在制备体外治疗细粒棘球蚴病的药物中的应用，主要目的是提供一种可有效控制和降低手术治疗囊型包虫病过程中囊肿内容物泄漏的药物方法。为达到上述目的，本专利技术主要提供了如下技术方案：一方面，本专利技术实施例提供了葫芦巴碱在制备体外治疗细粒棘球蚴病的药物中的应用。作为优选，所述葫芦巴碱为葫芦巴植物的提取物。作为优选，所述药物是由葫芦巴碱和药学上可接收的载体和/或助剂组成。本专利技术利用不同浓度的葫芦巴碱提取物来处理细粒棘球蚴的原头节，通过观察分析确定了葫芦巴碱对上述原头节具有以下影响：(1)体外使用葫芦巴碱影响细粒棘球蚴中Nrf2的定位；(2)体外使用葫芦巴碱影响NQO-1和HO-1的活性；(研究已经通过诱导Nrf2依赖性反应(包括使用抗氧化剂和解毒酶)以防止细胞中产生的氧化损伤。例如，HO-1和NQO-1的表达都可以被Nrf2调节，是Nrf2信号通路中的特异性的抗氧化酶。HO-1和NQO-1作为抗氧化酶和Ⅱ型解毒酶对Nrf2-ARE的调节，具有基因转录和表达的功能，同时可以增强体内氧化应激的抵抗力和机体的防御保护能力。HO-1和NQO-1是诱导应激，缺氧，内毒素，热休克，重金属，血红蛋白，细胞因子和抗氧化剂等的初始酶，这些因素均可诱导HO-1和NQO-1活性的表达。HO-1和NQO-1系统参与许多生理和病理过程的调节，HO-1和NQO-1表达升高可增加人体的抗氧化能力，减少氧化损伤。)(3)体外使用葫芦巴碱影响细粒棘球蚴原头节的形态；(4)体外使用葫芦巴碱影响细粒棘球蚴原头节的活力；(5)体外使用葫芦巴碱影响细粒棘球蚴原头节的结构；(6)体外使用葫芦巴碱诱导Caspase凋亡。(Caspase：半胱天冬蛋白酶是天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶家族的一部分，其通过各种刺激作用如氧化应激调节细胞凋亡并且在诱导凋亡中起到重要作用。Caspase-3是凋亡过程中的重要因素，其在蛋白水解活化中能够进一步被激活)。与现有技术相比，本专利技术的有益效果是：本专利技术针对传统药物不能有效控制和降低手术治疗囊型包虫病过程中囊肿内容物泄漏的技术问题，通过研究Nrf2蛋白表达在细粒棘球蚴原头节、葫芦巴碱在Nrf2信号通路的抑制效应以及Nrf2信号通路抑制细粒棘球蚴的影响，采用了将葫芦巴碱作为Nrf2转录因子抑制剂且可在体外对细粒棘球蚴原头节进行控制的技术手段，并且葫芦巴碱为植物提取物，相对其他药物，对人类副作用较小，达到了葫芦巴碱可有效抑制细粒棘球蚴进而可应用于体外治疗细粒棘球蚴病的药物的技术效果。附图说明：图1是本专利技术实施例1提供的细粒棘球蚴中Nrf2蛋白的免疫荧光定位及表达的效果图(A:Nrf2未处理组显示绿色荧光信号，B:细胞核显示红色表示信号,C:混合之后存在于细胞质中)；图2是本专利技术实施例1提供的葫芦巴碱作用于细粒棘球蚴中Nrf2蛋白的免疫荧光定位及表达的效果图(A-C：使用PBS代替Nrf2抗体；D-F:对照组；G-I：原头节使用葫芦巴碱孵育，浓度为100μmol/L36小时；J-L:原头节使用葫芦巴碱孵育，浓度为200μmol/L36小时)；图3是本专利技术实施例1提供的葫芦巴碱作用于原头节3天和6天后的HO-1活性柱状图(Bargraphindicates：*与对照组相比，P<0.05；#组间比较，P<0.05)；图4是本专利技术实施例1提供的葫芦巴碱作用于原头节3天和6天后的NQO-1活性柱状图(Bargraphindicates：*与对照组相比，P<0.05；#组间比较，P<0.05)；图5是本专利技术实施例1提供的原头节经过葫芦巴碱处理之后与对照组形态变化的光镜图(A：对照组,B：原头节处理组，C：使用100μmol/L处理6天，D：使用100μmol/L处理12天，E：使用250μmol/L处理6天，F：使用250μmol/L处理12天)；图6是本专利技术实施例1提供的细粒棘球蚴使用不同浓度葫芦巴碱作用后的活力曲线图；图7是本专利技术实施例1提供的原头节使用不同浓度葫芦巴碱作用后的结构电镜图(A：对照组，B：DMSO处理组，C：100μmol/L处理2天，D:100μmol/L处理6天，E:200μmol/L处理2天，F:200μmol/L处理6天)；图8是本专利技术实施例1提供的原头节经葫芦巴碱处理24小时和48小时后caspase-3的活性柱状图(Bargraphindicates：*与对照组相比，P<0.05；#组间处理，P<0.05)。具体实施方式为更进一步阐述本专利技术为达成预定专利技术目的所采取的技术手段及功效,以下以较佳实施例，对依据本专利技术申请的具体实施方式、技术方案、特征及其功效，详细说明如后。下述说明中的多个实施例中的特定特征、结构、或特点可由任何合适形式组合。实施例1准备材料：Nrf2抗体购自圣科鲁兹,葫芦巴碱是购自Sigma奥尔德里奇(St，路易斯,密苏里州,美国),将葫芦巴碱溶解在浓度为10-1mol/L二甲亚砜(DMSO)中(购自索莱宝公司)，基于最初进行的预实验结果,提取葫芦巴碱的浓度按照相应的剂量进行稀释，并且需要新鲜配制，现用现配，配制完成需要过滤除菌使用，RPMI1640培养基购于Sigma，HO-1和NQO-1试验设备购于武汉优尔生实验设备公司。收集和培养原头节：从被宰杀的绵羊和山羊的肝脏提取细粒棘球蚴并收集，感染肝脏表面消毒后，将收集的包虫囊液放进盛放有含抗生素(100U/毫升pencillin和100U/毫升链霉素)的无菌生理盐水的容器中静置30分钟；细粒棘球蚴的原头节沉积在上述容器的底部,放弃上层清液,选留容器底部沉积物并采用离心管离心；在培养和感染本文档来自技高网...

【技术保护点】
葫芦巴碱在制备体外治疗细粒棘球蚴病的药物中的应用。

【技术特征摘要】
1.葫芦巴碱在制备体外治疗细粒棘球蚴病的药物中的应用。2.根据权利要求1所述的葫芦巴碱在制备体外治疗细粒棘球蚴病的药物中的应用，其特征在于，所述葫芦巴碱为葫芦...

【专利技术属性】
技术研发人员：吕海龙，姜玉峰，秦文娟，
申请(专利权)人：吕海龙，
类型：发明
国别省市：新疆,65