一种血液中循环肿瘤细胞的灭活系统及应用技术方案

本发明专利技术公开了一种光化学法灭活血液或血液制品中循环肿瘤细胞和/或肿瘤干细胞的系统以及核黄素在制备用于光化学法灭活血液或血液制品中循环肿瘤细胞和/或肿瘤干细胞的药剂中的应用，所述的系统以及应用完全诱导外周血液中肿瘤细胞和/或肿瘤干细胞凋亡失去增殖能力，最大限度保持患者血液细胞、凝血功能、免疫功能。

An inactivated system of circulating tumor cells in blood and its application

The invention discloses a method of photochemical inactivation of blood or blood products in circulating tumor cells and / or tumor stem cells in drug application of circulating tumor cells and / or tumor stem cell system and riboflavin in preparation for photochemical inactivation of blood or blood products, system and application of the complete induction in the peripheral blood of tumor cells and / or apoptosis of tumor stem cells lose proliferative capacity, to maintain maximum blood cells, blood coagulation function, immune function.

【技术实现步骤摘要】
一种血液中循环肿瘤细胞的灭活系统及应用
本专利技术属于医疗领域，特别涉及一种用于核黄素光化学法灭活循环肿瘤细胞和/或肿瘤干细胞的系统及应用。
技术介绍
循环肿瘤细胞和/或肿瘤干细胞是存在于外周血中的各类肿瘤细胞的统称，因自发或诊疗操作使其从实体肿瘤病灶脱落，大部分循环肿瘤细胞和/或肿瘤干细胞在进入外周血后发生凋亡或被吞噬，少数能够逃逸并发展成为转移灶，增加恶性肿瘤患者复发风险。特别是，恶性实体肿瘤细胞手术前脱落入血以及外科手术切除肿瘤过程中均无法避免存在肿瘤细胞血行播散问题。目前已有报道对循环肿瘤细胞的处理方法，例如：CN204824871U、CN203846026U公开循环肿瘤细胞分离方法和富集装置，通过滤膜过滤实现了对循环肿瘤细胞最大可能的分离富集，并能实现循环反复采集；CN103732271A公开了将病人血液流过容器时其中的肿瘤细胞就被特异性吸附而不会再流回病人血液，从而被从血液中清除掉，以减少肿瘤病人的复发而延长其生存期。周裕凯(亚甲蓝光化学疗法处理血液中肿瘤细胞的展望，中国煤炭工业医学杂志，2010)讨论了亚甲蓝光化学疗法处理血液中肿瘤细胞技术，但亚甲蓝存在残余毒性、处理后血浆蛋白的损失较大、操作繁琐。核黄素(RPT)光化学法被认为是处理血液及血液制品具有发展前景的方法，其原理是：核黄素因结构特性可以嵌入病毒的核酸内，在照射下，激发其电子的转移，氧化核酸上的鸟嘌呤残基，病毒的核酸被修饰而受损，不能再进行复制和修复，从而达到灭活病毒的效果，且核黄素为安全药品，没有毒性和副作用，添加处理后不用滤除。然而，目前核黄素光化学法被常被用于处理血液及血液制品中病毒的灭活。例如：专利CN201418870Y、CN204092616U、CN104248643A等公开了核黄素灭活全血或血浆病毒的装置和方法，通过在设置核黄素添加元件将核黄素加入至血浆中并进行光照灭活，能够灭活血浆中各类病原体，改善血浆安全性。但上述方法处理血液及血液制品时通常会破坏淋巴细胞。董矜等(光照核黄素对肿瘤细胞生长和端粒长度的作用，第6次全国微生物学与免疫学大会论文摘要汇编，2004)研究了光照核黄素对肿瘤细胞生长和端粒长度的作用。但上述研究没有给出核黄素用于处理血液及血液制品灭活肿瘤细胞的具体方案。为克服现有技术的缺陷，本专利技术基于核黄素光化学技术在血液制品病毒、细菌、原虫灭活以及淋巴细胞灭活预防输血相关移植物抗宿主病的理论研究与临床应用基础上，建立一套患者能够耐受、连续处理外周血液的技术方法，完全诱导外周血液中肿瘤细胞和/或肿瘤干细胞凋亡失去增殖能力，最大限度保持患者血液细胞、凝血功能、免疫功能。
技术实现思路
本专利技术的一个目的是解决当前恶性实体肿瘤细胞手术前脱落入血以及外科手术切除肿瘤过程中无法避免的肿瘤细胞血行播散问题。本专利技术的另一个目的是实现了采用光化学技术进行血液或血液制品中灭活肿瘤细胞的同时，淋巴细胞可保持一定的活性。本专利技术的第一方面提供了一种核黄素在制备用于光化学法灭活血液或血液制品中循环肿瘤细胞和/或肿瘤干细胞的药剂中的应用。本专利技术所述的核黄素在血液或血液制品中的浓度为1-70μmol/L，更优选的，所述的核黄素在血液或血液制品中的浓度为40-60μmol/L，最优选的，所述的核黄素在血液或血液制品中的浓度为50μmol/L。本专利技术所述的药剂为核黄素的溶液，例如核黄素的生理盐水溶液，本领域技术人员可以理解，核黄素的浓度可以是任意的，在使用前配置成所需的浓度，更优选的，所述的核黄素溶液浓度为100-20000μmol/L，最优选的，所述的核黄素溶液浓度为1000-10000μmol/L，例如是2000μmol/L、3000μmol/L、4000μmol/L、5000μmol/L、6000μmol/L、7000μmol/L、8000μmol/L。本专利技术所述的光化学法使用的光源可以为任意的光源，只要所述的光源可以激发核黄素的电子转移从而产生自由基。例如，所述的光源选自紫外光光源、可见光光源或红外光光源，优选的，所述的光源为紫外光光源或可见光光源，更优选的，所述的光源为300-600nm波长的光源。本专利技术所述的光化学法的辐照剂量可以根据血液或血液制品类型进行选择，例如血液或血液制品中含有较高含量的红细胞时，则需要提高辐射剂量。另外，辐射剂量的选择也需要考虑到安全因素，过高剂量的辐射可能会对血液成分产生影响。因而，本专利技术所述的光化学法的辐照剂量为0.003-15J/cm2，优选的，所述的辐照剂量为9-14J/cm2，更优选的，所述的辐照剂量为10-13J/cm2。本专利技术所述的光化学法灭活血液或血液制品中循环肿瘤细胞和/或肿瘤干细胞能够保持血液或血液制品中淋巴细胞的活性。本专利技术的还一方面提供了一种核黄素在制备光化学法灭活血液或血液制品中循环肿瘤细胞和/或肿瘤干细胞的系统中的应用，所述的系统包括血液输入口、血液输出口、透光容器、核黄素添加装置和光源。本专利技术的还一方面提供了一种光化学法灭活血液或血液制品循环肿瘤细胞和/或肿瘤干细胞的系统，所述的系统包括血液输入口、血液输出口、透光容器、核黄素添加装置和光源。所述的透光容器可以为任何适宜的能够透射可见光的装置。优选的，所述的透光容器为透光管、透光血袋、透光瓶等。更优选的，所述的透光容器为透光管，最优选的，所述的透光管呈蛇形排列。所述的透光容器可以为玻璃、塑料或聚合物，例如乙烯-醋酸乙烯酯共聚物(EVA)材质。所述的光源可以为任意的光源，只要所述的光源可以激发核黄素的电子转移从而产生自由基。例如，所述的光源选自紫外光光源、可见光光源或红外光光源，优选的，所述的光源为紫外光光源或可见光源，更优选的，所述的光源为300-600nm波长的光源。本专利技术所述的透光容器与血液输入口和血液输出口相连，所述的光源设置在透光容器的一侧或周围，优选的，所述的光源可以为一个或多个。所述的核黄素添加装置与透光容器连通，并且核黄素添加装置与透光容器连通之间设置控制装置，优选的，所述的控制装置为开关、易折件等。优选的，所述的光化学法灭活血液或血液制品中循环肿瘤细胞和/或肿瘤干细胞的系统还包括抗凝剂添加装置。更优选的，所述的抗凝剂添加装置与透光容器连通之间设置控制装置，优选的，所述的控制装置为开关、易折件等。优选的，所述的光化学法灭活血液或血液制品中循环肿瘤细胞和/或肿瘤干细胞的系统还包括蠕动泵。所述的蠕动泵能够保持连续处理外周血液。本专利技术所述的血液制品包括全血、血浆、血小板或其它血液制品。本专利技术的还一方面提供了一种核黄素在制备治疗肿瘤的药剂上的应用，所述的药剂用于光化学法灭活血液或血液制品中循环肿瘤细胞和/或肿瘤干细胞。本专利技术的还一方面提供了一种核黄素在制备治疗肿瘤的系统上的应用，所述的系统包括血液输入口、血液输出口、透光容器、核黄素添加装置和光源，所述的系统通过光化学法灭活血液或血液制品中循环肿瘤细胞和/或肿瘤干细胞。光化学法灭活血液或血液制品中循环肿瘤细胞和/或肿瘤干细胞包括：(1)将血液或血液制品从血液输入口输入至透光容器；(2)通过核黄素添加装置在血液或血液制品中添加核黄素；(3)通过光源光照透光容器灭活循环肿瘤细胞和/或肿瘤干细胞；(4)血液或血液制品从血液输出口输出。本专利技术所述的肿瘤可以为肺癌、肾癌、本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种核黄素在制备用于光化学法灭活血液或血液制品中循环肿瘤细胞和/或肿瘤干细胞的药剂中的应用，所述的核黄素在血液或血液制品中的浓度为1‑70μmol/L。

【技术特征摘要】
2016.09.29 CN 20161086018521.一种核黄素在制备用于光化学法灭活血液或血液制品中循环肿瘤细胞和/或肿瘤干细胞的药剂中的应用，所述的核黄素在血液或血液制品中的浓度为1-70μmol/L。2.权利要求1所述的应用，所述的核黄素在血液或血液制品中的浓度为40-60μmol/L。3.权利要求1所述的应用，所述的药剂为核黄素的溶液，所述的核黄素溶液浓度为100-20000μmol/L。4.权利要求1所述的应用，所述的光化学法的辐照剂量为0.003-15J/cm2。5.权利要求4所述的应用，所述的光化学法的辐照剂量为9-14J/cm2。6.一种核黄素在制备光化学法灭活血液或血液制品中循环肿瘤细胞和/或肿瘤干细胞的系统中的应用，所述的系统包括血液输入口、血液输出口、透光容器、核黄素添加装置和光源。7.一种光化学法灭活血液或血液制品中循环肿瘤细胞和/或肿瘤干细胞的系统，所述的系统包括血液输入口、血液输出口、透光容器、核黄素添加装置和光源。8.权利要求7所述的系统，所述的透光容器与血液输入口和血液输出口相连，所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：于洋，汪德清，杨璐，孙晓琳，
申请(专利权)人：中国人民解放军总医院，
类型：发明
国别省市：北京,11