蛋白质的纯化方法及含肽标签的融合蛋白质及其生产方法技术
Purification method of protein and fusion protein containing peptide label and production method thereof
The present invention relates to fusion protein purification method of protein and peptide containing label and its production method, protein purification method of fusion protein, in particular to process samples include fusion protein containing amino acid sequence modulation and target protein amino acid sequence contains a peptide tag containing 12 residues more than acidic amino acid residues of the process, and separation with the fusion protein contained in the sample together in mixed protein and the sample in the.
【技术实现步骤摘要】
蛋白质的纯化方法及含肽标签的融合蛋白质及其生产方法
本专利技术涉及蛋白质的纯化方法以及含肽标签的融合蛋白质及其生产方法。
技术介绍
由分子生物学的进展，向大肠杆菌、酵母、细胞等的宿主导入编码目的蛋白质的重组基因，发展出了大量表达的系统。在这样的系统中，在从宿主调制的试样中，由于与目的蛋白质一同含宿主来源的内源性蛋白质等的混杂蛋白质，有进一步纯化目的蛋白质的必要。作为纯化目的蛋白质的方法，例如，在StubenrauchK,etal,Purificationofaviralcoatproteinbyanengineeredpolyionicsequence.J.Chromatogr.B.Biomed.Sci.Appl：737:77-84,2000中，公开了向多瘤VP1蛋白导入谷氨酸8个和半胱氨酸，纯化VP1蛋白质的方法。
技术实现思路
【专利技术要解决的技术课题】本专利技术以提供可简便地得到高纯度的重组蛋白质的纯化方法作为课题。【解决课题的技术方案】本专利技术是蛋白质的纯化方法，其包括调制含有含肽标签的氨基酸序列和目标蛋白质的氨基酸序列的融合蛋白质的试样的工序...
【技术保护点】
蛋白质的纯化方法，其包括：调制含有含肽标签的氨基酸序列和目标蛋白质的氨基酸序列的融合蛋白质的试样的工序、及将与上述融合蛋白质一同含在上述试样中的混杂蛋白质和上述试样中的融合蛋白质分离的工序，上述肽标签含12个残基以上的酸性氨基酸残基。
【技术特征摘要】
2016.04.07 JP 2016-0771271.蛋白质的纯化方法，其包括：调制含有含肽标签的氨基酸序列和目标蛋白质的氨基酸序列的融合蛋白质的试样的工序、及将与上述融合蛋白质一同含在上述试样中的混杂蛋白质和上述试样中的融合蛋白质分离的工序，上述肽标签含12个残基以上的酸性氨基酸残基。2.权利要求1所述的方法，其中上述肽标签有SEQIDNO：1～8的任一个的氨基酸序列。3.权利要求1所述的方法，其中上述肽标签含18个残基以上的酸性氨基酸残基。4.权利要求1所述的方法，其中上述融合蛋白质的等电点不足6。5.权利要求1所述的方法，其中上述试样的盐浓度是50mM以上500mM以下。6.权利要求1所述的方法，其中在上述试样调制工序中，向宿主细胞导入含编码上述融合蛋白质的多核苷酸的载体，使蛋白质在宿主细胞表达而取得上述试样。7.权利要求1所述的方法，其中上述融合蛋白质在肽标签的氨基酸序列和上述目标蛋白质的氨基酸序列之间还含蛋白质分解酶识别的切断位点。8.权利要求1所述的方法，其中在上述分离工序中，使用离子交换树脂进行上述融合蛋白质和上述混杂蛋白质的分离。9.权利要求1所述的方法，其中上述离子交换树脂是阴离子交换树脂。10.权利要求1所述的方法，其中在上述分离工序中，通过使上述试样通过阴离子交换树脂而取得结合了上述融合蛋白质的阴离子交换树脂和含上述混杂蛋白质的通过级分，使用盐浓度600mM以上的缓冲液从上述...
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