HPV颗粒及其用途制造技术

本发明专利技术涉及HPV颗粒及其用途。本发明专利技术涉及可在治疗上应用的修饰的HPV颗粒。修饰的HPV颗粒可用于递送包括siRNA分子在内的治疗剂。修饰的HPV颗粒可用于粘膜组织的疾病或病症的治疗，所述疾病或病症包括HPV(人乳头瘤病毒)感染和HPV相关肿瘤。

HPV particles and their uses

The present invention relates to HPV particles and their uses. The present invention relates to modified HPV particles that can be used in therapy. Modified HPV particles can be used to deliver therapeutic agents, including siRNA molecules. The modified HPV particles can be used for the treatment of diseases or diseases of mucosal tissues. The diseases or diseases include HPV (human papilloma virus) infection and HPV related tumors.

【技术实现步骤摘要】
HPV颗粒及其用途本申请是申请号为200980159856.0的中国专利申请的分案申请，原申请是2009年7月24日提交的PCT国际申请PCT/US2009/004299于2011年12月13日进入中国国家阶段的申请。相关申请根据35U.S.C.§119(e)，本申请要求2009年4月13日提交的美国临时专利申请USSN61/168,914的优先权，其通过引用全文并入本文。
本专利技术涉及人乳头瘤病毒样颗粒(viruslikeparticle，VLP)及其作为治疗剂的用途。
技术介绍
在世界范围内，宫颈癌是女性主要癌症死亡原因之一，每年夺去超过233,000名女性的生命。20世纪以前，在女性中的发生率和死亡率上，宫颈癌都是最常见的恶性疾病。在发达国家中，宫颈癌发生率的降低是重大公共健康成就之一，主要归因于实施基于人群的筛查(population-basedscreening)以及侵入前疾病(pre-invasivedisease)的检测和治疗计划。然而，虽然在发达国家中宫颈癌的发生率已降低，但在世界范围内该疾病仍然是女性中第二常见的癌。巴氏(Papanicolaou，Pap)涂片可检测宫颈中的宫颈癌或癌前病变(pre-cancerouschange)，其中很多与HPV相关。在实施广泛筛查措施的发达国家中，这些Pap涂片极大地降低了宫颈癌的发生率和死亡率。在筛查措施仍然十分有限的发展中国家中，宫颈癌是女性中最常报道的癌，并且其发生率持续升高。宫颈上皮内异常(cervicalintraepithelialabnormalities)的所有现有治疗(包括冷冻疗法(cryotherapy)、激光消融(laserablation)、子宫颈锥切除(excisionalconization)和环形电切术(loopelectrosurgicalexcisionprocedure，LEEP))都是侵入性的手术过程，常导致明显的副反应，包括分泌物过多、感染、出血、痉挛、子宫颈机能不全(cervicalincompetence)，可导致流产、宫颈完整性丧失和无法怀孕。此外，这些过程必须在门诊场所中进行，这增加了治疗的成本。子宫颈上皮内瘤形成(CIN，cervicalintraepithelialneoplasia)是指宫颈癌的侵入前病理中间阶段。在子宫颈的细胞涂片或组织活检中观察到的异常表现代表了子宫颈内皮细胞分化程度的改变。这种细胞发育异常分为三个不同严重程度的组：CINI是指局限于内皮的基部1/3的轻微发育异常；CINII是指局限于内皮的基部2/3的病变；CINIII是指涵盖大于内皮厚度2/3的细胞发育异常。在美国，每年约350万女性会有异常的Pap涂片试验。这些女性中约120万患有鳞状上皮内病变(squamousintraepitheliallesion，SIL)，其中的200,000至300,000人属于晚期。在拉丁美洲，严重CIN的发生率超过美国发生率的3倍。表1提供了世界范围内HPV感染和CIN流行程度的总结。表1：世界范围内HPV和CIN的发病率HPV感染在性活跃的个体中流行。具有多个性伴侣的女性获得HPV的机会并因而获得HPV相关子宫颈感染的机会更高。高风险HPV类型的感染增加了女性罹患宫颈癌的可能性。在HPV感染的女性中筛查和随后治疗癌前宫颈病症对宫颈癌的预防高度有效。然而，当前的治疗常需手术介入并且需要替代性的治疗选择。
技术实现思路
本专利技术的一些方面涉及基于HPV的颗粒及其用于治疗疾病和/或递送治疗剂的用途。在一些实施方案中，本专利技术的组合物和方法可用于治疗粘膜疾病(例如，粘膜组织(例如粘膜内皮细胞)的疾病和/或感染)。在一些实施方案中，本专利技术的一些方面涉及经修饰的基于HPV的颗粒，所述颗粒能将治疗剂递送到粘膜组织(例如，表面施用)。在一些实施方案中，所述治疗剂可为抗病毒剂。所述抗病毒剂可用于治疗病毒感染，例如，人乳头瘤病毒、疱疹病毒或靶向粘膜组织的其他病毒。在一些实施方案中，所述治疗剂可为抗癌剂。所述抗癌剂可用于治疗例如宫颈癌或任何其他粘膜组织的癌症。在一些实施方案中，本专利技术提供了用于治疗人乳头瘤病毒(humanpapillomavirus，HPV)感染的方法和用于治疗对象中的HPV相关疾病(包括但不限于宫颈癌)的方法。然而，应当理解，本专利技术的经修饰病毒颗粒可用于递送其他类型的治疗剂和/或医疗剂(例如，成像剂或造影剂)。在一些实施方案中，本专利技术的颗粒可局部递送(例如，以乳膏、泡沫、喷雾剂、气雾剂或其他适于表面递送(topicaldelivery)的形式)至任何粘膜组织(例如，子宫颈、鼻、口腔或其他粘膜组织)。然而，本专利技术的一些方面不限于表面递送，经修饰颗粒可皮下、静脉内、胃肠外和/或通过任何其他适合的递送途径递送。本文中提供的方法包括将通过基于病毒样颗粒(VLP)递送系统递送的一种或多种治疗剂施用于对象。在某些实施方案中，所述基于VLP的递送系统包含人乳头瘤病毒样纳米颗粒。在一些实施方案中，HPV纳米颗粒包含病毒L1蛋白。在一些实施方案中，HPV纳米颗粒包含病毒L1蛋白和病毒L2蛋白。在一些实施方案中，所述L1和/或L2蛋白可为野生型病毒蛋白。在一些实施方案中，L1和/或L2蛋白可通过突变和/或插入/缺失而改变。在某些实施方案中，包含L1和/或L2的HPV纳米颗粒的暴露于表面的环中的氨基酸发生突变、缺失和/或插入。在某些实施方案中，暴露于表面的环中的氨基酸的突变、缺失和/或插入导致HPV纳米颗粒的免疫原性的改变。在某些实施方案中，免疫原性可以这样的方式改变，使得某些血清型的HPV纳米颗粒不再被对抗这种血清型的抗体所识别。在这些实施方案中，所述改变的HPV纳米颗粒在具有所述血清型特异性抗体的宿主中是免疫沉默的。因此，在一些实施方案中，可将本专利技术的基于HPV的颗粒进行修饰以使其具有降低或改变的免疫原性。可选择这样的颗粒递送给具有中和性抗HPV应答的患者。在一些实施方案中，出于治疗目的将一系列具有不同血清型的基于HPV的颗粒施用给对象，以降低中和性免疫应答对任一种所述血清型的作用。例如，可将第一血清型用于第一对象施用组(例如1、2、3、4、5、5-10或更多)。随后，可将第二血清型用于第二施用组(例如1、2、3、4、5、5-10或更多)以降低对象针对所述第一血清型产生的中和免疫应答的影响。应当理解的是，其他施用组可涉及第三、第四、第五等血清型。不同的血清型可为天然血清型、嵌合血清型、其他突变血清型，或其任何组合。应当理解的是，可将该系列或顺序施用用于特定化合物(例如每一种不同血清型中的同一个)或一系列不同的化合物在数月和/或数年时间段内的长期施用(例如，治疗)。在一些实施方案中，可以如下的方式向病毒衣壳蛋白L1和/或L2中引入氨基酸的突变、缺失和/或插入，使得所得的HPV纳米颗粒不失去向所述靶细胞递送治疗剂的能力。在一些实施方案中，所述HPV纳米颗粒未失去将核酸(例如，siRNA或shRNA)转移进靶细胞的能力。在一些实施方案中，可改变免疫原性以使某些血清型的HPV纳米颗粒诱导产生交叉特异性中和性抗体的免疫应答。在这些实施方案中，这样改变所述HPV纳米颗粒，以使得其在其表面上表现出多个血清特异性表位(本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种递送一种或多种异源化合物至对象的方法，所述方法包括给对象施用包含一种或多种异源化合物和经修饰人乳头瘤病毒(HPV)L1蛋白的纳米颗粒，所述HPV L1蛋白具有相对于野生型HPV16降低的免疫原性，其中所述经修饰HPV L1蛋白的氨基酸序列对应于包含氨基酸替换D273T、N285T和S288N的SEQ ID NO：1的氨基酸序列。

【技术特征摘要】
2009.04.13 US 61/168,9141.一种递送一种或多种异源化合物至对象的方法，所述方法包括给对象施用包含一种或多种异源化合物和经修饰人乳头瘤病毒(HPV)L1蛋白的纳米颗粒，所述HPVL1蛋白具有相对于野生型HPV16降低的免疫原性，其中所述经修饰HPVL1蛋白的氨基酸序列对应于包含氨基酸替换D273T、N285T和S288N的SEQIDNO：1的氨基酸序列。2.一种向对象施用一种或多种异源化合物的方法，所述方法包括：在第一时间段中向对象施用包含一种或多种异源化合物的第一纳米颗粒，和在第二时间段中向对象施用包含所述一种或多种异源化合物的第二纳米颗粒，其中所述第一和第二纳米颗粒具有不同的血清型，其中所述第一纳米颗粒和/或所述第二纳米颗粒包含经修饰人乳头瘤病毒(HPV)L1蛋白，所述HPVL1蛋白具有相对于野生型HPV16降低的免疫原性，其中所述经修饰HPVL1蛋白的氨基酸序列对应于包含氨基酸替换D273T、N285T和S288N的SEQIDNO：1的氨基酸序列。3.一种用于将一种或多种异源化合物递送给对象的组合物，所述组合物包含纳米颗粒，所述纳米颗粒包含一种或多种异源化合物和经修饰人乳头瘤病毒(HPV)L1蛋白，所述HPVL1蛋白具有相对于野生型HPV16降低的免疫原性，其中经修饰HPVL1蛋白的氨基酸序列对应于包含氨基酸替换D273T、...

【专利技术属性】
技术研发人员：皮埃尔·L·库尔萨热，安托万·A·图泽，马克西姆·J·J·弗勒里，尼古拉斯·孔伯拉，伊丽莎白·德洛斯皮诺斯，
申请(专利权)人：法国健康和医学研究院，奥拉生物科学公司，
类型：发明
国别省市：法国,FR