草莓组织培养方法技术

本发明专利技术涉及草莓组织培养方法，包括如下步骤：取草莓外植体，依次用酒精、新洁尔灭、氯化汞和过氧乙酸消毒；采用第一培养基对草莓外植体进行不定芽诱导培养；采用第二培养基对草莓外植体进行继代增殖培养，得到生根的植株；对生根的植株炼苗驯化，然后用多菌灵可湿性粉剂浸泡，再移入第三培养基中培养，得到草莓植株。本发明专利技术的草莓组织培养方法，其对外植体处理的成活率高达75％，比常规消毒处理剂型提高40个百分点，其结果率高达95％以上，且根系发达，苗挺叶绿，移栽苗素质好。本发明专利技术的草莓组织培养方法得到的草莓植株健壮、抗病性强、产量高，得到的草莓香甜浓郁，口感好，酸甜适中，品质极佳，耐储运，具有极高的推广价值。

Strawberry Tissue culture method

The present invention relates to a method for cultivation of strawberry tissue, which comprises the following steps: Strawberry explants, followed by ethanol, benzalkonium bromide, mercuric chloride and peracetic acid disinfection; the first medium for adventitious bud induction culture of strawberry explants; the second culture medium on Strawberry explants were subculture, rooting from plants the domestication of plants; rooting of seedling, WP soaked and carbendazim, and then into the third medium, get strawberry plants. The strawberry tissue culture method of the invention, the explants with high survival rate reached 75%, 40 percentage points higher than the conventional disinfection dosage form, the result was as high as 95%, and developed root, seedling's leaf green, transplanting seedling quality was good. The invention has the strawberry tissue culture method of strawberry plants, strong disease resistance, high yield, the sweet strawberry flavor, good taste, sweet and sour moderate, excellent quality, easy transportation, has extremely high application value.

【技术实现步骤摘要】
草莓组织培养方法
本专利技术涉及一种草莓组织培养方法。
技术介绍
草莓又叫洋莓、地莓等，属蔷薇科、草莓属、多年生草本植物。草莓果鲜美红嫩，果肉多汁，含有特殊的浓郁水果芳香，富含维生素C、维生素A、胡萝卜素等，有较高的营养价值和药用价值。但是，草莓病毒病严重影响草莓的产量，一般导致减产30％-50％，目前侵染草莓的病毒病，主要有四种，即草莓斑驳病毒(strawberrymottlevirus)、草莓皱缩病毒(strawberrycrinklevirus)、草莓轻和黄边病毒(strawberrymild-yellowedgevirus)、草莓镶脉病毒(strawberryvein-bandvirus)。应用组织培养和病毒检测技术是防治病毒病的有效途径，也是加快草莓新良种繁育推广速度和脱毒健康种苗生产的主要技术手段。但是，目前尚未建立一套完整的脱毒草莓苗匍匐茎繁殖技术规程及生产技术规程。
技术实现思路
本专利技术的一个目的在于提出一种草莓组织培养方法。本专利技术的草莓组织培养方法，包括如下步骤：S101：取草莓外植体，在45℃～55℃温度下热处理3min～8min，然后依次用质量浓度为70％～80％的酒精消毒25s～35s、用质量浓度为0.1％～1％的新洁尔灭消毒10min～30min、用质量浓度为0.01％～1％氯化汞和质量浓度为0.1％～1％的过氧乙酸消毒2min～10min；S102：采用第一培养基对所述步骤S101处理过的草莓外植体在15℃～30℃温度下进行不定芽诱导培养28天～32天；S103：采用第二培养基对所述步骤S102处理过的草莓外植体在20℃～30℃温度下进行继代增殖培养28天～32天，得到生根的植株；S104：对所述生根的植株炼苗驯化1天～3天，然后用质量浓度为40％～60％的多菌灵可湿性粉剂浸泡25min～35min，再移入第三培养基中，在20℃～30℃温度下培养50天～60天，得到草莓植株。本专利技术的草莓组织培养方法，其对外植体处理的成活率高达75％，比常规消毒处理剂型提高40个百分点，其结果率高达95％以上，且根系发达，苗挺叶绿，移栽苗素质好。本专利技术的草莓组织培养方法得到的草莓植株健壮、抗病性强、产量高，得到的草莓香甜浓郁，口感好，酸甜适中，品质极佳，耐储运，具有极高的推广价值。另外，根据本专利技术上述实施例的草莓组织培养方法，还可以具有如下附加的技术特征：进一步地，所述第一培养基包括MS培养基50重量份～60重量份、质量浓度为1.0mg/L的6-苄氨基腺嘌呤1重量份～10重量份、质量浓度为0.1mg/L的萘乙酸0.1重量份～1重量份、白糖1重量份～10重量份和质量浓度为3.8g/L的琼脂1重量份～10重量份。进一步地，所述第二培养基包括MS培养基50重量份～60重量份、质量浓度为0.01mg/L的萘乙酸0.1重量份～1重量份、白糖1重量份～10重量份和质量浓度为3.8g/L的琼脂1重量份～10重量份。进一步地，所述第三培养基包括重量比为1:1的阔叶腐殖土和药渣，所述药渣包括：银杏叶30份～50份、黄芩1份～10份、女贞籽1份～10份、鱼腥草0.1份～1份、头花蓼0.1份～1份和黄精0.1份～1份。其中，所述药渣是经中药提取后剩下的废弃物，将其应用在组培苗移栽基质上真可谓变废为宝，既节能又环保。进一步地，在所述步骤S104中，在所述第三培养基中培养第14天～17天时叶面喷施质量浓度为0.01％～1％的磷酸二氢钾和质量浓度为0.01％～1％的尿素，此后，每周两次叶面喷施质量浓度为0.01％～1％的磷酸二氢钾和质量浓度为0.01％～1％的尿素。进一步地，在所述步骤S104中，在所述第三培养基中培养时，每隔10天～15天对所述生根的植株进行浇水，并在水中加入多菌灵；其中，所述水与所述多菌灵的重量比为1000：1。进一步地，在所述步骤S104中，在所述第三培养基中培养第7天～10天时喷施质量浓度为50％的MS培养基的营养液。进一步地，在所述步骤S101中，所述草莓外植体为草莓植株的匍匐茎。本专利技术的另一个目的在于提出所述的草莓组织培养方法得到的草莓植株。本专利技术的附加方面和优点将在下面的描述中部分给出，部分将从下面的描述中变得明显，或通过本专利技术的实践了解到。具体实施方式下面详细描述本专利技术的实施例，所述实施例是示例性的，旨在用于解释本专利技术，而不能理解为对本专利技术的限制。实施例1实施例1提出了一种草莓组织培养方法，包括如下步骤：(1)取草莓植株的匍匐茎，在45℃温度下热处理8min，然后依次用质量浓度为70％的酒精消毒35s、用质量浓度为0.1％的新洁尔灭消毒30min、用质量浓度为0.01％氯化汞和质量浓度为1％的过氧乙酸消毒2min。(2)采用第一培养基对所述步骤(1)处理过的草莓外植体在30℃温度下进行不定芽诱导培养28天；其中，所述第一培养基包括MS培养基60重量份、质量浓度为1.0mg/L的6-苄氨基腺嘌呤1重量份、质量浓度为0.1mg/L的萘乙酸1重量份、白糖1重量份和质量浓度为3.8g/L的琼脂10重量份。(3)采用第二培养基对所述步骤(2)处理过的草莓外植体在20℃温度下进行继代增殖培养32天，得到生根的植株；其中，所述第二培养基包括MS培养基50重量份、质量浓度为0.01mg/L的萘乙酸1重量份、白糖1重量份和质量浓度为3.8g/L的琼脂10重量份。(4)对所述生根的植株炼苗驯化1天，然后用质量浓度为60％的多菌灵可湿性粉剂浸泡25min，再移入第三培养基中，在30℃温度下培养50天，得到草莓植株。所述第三培养基包括重量比为1:1的阔叶腐殖土和药渣，所述药渣包括：银杏叶50份、黄芩1份、女贞籽10份、鱼腥草0.1份、头花蓼1份和黄精0.1份。其中，所述药渣是经中药提取后剩下的废弃物，将其应用在组培苗移栽基质上真可谓变废为宝，既节能又环保。在所述第三培养基中培养第10天时喷施质量浓度为50％的MS培养基的营养液。在所述第三培养基中培养第14天时叶面喷施质量浓度为1％的磷酸二氢钾和质量浓度为0.01％的尿素，此后，每周两次叶面喷施质量浓度为1％的磷酸二氢钾和质量浓度为0.01％的尿素。在所述第三培养基中培养时，每隔15天对所述生根的植株进行浇水，并在水中加入多菌灵；其中，所述水与所述多菌灵的重量比为1000：1。实施例2实施例2提出了一种草莓组织培养方法，包括如下步骤：(1)取草莓植株的匍匐茎，在55℃温度下热处理3min，然后依次用质量浓度为80％的酒精消毒25s、用质量浓度为1％的新洁尔灭消毒10min、用质量浓度为1％氯化汞和质量浓度为0.1％的过氧乙酸消毒10min。(2)采用第一培养基对所述步骤(1)处理过的草莓外植体在15℃温度下进行不定芽诱导培养32天；其中，所述第一培养基包括MS培养基50重量份、质量浓度为1.0mg/L的6-苄氨基腺嘌呤10重量份、质量浓度为0.1mg/L的萘乙酸0.1重量份、白糖10重量份和质量浓度为3.8g/L的琼脂1重量份。(3)采用第二培养基对所述步骤(2)处理过的草莓外植体在30℃温度下进行继代增殖培养28天，得到生根的植株；其中，所述第二培养基包括MS培养基60重量份、质量浓度为0.01mg/L的萘乙酸0.1重量份、白糖10重量份和质量浓度为3.本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种草莓组织培养方法，其特征在于，包括如下步骤：S101：取草莓外植体，在45℃～55℃温度下热处理3min～8min，然后依次用质量浓度为70％～80％的酒精消毒25s～35s、用质量浓度为0.1％～1％的新洁尔灭消毒10min～30min、用质量浓度为0.01％～1％氯化汞和质量浓度为0.1％～1％的过氧乙酸消毒2min～10min；S102：采用第一培养基对所述步骤S101处理过的草莓外植体在15℃～30℃温度下进行不定芽诱导培养28天～32天；S103：采用第二培养基对所述步骤S102处理过的草莓外植体在20℃～30℃温度下进行继代增殖培养28天～32天，得到生根的植株；S104：对所述生根的植株炼苗驯化1天～3天，然后用质量浓度为40％～60％的多菌灵可湿性粉剂浸泡25min～35min，再移入第三培养基中，在20℃～30℃温度下培养50天～60天，得到草莓植株。

【技术特征摘要】
1.一种草莓组织培养方法，其特征在于，包括如下步骤：S101：取草莓外植体，在45℃～55℃温度下热处理3min～8min，然后依次用质量浓度为70％～80％的酒精消毒25s～35s、用质量浓度为0.1％～1％的新洁尔灭消毒10min～30min、用质量浓度为0.01％～1％氯化汞和质量浓度为0.1％～1％的过氧乙酸消毒2min～10min；S102：采用第一培养基对所述步骤S101处理过的草莓外植体在15℃～30℃温度下进行不定芽诱导培养28天～32天；S103：采用第二培养基对所述步骤S102处理过的草莓外植体在20℃～30℃温度下进行继代增殖培养28天～32天，得到生根的植株；S104：对所述生根的植株炼苗驯化1天～3天，然后用质量浓度为40％～60％的多菌灵可湿性粉剂浸泡25min～35min，再移入第三培养基中，在20℃～30℃温度下培养50天～60天，得到草莓植株。2.根据权利要求1所述的草莓组织培养方法，其特征在于，所述第一培养基包括MS培养基50重量份～60重量份、质量浓度为1.0mg/L的6-苄氨基腺嘌呤1重量份～10重量份、质量浓度为0.1mg/L的萘乙酸0.1重量份～1重量份、白糖1重量份～10重量份和质量浓度为3.8g/L的琼脂1重量份～10重量份。3.根据权利要求1所述的草莓组织培养方法，其特征在于，所述第二培养基包括MS培养基50重量份～60重量份、质量浓度...

【专利技术属性】
技术研发人员：郑晓峰，黄刚，何宪江，付燕，万新屏，周黎，
申请(专利权)人：黔东南民族职业技术学院，
类型：发明
国别省市：贵州,52