正面影响天然或工程化的真核细胞的生理学的细菌伴侣蛋白的组合制造技术

本发明专利技术涉及在真核细胞中表达三种细菌伴侣蛋白的特定组合，所述表达显著改进了所述真核细胞的生长特性和其与对物理化学应激的抗性有关的特性，尤其在所述细胞包含使用至少一种非天然基因进行的另一种工程化时。伴侣蛋白的优选组合包含大肠杆菌(E.coli)的伴侣蛋白GroES和GroEL以及细长聚球藻(Synechococcus elongatus)的伴侣蛋白RbcX。

A combination of bacterial chaperone proteins that positively affect the physiology of natural or engineered eukaryotes

The invention relates to a specific combination of expression of three bacterial chaperone protein in eukaryotic cells, the expression significantly improved the growth characteristics of the eukaryotic cell and its characteristics associated with resistance to physical and chemical stress, especially in the cell contains at least one non natural base for another project when the. The optimum combination of chaperone protein containing Escherichia coli (E.coli) of the chaperone protein GroES and GroEL and Synechococcus elongatus (Synechococcus elongatus) partner protein RbcX.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】正面影响天然或工程化的真核细胞的生理学的细菌伴侣蛋白的组合本专利技术涉及细胞工程学领域，特别是真核细胞领域。更具体地，本专利技术涉及具有改进的生长和/或代谢特性的真核细胞，并且涉及其用于制备所关注的化合物的用途。本专利技术特别涉及表达伴侣蛋白的特定组合的真核细胞。本专利技术尤其适用于制备重组蛋白的领域。
技术介绍
目前存在多种用于所关注蛋白的表达系统，其用于各种领域中：生物技术、食品加工、医学行业或诊断研究(基础理论研究和/或应用研究)。在这些表达系统中，真核细胞、特别是酵母起重要作用，尤其因为其糖基化能力和其在工业条件下易于培养。但这些细胞具有局限性，尤其因为与例如所关注产物(例如高浓度的乙醇或另一种醇)的积聚有关的毒性限制，或因为所表达的蛋白的直接或间接毒性，或因为需要存在表达质粒的能量负载。
技术实现思路
本专利技术提供具有改进的性能的真核细胞，从而能够开发优化的表达系统。在针对在酵母中引入合成的卡尔文循环(Calvincycle)的项目的上下文中，专利技术者惊讶地观察到，在酵母中共表达三种细菌伴侣蛋白(RbcX、GroES和GroEL)的组赋予真核细胞显著的代谢特性，尤其在异源或内源蛋本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种转化的真核细胞，其特征在于所述真核细胞含有：(i)含有在适合启动子的转录控制下编码伴侣蛋白RbcX的序列的表达盒，所述伴侣蛋白RbcX参与细菌I型RuBisCO酶的折叠；(ii)含有在适合启动子的转录控制下编码细菌通用伴侣蛋白GroES的序列的表达盒；以及(iii)含有在适合启动子的转录控制下编码细菌通用伴侣蛋白GroEL的序列的表达盒。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.01.16 EP 15305048.9;2015.01.16 EP 15305049.71.一种转化的真核细胞，其特征在于所述真核细胞含有：(i)含有在适合启动子的转录控制下编码伴侣蛋白RbcX的序列的表达盒，所述伴侣蛋白RbcX参与细菌I型RuBisCO酶的折叠；(ii)含有在适合启动子的转录控制下编码细菌通用伴侣蛋白GroES的序列的表达盒；以及(iii)含有在适合启动子的转录控制下编码细菌通用伴侣蛋白GroEL的序列的表达盒。2.根据权利要求1所述的真核细胞，其特征在于所述伴侣蛋白RbcX是蓝细菌伴侣蛋白。3.根据权利要求1或权利要求2所述的真核细胞，其特征在于通用伴侣蛋白GroES和GroEL中的至少一种既不来自蓝细菌又不来自表达RuBisCO复合物的另一种细菌。4.根据权利要求1至3中任一项所述的真核细胞，其特征在于这三个表达盒形成连续的遗传信息块。5.根据权利要求1至4中任一项所述的真核细胞，其特征在于这三种伴侣蛋白的表达盒是由单个附加体遗传元件携带的。6.根据权利要求1至5中任一项所述的真核细胞，其特征在于所述真核细胞还包含至少一个除所述伴侣蛋白以外的异源蛋白的表达盒，或者其特征在于所述真核细胞已进行序列工程化来改变内源蛋白的表达水平和/或序列。7.根据权利要求1至6中任一项所述的真核细胞，其特征在于所述真核细胞不含编码细菌I型RuBisCO酶的RbcL或RbcS亚基的序列。8.根据权利要求1至7中任一项所述的细胞，其特征在于所述细胞为酵母，优选选自酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)、解脂...

【专利技术属性】
技术研发人员：丹尼斯·蓬波，斯特凡·吉尤埃，吉利安·马克，娜莎莉·戈雷塔，卡里纳·比多，克里斯特尔·布托内，弗洛伦斯·博诺特，
申请(专利权)人：法国农业科学研究院，图卢兹国家应用科学研究院，法国国家科学研究中心，
类型：发明
国别省市：法国,FR