新的植酸酶、获得所述植酸酶的方法及其应用技术

本发明专利技术总体上涉及编码具有植酸酶的酶活性的多肽或蛋白的新的和改进的核酸序列和在宿主细胞中有效地表达这样的酶的方法。在第一个方面，本发明专利技术涉及一种分离的核酸分子，所述核酸分子i)包含编码具有植酸酶活性的蛋白的根据SEQ ID NO:1的核苷酸序列或ii)具有与编码具有植酸酶活性的蛋白的根据SEQ ID NO:1的核苷酸序列至少83%的序列同一性。本发明专利技术还涉及包含上述分离的核酸分子的表达构建体或载体。本发明专利技术还涉及一种生产具有植酸酶的酶活性的蛋白的方法，其包括以下步骤：a)将载体引入宿主细胞，所述载体包含：i)在宿主细胞中有功能的调节表达的元件；和ii)可操作地与其连接的根据本发明专利技术的核酸分子；b)在适合于表达蛋白的条件下培养在步骤a)中获得的宿主细胞，和任选地c)从细胞培养物回收在步骤b)中产生的蛋白。本发明专利技术还涉及通过根据本发明专利技术的方法获得的蛋白及其制备用于动物饲料的添加剂的用途。

New phytase, method for obtaining said phytase and uses thereof

The present invention generally relates to novel and improved nucleic acid sequences encoding polypeptides or proteins having an enzymatic activity of phytase, and methods for efficiently expressing such enzymes in host cells. In the first aspect, the invention relates to a nucleic acid molecule separation, the nucleic acid molecules containing I) encoding protein having phytase activity according to the SEQ ID NO:1 nucleotide sequence or II) with phytase activity and the protein encoding sequence according to the nucleotide sequence of SEQ ID NO:1 at least 83% the same sex. The present invention also relates to an expression construct or carrier comprising the aforementioned nucleic acid molecules. The invention also relates to a method for producing phytase enzyme activity with the protein, which comprises the following steps: a) the carrier into host cells comprising the vectors: I) in the host cell has the function of regulating the expression of the elements; and II) operably connected thereto according to the nucleic acid molecules of the invention; b) suitable for protein expression under the condition of cultivation in step a) in the host cell, and optionally C) from cells recovered in step b) generated in the protein. The invention also relates to proteins obtained by the method according to the invention and to the use thereof in the preparation of additives for animal feed.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】新的植酸酶、获得所述植酸酶的方法及其应用专利
本专利技术总体上涉及编码具有植酸酶的酶活性的多肽或蛋白的新的和改进的核酸序列和在宿主细胞中有效地表达这样的酶的方法。在第一个方面，本专利技术涉及一种分离的核酸分子，其i)包含编码具有植酸酶活性的蛋白的根据SEQIDNO:1的核苷酸序列或ii)具有与编码具有植酸酶活性的蛋白的根据SEQIDNO:1的核苷酸序列至少78%的序列同一性。本专利技术也涉及包含上述分离的核酸分子的表达构建体或载体。本专利技术还涉及一种生产具有植酸酶的酶活性的蛋白的方法，其包括以下步骤：a)将载体引入宿主细胞，所述载体包含：i)在宿主细胞中有功能的调节表达的元件；和ii)可操作地与其连接的如本文定义的核酸分子；b)在适合于表达蛋白的条件下，培养在步骤a)中获得的宿主细胞，和任选地c)从细胞培养物回收在步骤b)中产生的蛋白。本专利技术还涉及通过根据本专利技术的方法获得的蛋白及其在制备用于动物饲料的添加剂中的用途。专利技术背景本专利技术总体上涉及编码具有植酸酶的酶活性的多肽或蛋白的新的核酸分子，并且涉及在宿主细胞中有效地生产这样一种具有植酸酶活性的蛋白的方法。本专利技本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种分离的核酸分子i) 包含编码具有植酸酶活性的蛋白的根据SEQ ID NO: 1的核苷酸序列或ii) 具有与编码具有植酸酶活性的蛋白的根据SEQ ID NO: 1的核苷酸序列至少83 %的序列同一性。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2014.11.06 EP 14192111.41.一种分离的核酸分子i)包含编码具有植酸酶活性的蛋白的根据SEQIDNO:1的核苷酸序列或ii)具有与编码具有植酸酶活性的蛋白的根据SEQIDNO:1的核苷酸序列至少83%的序列同一性。2.根据权利要求1的分离的核酸分子，其中所述核酸分子不包含编码N-末端信号肽的核苷酸序列。3.根据权利要求1或2的分离的核酸分子，其还包含关于宿主细胞生物体的密码子-优化突变。4.根据权利要求3的分离的核酸分子，其中宿主细胞生物体是巴斯德毕赤酵母(PichiasPastoris)。5.根据权利要求3或4的任一项的分离的核酸分子，其中所述核酸分子与对应的野生型核苷酸编码序列的不同之处为存在至少50个密码子优化突变。6.根据权利要求3-5的任一项的分离的核酸分子，其中对应的野生型核酸序列的至少50%的密码子被修饰为最有利于宿主细胞生物体的密码子。7.根据权利要求3-6的任一项的分离的核酸分子，其中分离的核酸分子中的所有密码子被修饰为最有利于宿主细胞生物体的密码子。8.根据任一项前述权利要求的分离的核酸分子，其编码具有植酸酶活性的蛋白的根据SEQIDNO:3的氨基酸序列。9.一种表达构建体，其包含权利要求1-8的任一项的核酸序列，所述核酸序列可操作地连接于调节所述核酸序列的表达的元件。10.根据权利要求9的表达构建体，其中调节表达的元件包含在宿主细胞中有功能的启动子和任选的终止序列。11.根据权利要求9或...

【专利技术属性】
技术研发人员：S阿塔雷斯雷亚尔，J马丁佩雷斯，J罗梅罗洛佩斯，I萨莱特马多兰，R马克斯马斯卡雷尔，R阿利格，
申请(专利权)人：费提纳格罗营养素有限公司，
类型：发明
国别省市：西班牙,ES