The disclosure of the new plant acyl ACP thioesterase gene FatB and FatA type and by these genes encoding proteins. These genes can be used to construct recombinant host cells with altered fatty acid profiles. The expression of novel and / or mutated FATB and FATA genes in host cells of oil producing microalgae was demonstrated. In addition, a method for generating oil increased one or more in C12:0, C14:0, C16:0, C18:0 and / or C18:1 fatty acids in included in the model and / or mutation of FATB and / or FATA gene into cells such as N end deletion. These cells produce triglycerides with altered and useful fatty acid profiles.
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】酰基-ACP硫酯酶及其突变体相关申请的交叉引用本申请依据35U.S.C.§119(e)要求2014年9月18日提交的美国临时申请号62/052,440和2014年11月4日提交的美国临时申请号62/075,168的权益，将二者特此以其全文结合在此。背景某些有机体(包括植物和一些微藻)使用II型脂肪酸生物合成途径，该途径特征在于使用离散的单功能酶用于脂肪酸合成。相比之下，哺乳动物和真菌使用一种单一的大的多功能蛋白。II型脂肪酸生物合成典型地涉及将生长的酰基-ACP(酰基-载体蛋白)链延长两个碳单位，随后由酰基-ACP硫酯酶裂解。在植物中，已经鉴定了两种主要类别的酰基-ACP硫酯酶：(i)由FatA类别的基因编码的那些酰基-ACP硫酯酶，它们倾向于将油酰基-ACP水解为油酸(一种18:1脂肪酸)和ACP，以及(ii)由FatB类别的基因编码的那些酰基-ACP硫酯酶，它们从对应的酰基-ACP分子中释放C8-C16脂肪酸。来自不同植物的不同FatB基因对不同酰基链长具有特异性。其结果是，不同基因产物将在植物种子中产生不同的脂肪酸谱。参见美国专利号5,850,022；5,72...
【技术保护点】
一种包含编码异源调节元件和FatB酰基‑ACP硫酯酶基因的多核苷酸序列的cDNA或核酸构建体，其可操作以在由表达该核酸构建体的细胞产生的油中产生改变的脂肪酸谱，其中该FatB基因表达蛋白质，该蛋白质具有与SEQ ID NO:1‑18或61中的任一项具有至少65％、70％、80％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％一致性的氨基酸序列或编码融合在SEQ ID NO:10‑18或61上游的质体靶向肽的氨基酸序列。
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2014.09.18 US 62/052,440;2014.11.04 US 62/075,1681.一种包含编码异源调节元件和FatB酰基-ACP硫酯酶基因的多核苷酸序列的cDNA或核酸构建体，其可操作以在由表达该核酸构建体的细胞产生的油中产生改变的脂肪酸谱，其中该FatB基因表达蛋白质，该蛋白质具有与SEQIDNO:1-18或61中的任一项具有至少65％、70％、80％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％一致性的氨基酸序列或编码融合在SEQIDNO:10-18或61上游的质体靶向肽的氨基酸序列。2.如权利要求1所述的核酸构建体，其中该酰基-ACP硫酯酶编码序列包含与SEQIDNO:19-36、57-60中任一项或因遗传密码的简并性而致的任何等效序列至少65％、70％、80％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％的一致性。3.如权利要求1或2所述的核酸构建体，其中该蛋白质在对应于SEQIDNO:61(D124A)的位置126和SEQIDNO:61(D209A)的位置211的一个或两个位置处具有丙氨酸(A)。4.如权利要求1或2所述的核酸构建体，具有与SEQIDNO:40具有至少65％、70％、80％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％一致性的质体靶向肽。5.如权利要求1或2所述的核酸构建体，其中该FatB基因表达具有氨基酸序列的活性酰基-ACP-硫酯酶蛋白，该氨基酸序列具有：(a)与SEQIDNO:5大于94.5％、94.6％、94.7％、94.8％、94.9％、95％或95.1％的一致性；(b)与SEQIDNO:14大于95.7％、95.8％、95.9％、96％、96.1％或96.2％的一致性；(c)与SEQIDNO:3大于95.4％、95.6％、95.7％、95.8％、95.9％、96％或96.1％的一致性；(d)与SEQIDNO:12大于94.5％、94.6％、94.7％、94.8％、94.9％、95％或95.1％的一致性；(e)与SEQIDNO:1大于94.8％、94.9％、95％、95.1％、95.2％、95.3％或95.4％的一致性；(f)与SEQIDNO:10大于95.5％、95.6％、95.7％或95.8％、95.9％或96％的一致性；(g)与SEQIDNO:6大于94.5％、94.6％、94.7％、94.8％、94.9％、95％或95.1％的一致性；(h)与SEQIDNO:15大于95.7％、95.8％、95.9％、96％、96.1％或96.2％的一致性；(i)与SEQIDNO:4大于94.5％、94.6％、94.7％、94.8％、94.9％、95％或95.1％的一致性；(j)与SEQIDNO:13大于95.7％、95.8％、95.9％、96％、96.1％或96.2％的一致性；(k)与SEQIDNO:2大于94.3％、94.4％、94.5％、94.6％、94.7％、94.8％或94.9％的一致性；(l)与SEQIDNO:11大于94.9％、95％、95.1％、95.2％、95.3％、95.4％或95.5％的一致性；(m)与SEQIDNO:7大于93.5％、93.6％、93.7％、93.8％、93.9％、94.0％或94.1％的一致性；(n)与SEQIDNO:16大于92.8％、92.9％、93.0％、93.1％、93.2％、93.3％或93.4％的一致性；(o)与SEQIDNO:8大于86.5％、86.6％、86.7％、86.8％、86.9％、87％或87.1％的一致性；(p)与SEQIDNO:17大于85.1％、85.2％、85.3％、85.4％、85.5％、85.6％或85.7％的一致性；(q)与SEQIDNO:9大于88％、88.1％、88.2％、88.3％、88.4％、88.5％或88.6％的一致性；或(r)与SEQIDNO:18大于87.6％、87.7％、87.8％、87.9％、88％、88.1％或88.2％的一致性。6.一种宿主细胞，该宿主细胞能够表达如权利要求1-5中任一项所述的核酸构建体，以产生相对于没有该构建体的对照细胞具有改变的组成的甘油三酯油，该油任选地具有增加的C8-C12脂肪酸。7.一种宿主细胞，该宿主细胞能够表达如权利要求1-5中任一项所述的核酸构建体，以产生相对于没有该构建体的对照细胞具有改变的组成的甘油三酯油，该油任选地具有增加的C18脂肪酸。8.如权利要求6或7所述的宿主细胞，其中该宿主细胞选自植物细胞、微生物细胞和微藻细胞。9.一种产生重组细胞的方法，该重组细胞产生改变的脂肪酸谱，该方法包括用根据权利要求1-5中任一项所述的核酸转化该细胞。10.一种通过如权利要求9所述的方法产生的宿主细胞。11.如权利要求10所述的宿主细胞，其中该宿主细胞是选自植物细胞、微生物细胞和微藻细胞。12.一种用于产生油或油衍生产品的方法，该方法包括培养如权利要求6-8和10-11中任一项所述的宿主细胞，并提取由此产生的油，任选地其中该培养是通过在糖上进行的异养生长。13.如权利要求12所述的方法，进一步包括从该油产生脂肪酸、燃料、化学品、食品或其他油衍生产品。14.如权利要求12或13所述的方法，其中该宿主细胞表达编码在对应于SEQIDNO:61(D124A)的位置126和SEQIDNO:61(D209A)的位置211的一个或两个位置处具有丙氨酸(A)的蛋白质的核酸，并且与表达野生型蛋白质的宿主细胞相比，产生至少2倍量的C18:0和/或C18:1脂肪酸。15.一种通过如权利要求12所述的方法产生的油，任选地具有包括至...
【专利技术属性】
技术研发人员：J·加索拉里，X·赵，G·N·鲁丹科，S·富兰克林，
申请(专利权)人：泰拉瑞亚控股公司，
类型：发明
国别省市：美国,US
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