一种减少和/或去除多肽固相合成中缺省肽的方法技术

本发明专利技术涉及多肽合成领域，特别涉及一种减少和/或去除多肽固相合成中缺省肽的方法。该方法采用包含缺省氨基酸和其之前氨基酸(C‑N)的全保护肽片段进行多肽的固相合成，同时解决了Fmoc脱除不完全和缩合反应不完全导致的氨基酸缺省，可以在合成阶段将缺省肽杂质降低到质控限度以下。具体表现为可将利拉鲁肽中Ala

A method for reducing and / or removing the default peptide in solid phase synthesis of peptides

The present invention relates to the field of peptide synthesis, in particular to a method for reducing and / or removing the default peptide in solid phase synthesis of peptides. This method contains amino acids and amino acids before the default (C N) fully protected peptide fragments of solid phase peptide synthesis, and to solve the default and incomplete removal of Fmoc amino acid condensation reaction incompleteness, can in the synthesis phase will be reduced to the quality control of default peptide impurity limits. The specific performance of the liraglutide in Ala

【技术实现步骤摘要】
一种减少和/或去除多肽固相合成中缺省肽的方法
本专利技术涉及多肽合成领域，特别涉及一种减少和/或去除多肽固相合成中缺省肽的方法。
技术介绍
固相多肽合成中，一些多肽由于有困难序列的存在，反应不完全，容易形成缺省肽(非目的肽)杂质。有一些缺省肽杂质的性质和产品本身十分接近，现有的分离技术对其几乎没有分离效果。Fmoc固相合成方法中，缺省肽的产生主要是因为肽链的聚集，临时保护基Fmoc脱除不完全或缩合反应不完全导致。对于Fmoc脱除不完全，一般采用2％的DBU可以达到完全脱除的效果，但伴随着副反应的发生。对于缩合反应不完全，采用假脯氨酸有较好的效果，但假脯氨酸价格昂贵，且需要有丝氨酸和苏氨酸时才可以使用，不具有通用性。另外，缺省肽杂质的产生一般是Fmoc脱除不完全和缩合反应不完全同时作用的结果，单种方法并不能完全解决氨基酸缺省的问题。GLP-1类化合物中存在两个二级结构区域，分子内的相互作用使得肽链发生聚集，反应在这两个区域很难进行，容易产生多种缺省肽杂质。作为GLP-1类似物的利拉鲁肽，在采用Fmoc固相方法进行制备时，产生的Ala2缺省杂质和Thr5缺省杂质在色谱上离主峰很近，现有的本文档来自技高网...

【技术保护点】
缺省氨基酸与紧邻所述缺省氨基酸并靠近C端的氨基酸组成的肽段在减少和/或去除多肽固相合成中缺省肽的用途。

【技术特征摘要】
1.缺省氨基酸与紧邻所述缺省氨基酸并靠近C端的氨基酸组成的肽段在减少和/或去除多肽固相合成中缺省肽的用途。2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述紧邻缺省氨基酸并靠近C端的氨基酸的数量至少为1个。3.根据权利要求1或2所述的用途，其特征在于，所述缺省肽占所述多肽的质量百分含量不高于0.15％。4.根据权利要求1至3任一项所述的用途，其特征在于，所述多肽为利拉鲁肽，所述缺省氨基酸为Ala2、Thr5；或所述多肽为奈西利肽，所述缺省氨基酸为Ser19。5.根据权利要求1至4任一项所述的用途，其特征在于，所述肽段为全保护肽段。6.一种减少和/或去除多肽固相合成中缺省肽的方法，其特征在于，采用包含缺省氨基酸与紧邻所述缺省氨基酸并靠近C端的氨基酸进行固相合成。7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述紧邻缺省氨基酸并靠近C端的氨基酸的数量至少为1个。8.根据权利要求6或7所述的方法，其特征在于，所述缺省肽占所述多肽的质量百分含量不高于0.15％。9.根据权利要求6至8任一项所述的方法，其特征在于，所述多肽为利拉鲁肽，所述缺省氨基酸为Ala2、Thr5；或所述多肽为奈西利肽，所述缺省氨基酸为Ser19；所述肽段为全保护肽段。10.一种减少和/或去除多肽固相合成中缺省肽的方法，其特征在于，所述多肽为利拉鲁肽，包括如下步骤：步骤1：将WangResin和Fmoc-Gly-OH反应制备Fmoc-Gly-WangResin；步骤2：按利拉鲁肽序列，依次连接Fmoc-Arg(pbf)-OH、Fmoc-Gly-OH、Fmoc-Arg(pbf)-OH、Fmoc-Val-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Trp(Boc)-OH、Fmoc-Ala-OH、Fmoc-Ile-OH、Fmoc-Phe-OH、Fmoc-Glu(OtBu)-OH、Fmoc-Lys(Alloc)-OH、Fmoc-Ala-OH、Fmoc-Ala-OH、Fmoc-Gln(trt)-OH、Fmoc-Gly-OH、Fmoc-Glu(OtBu)-O...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈友金，宓鹏程，陶安进，袁建成，
申请(专利权)人：深圳翰宇药业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44