黑蒜萃取物及其制备方法与用途技术

本发明专利技术公开一种黑蒜萃取物及其制备方法与应用，本发明专利技术提供的黑蒜萃取物通过以下制备方法制得：将黑蒜粉末以乙酸乙酯进行萃取，获得不溶于乙酸乙酯的第一粗萃物，将第一粗萃物以正丁醇进行萃取，获得溶解于正丁醇的第一黑蒜萃取物和不溶于正丁醇的第二粗萃物，将不溶于正丁醇的第二粗萃物以水进行萃取，以获得溶解于水中的第二黑蒜萃取物，以及第一黑蒜萃取物与第二黑蒜萃取物具有护肝效用，可以应用在制备护肝药品和保健品中。

Black garlic extract and its preparation method and Application

The invention discloses a black garlic extract and preparation method and application thereof, black garlic extract provided by the preparation method: black garlic powder was extracted with ethyl acetate, obtained the first crude extract insoluble in ethyl acetate, the crude extract was extracted with n-butanol first, black garlic extract was dissolved and second Yu Zheng butanol extract insoluble Yu Zheng butanol, second crude extract insoluble Yu Zheng butanol was extracted with water, second black garlic extract to get dissolved in water, and the first black garlic extract and second black garlic extract with liver function that can be used in the preparation of hepatoprotective drugs and health care products.

【技术实现步骤摘要】
黑蒜萃取物及其制备方法与用途
本专利技术涉及药品和食品领域，尤其涉及一种黑蒜萃取物及其制备方法与用途。
技术介绍
肝癌是全球第5常见的癌症，为癌症相关死亡的常见原因。肝炎是指肝细胞损伤发炎，引起肝炎的原因包括病毒、酒精、药物等。肝脏发炎可以增加肝硬化、肝癌的发生率。由于国人一直饱受病毒性肝炎的威协，加上生活作息及饮食习惯的改变，使肝脏受损机会增加，护肝药品和保健品的需求很广。大蒜头除了作为日常食材或香辛佐料外，更是“药食两用”的药材。传统中医典籍记载：大蒜味辛，性温，具有“温中健胃，消食理气，解毒杀虫”的功效。研究报告也指出大蒜具有良好的抗氧化、抗菌、预防心血管疾病等生理活性以及良好抗肿瘤作用。黑蒜的制造过程主要是将筛选过的新鲜大蒜控制在高温与高湿的环境下发酵熟成，此为梅纳反应。在梅纳反应制程中，大蒜特有的大蒜素转化为无蒜臭、低刺激性的硫化物，γ-谷氨酰半胱氨酸(γ-glutamylcysteine)转变生成S-烯丙基半胱氨酸(S-allylcysyeine，SAC)，蛋白质分解成胺基酸，碳水化合物分解成果糖，蒜瓣也由原来白色转变为黑褐色，最后经冷却干燥而成。黑蒜柔软且富有弹性，入口后软烂香甜且无大蒜的辛辣感和不愉快气味，可直接食用，为近年来欧美国家、日本与韩国等热门的保健食品。梅纳反应发生主要是因为食品中的胺基与羰基产生非酵素褐变反应，一般认为，梅纳反应的产物(maillardreactionproducts,MRP)会赋予食品特殊的色泽与风味，研究也指出，黑蒜制程中，梅纳反应的发生使糖类与胺基酸之MRP具有比大蒜更强的抗氧化活性。然而却鲜少人进一步地探讨黑蒜萃取物的其他用途。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种黑蒜水萃取物及其制备方法，以及所述黑蒜水在护肝药品和护肝保健品中的应用。基于上述目的，本
技术实现思路
为：一种黑蒜萃取物，其特征在于通过以下制备方法获得：将黑蒜粉末以乙酸乙酯进行萃取，获得不溶于乙酸乙酯的第一粗萃物，将第一粗萃物以正丁醇进行萃取，获得溶解于正丁醇的第一黑蒜萃取物和不溶于正丁醇的第二粗萃物，其中乙酸乙酯与黑蒜粉的重量比为3-10:1，正丁醇与第一粗萃物的重量比为3-10:1。进一步地将不溶于正丁醇的第二粗萃物以水进行萃取，以获得溶解于水中的第二黑蒜萃取物，其中水与第二粗萃物的重量比为3-10:1。进一步地，依照前述步骤萃取的黑蒜萃取物，即溶解于正丁醇层的第一黑蒜萃取物以及溶解于水层的第二黑蒜萃取物应用在护肝药物或者护肝保健食品中。本专利技术用不同极性物质溶剂进行萃取，用以提取出可透过高极性物质溶剂或者水溶性物质的最主要的具有护肝功能的黑蒜萃取物。【附图说明】图1、黑蒜萃取物对于四氯化碳处理小鼠的血清谷丙转氨酶ALT效应图。图2、黑蒜萃取物对于四氯化碳处理小鼠的血清谷草转氨酶AST效应图。图3、小鼠肝损伤组织染色图，肝组织用H&E(400X)染色拍照，箭头表示坏死细胞，其中A为控制组；B为经四氯化碳处理的样品；C为预处理水飞蓟素组的样品；D为预处理200mg/kg的正丁醇层黑蒜萃取物的样品；E为预处理500mg/kg的正丁醇层黑蒜萃取物的样品；F为预处理200mg/kg的水层黑蒜萃取物的样品；G为预处理200mg/kg的水层黑蒜萃取物的样品。图4、黑蒜萃取物对于四氯化碳处理小鼠的肝脏丙二醛MDA含量的效应图。图5、黑蒜萃取物对于四氯化碳处理小鼠的肝脏谷胱甘肽GSH含量的效应图。图6、黑蒜萃取物对于四氯化碳处理小鼠的肝脏CAT含量的效应图。图7、黑蒜萃取物对于四氯化碳处理小鼠的肝脏SOD含量的效应图。图8、黑蒜萃取物对于四氯化碳处理小鼠的肝脏GSH-Px含量的效应图。图9、黑蒜萃取物对于四氯化碳处理小鼠的肝脏GSH-Rd含量的效应图。【具体实施方式】本专利技术提供一种黑蒜萃取物的制备方法，包括将黑蒜粉末以乙酸乙酯进行萃取，获得不溶于乙酸乙酯的第一粗萃物，将第一粗萃物以正丁醇进行萃取，获得溶解于正丁醇的第一黑蒜萃取物以及不溶于正丁醇的第二粗萃物。本专利技术萃取步骤中还可包含将第二粗萃物以水进行萃取，以获得溶解于水中的第二黑蒜萃取物。依照前述步骤萃取的黑蒜萃取物，即溶解于正丁醇层的第一黑蒜萃取物以及溶解于水层的第二黑蒜萃取物具有护肝功能，可应用于制备护肝药物，或者制备包含黑蒜萃取物的食品。上述乙酸乙酯与黑蒜粉的重量比为3-10:1，正丁醇与第一粗萃物的重量比为3-10:1，水与第二粗萃物的重量比为3-10:1。每一种溶剂萃取的次数可为1次至5次，较佳可为2次或3次。实施例：一、黑蒜萃取物的制备将黑蒜打碎后称重，进行溶剂萃取时，首先以黑蒜重量5倍量的乙酸乙酯萃取，萃取完后趁热过滤，连续萃取3次，获得不溶于乙酸乙酯的萃取物。取不溶于乙酸乙酯的粗萃取物用5倍不溶于乙酸乙酯的粗萃取物重量的正丁醇萃取，萃取完后过滤，连续萃取3次，获得溶解于正丁醇层的黑蒜萃取物和不溶于正丁醇的粗萃取物。取不溶于正丁醇的粗萃取物用5倍不溶于正丁醇的粗萃取物重量的水萃取，萃取完后过滤，连续萃取3次，获得溶解于水层的黑蒜萃取物。获得上述乙酸乙酯层黑蒜萃取物、正丁醇层黑蒜萃取物、水层黑蒜萃取物3个不同极性的黑蒜萃取物后，即进行以下的实验。二、黑蒜萃取物的护肝实验(一)、四氯化碳诱导肝损伤1、利用四氯化碳诱导肝损伤实验模式将采用四氯化碳诱导肝损伤模式，C57BL/6系雄性小鼠经预养7天后，随机分组，分别为控制组、四氯化碳组、水飞蓟素组(200mg/kg)、黑蒜乙酸乙酯层组(200mg/kg、500mg/kg)、黑蒜正丁醇层组(200mg/kg、500mg/kg)及黑蒜水层组(200mg/kg、500mg/kg)。每组10只，实验时控制组与四氯化碳组口服给予水，水飞蓟素组及黑蒜组分别于连续7天口服给予水飞蓟素及各黑蒜分层萃取物。于第7天将各组动物禁食16小时，控制组腹腔注射橄榄油，注射剂量为10ml/kg，其他组将0.2％的四氯化碳溶于橄榄油，并注射于腹腔诱导肝损伤，注射剂量为10ml/kg。2、血液及肝脏均质液的制备于四氯化碳注射后24小时，小鼠麻醉后颈动脉采血，全血离心，分离血清，取上清液，以供测定肝功能生化指数。解剖取肝制备为肝脏检品，并取出肝脏大叶部分以福尔马林固定，作为病理切片用；其余肝脏检品以生理盐水1:1质量比稀释，均质化后离心，然后取上清液制备为肝脏均质检品，储存于-80℃备用，以供分析肝组织一系列酵素活性。(二)、血清肝功能生化指数检测小鼠血液样品先在室温下放置1小时使其凝结，离心机于4℃，每分钟3000rpm，离心10分钟，分离血清，取上清液以自动生化分析仪检测谷丙转氨酶ALT和谷草转氨酶AST等肝功能生化指数。(三)、病理检验小鼠均予以牺牲，在最大右叶的同一位置割取1公分见方的肝组织，放入10％的中性福尔马林中，做进一步的H&E病理染色，观察其肝脏组织受损程度。将肝脏组织发炎与肝脏细胞坏死予以半定量分析，肝损伤程度是以组织切片中损伤面积百分比来评估，参照Knodell等人发表的评分方法共分为四个等级，分别为：0：无病变(none，0％)；1：轻微(slight，1-25％)；2：轻度(mild，26-50％)；3：中度(moderate，51-75％)；4：严重(serve，76-1本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种黑蒜萃取物，其特征在于，所述黑蒜萃取物通过以下制备方法获得：将黑蒜粉末以乙酸乙酯进行萃取，获得不溶于乙酸乙酯的第一粗萃物，将第一粗萃物以正丁醇进行萃取，获得溶解于正丁醇的第一黑蒜萃取物和不溶于正丁醇的第二粗萃物，其中乙酸乙酯与黑蒜粉的重量比为3‑10:1，正丁醇与第一粗萃物的重量比为3‑10:1。

【技术特征摘要】
1.一种黑蒜萃取物，其特征在于，所述黑蒜萃取物通过以下制备方法获得：将黑蒜粉末以乙酸乙酯进行萃取，获得不溶于乙酸乙酯的第一粗萃物，将第一粗萃物以正丁醇进行萃取，获得溶解于正丁醇的第一黑蒜萃取物和不溶于正丁醇的第二粗萃物，其中乙酸乙酯与黑蒜粉的重量比为3-10:1，正丁醇与...

【专利技术属性】
技术研发人员：蔡仁杰，谢昌卫，陈颐安，张兆凯，叶仁祥，吴荣聪，
申请(专利权)人：育生厦门生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：福建,35