一种利用蒜片加工废水制备蒜氨酸酶、大蒜辣素和大蒜多糖的方法技术

本发明专利技术公开了一种利用蒜片加工废水制备蒜氨酸酶、大蒜辣素和大蒜多糖的方法。包括如下步骤：(1)蒜片加工废水预冷后用截留分子量为10,000Da的超滤膜进行超滤浓缩，截留液合并即为蒜氨酸酶粗酶液；(2)超滤的滤过液经300Da的纳滤膜纳滤浓缩，纳滤浓缩液用CH2Cl2萃取多次，萃余液用于下一步大蒜多糖的制备，合并CH2Cl2萃取液，减压蒸馏除去CH2Cl2后，即得主要由大蒜辣素组成的油状液体；(3)收集步骤(2)的中得到的CH2Cl2萃余液，经减压浓缩后喷雾干燥，得大蒜多糖提取物。本发明专利技术利用蒜片加工废水进行了其中所含的各种生物活性成分的分别提取，获得了三种有价值的产品，实现了蒜片加工废水的资源化利用，解决了蒜片加工过程中的资源浪费与环境污染问题。

A method of using garlic processing wastewater and preparation of alliinase and Allicin and garlic polysaccharide

The invention discloses a method for using garlic processing wastewater for preparation of alliinase and Allicin and garlic polysaccharide. Includes the following steps: (1) garlic processing wastewater after pre cooling with MWCO 10000Da ultrafiltration membrane for ultrafiltration, retentate is combined with alliinase enzyme; (2) ultrafiltration filtrate by 300Da nanofiltration concentrate, nanofiltration concentrate with CH2Cl2 extraction of multiple times the raffinate for the next step of garlic polysaccharide preparation with CH2Cl2 extract, vacuum distillation to remove the CH2Cl2, which is mainly composed of allicin oil liquid composition; (3) collection step (2) CH2Cl2 raffinate obtained in concentrated by vacuum spray drying, too much garlic sugar extract. For many kinds of biological active ingredients contained in the extract by using the garlic processing wastewater, obtained three kinds of valuable products, realize the resource utilization of garlic processing wastewater, solves the waste of resources and environmental pollution problems in the process of garlic.

【技术实现步骤摘要】

本专利技术既属于污水处理、环境治理
，又属于中草药资源的加工利用
，涉及一种利用蒜片加工废水制备蒜氨酸酶、大蒜辣素和大蒜多糖的方法。
技术介绍
大蒜(AlliumSativamL,)又名胡蒜、葫，为百合科葱属植物。最早在古埃及、古罗马和古希腊等地中海沿岸国家栽培。公元前100多年，大蒜被引入我国，以后逐渐遍及全国。大蒜既是一种能够治病、防病的植物，也是一种调味佳品。为便于保藏、方便食用及长距离运输，每年都有高达数百万吨的鲜蒜被加工成蒜片、蒜粒和蒜粉等干制品，形成了一个初具规模的蒜片加工产业，同时，由于在将蒜瓣切成片的过程中，新形成的蒜片会因大量黏液分泌物的存在而粘附在切片机的刀片上无法及时脱落，因而在生产中需要用一定量的工艺用水对切片机的刀片进行连续的冲洗，才能保证切片机的正常运行；蒜片被冲洗后进入储液槽、罐或池中被浸泡，待废水中的蒜片积攒到一定量，由机械臂捞出蒜片，剩余的废水即为蒜片加工废水，构成了一个蒜片加工业所特有的废水污染源-大蒜废水。大蒜废水的处理，因其中含有大量目前已知为最强力的天然杀菌剂-大蒜辣素(Allicin)而成为一个水处理行业的著名难题，首先需要设法将其中所含的大蒜辣素降解，然后才能排入污水处理系统，而不至于破坏污水处理系统业已建立的厌氧、曝气等生态系统。迄今为止已经研发并投入使用的大蒜废水处理系统多以令大蒜辣素降解而不留任何不良气味为工作原理和目标。但从天然保健资源的开发利用的角度来看，却是十分不合理的。大蒜辣素(Allicin)学名为二烯丙基硫代亚磺酸酯(diallylthiosulfinate)，是从百合科葱属植物大蒜(alliumsativum)的鳞茎(大蒜头)中提取的一种有机硫化合物，同时也存在于洋葱和其他百合科植物中。新鲜大蒜中并没有大蒜辣素，只含有蒜氨酸(alliin)。当大蒜被切开或粉碎后，大蒜中的内源酶即蒜氨酸酶(Alliinase，EC4.4.1.4)被激活，催化蒜氨酸分解合成为大蒜辣素。大蒜辣素具有多种生理功能，如抗病原微生物、抗氧化、抗肿瘤、降血压、降血脂、降血糖、抗血小板聚集、护肝等。目前，大蒜辣素被广泛应用于食品和医药等领域。蒜氨酸酶对大蒜辣素的形成起着至关重要的作用。大蒜多糖是类菊粉左旋糖，一种由果糖(97％)和葡萄糖(约3％)组成的、6-位有支链的菊糖型β-D-果聚糖。其聚合度(dp)平均为15，分子量为3500Da，范围为2000至6000Da，属于低聚果糖(Fructooliosaccharide，FOS)。FOS被FDA认定为安全级的功能性甜味剂，也是符合益生元标准(即双歧杆菌促生素)的典型双歧因子，具有双向调节肠内菌群、降血脂、保护肝脏、促进维生素合成、促进Ca、Mg、Fe等矿物质吸收、防止肥胖和美容作用，是近10年来国际市场上广泛应用的功能性食品配料，被誉为集“营养、保健、疗效”三者于一体的21世纪健康新糖源。如能将蒜片加工废水作为资源加以利用，从中分离提取出蒜氨酸酶、大蒜多糖和大蒜辣素等各种营养保健因子，则既可实现资源的充分合理利用，又可将蒜片加工废水消弭于无形，达到变废为宝、以资源化利用的方式消除环境污染的目的，这无论是对于经济发展，还是对于环境治理，都无疑是具有十分重要的意义的。但迄今尚未见有这种技术的专利技术。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种利用蒜片加工废水制备蒜氨酸酶、大蒜辣素和大蒜多糖的方法。本专利技术发现蒜片加工废水中蒜氨酸酶的分子量远远大于大蒜辣素和大蒜多糖，通过选择合适孔径的超滤膜可以有效的截留住蒜氨酸酶。其次，大蒜辣素与CH2Cl2互溶，可以通过萃取工艺将大蒜辣素和大蒜多糖分离开，由此奠定了从蒜汁中提取蒜氨酸酶，大蒜辣素，大蒜多糖的基础。本专利技术的目的可通过以下方法实现：一种利用蒜片加工废水制备蒜氨酸酶、大蒜辣素和大蒜多糖的方法，包括如下步骤：(1)蒜片加工废水预冷后用截留分子量为10,000Da的超滤膜进行超滤浓缩，截留液合并即为蒜氨酸酶粗酶液；(2)超滤的滤过液经300Da的纳滤膜纳滤浓缩，纳滤浓缩液用CH2Cl2萃取多次，萃余液用于下一步大蒜多糖的制备，合并CH2Cl2萃取液，减压蒸馏除去CH2Cl2后，即得主要由大蒜辣素组成的油状液体；(3)收集步骤(2)的中得到的CH2Cl2萃余液，经减压浓缩后喷雾干燥，得大蒜多糖提取物。本专利技术所述的蒜片加工废水系指蒜瓣切片过程中因冲洗刀片而产生的工艺废水，蒜片脱水甩干时产生的废水，或两者的混合物。作为本专利技术的一种优选，步骤(1)中所述的预冷温度为0-14℃，优选2-4℃。作为本专利技术的一种优选，所述的蒜氨酸酶粗酶液于-70℃冻存6-7h后冷冻干燥得蒜氨酸酶粉。作为本专利技术的一种优选，步骤(2)所述的超滤的滤过液经300Da的纳滤膜在0.6MPa、30℃条件下纳滤。作为本专利技术的一种优选，步骤(2)所述的减压蒸馏的温度为18-25℃，优选20℃。作为本专利技术的一种优选，步骤(3)所述的减压浓缩的温度为55-85℃，优选60℃。有益效果：本专利技术提供了一种利用蒜片加工废水制备蒜氨酸酶、大蒜辣素和大蒜多糖的工艺(图1)。较为独特的是，它将蒜片加工废水作为资源加以利用，对其中所含的各种有效成分进行了分别提取，获得了三种有价值的产品，既消除了蒜片加工废水这一污染源，又实现了资源的充分合理利用，以资源化利用的方式解决了环境污染问题，可使生产企业比仅只加工蒜片的效益翻倍。按照本专利技术进行操作，能够以极高的提取率获得蒜片加工废水中所含有的蒜氨酸酶、大蒜辣素、大蒜多糖，而不会导致活性成分的丢失或破坏。这无论是对于蒜片加工业实现绿色无污染的清洁化生产，还是对于大蒜资源的综合利用而言，都是至关重要的。按照本专利技术方法加工生产得到的蒜氨酸酶、大蒜辣素以及大蒜多糖将作为新型天然药物原料和功能保健饮料原料被广泛应用于药品、保健品等领域。附图说明图1：蒜片加工废水中同时提取蒜氨酸酶，大蒜辣素以及大蒜多糖的工艺流程图2：蒜片加工废水对金黄色葡萄球菌的抑制作用图3：蒜片加工废水对枯草芽孢杆菌的抑制作用图4：蒜片加工废水对大肠杆菌的抑制作用图5：蒜氨酸酶蛋白凝胶电泳具体实施方式下面的实例将具体说明本专利技术的操作方法，但不能作为对本专利技术的限定。蒜片加工废水实际上为蒜片的水浸泡液，以下实施例分别以实验室模拟的蒜片加工废水及蒜片加工厂的蒜片加工废水为例，来说明本专利技术的技术方案。实施例1大蒜去皮，称取30g新鲜蒜瓣，切片，用60g去离子水室温(<20℃)浸泡2h(蒜片：去离子水＝1:2)，先用四层纱布过滤得到蒜汁53.59g，取新鲜蒜汁30mL，与已灭菌的LB培养基混合，配成浓度为30％(V/V)的培养基，混合均匀，倒平板，24h后观察金黄色葡萄球菌，大肠杆菌，枯草芽孢杆菌的生长情况发现，蒜汁对金黄色葡萄球菌(图2)，大肠杆菌(图3)、枯草芽孢杆菌(图4)均有抑菌作用。实施例2取蒜片加工废水30mL，与已灭菌的LB培养基混合，配成浓度为30％(V/V)的培养基，混合均匀，倒平板，24h后观察金黄色葡萄球菌，大肠杆菌，枯草芽孢杆菌的生长情况发现，蒜汁对金黄色葡萄球菌，大肠杆菌、枯草芽孢杆菌均有抑菌作用，其效果与实施例1相当。实施例3(1)大蒜去皮，称取100g新鲜蒜瓣，切片，用200g去离子水室温(<2本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种利用蒜片加工废水制备蒜氨酸酶、大蒜辣素和大蒜多糖的方法，其特征在于包括如下步骤：(1)蒜片加工废水预冷后用截留分子量为10,000Da的超滤膜进行超滤浓缩，截留液合并即为蒜氨酸酶粗酶液；(2)超滤的滤过液经300Da的纳滤膜纳滤浓缩，纳滤浓缩液用CH2Cl2萃取多次，萃余液用于下一步大蒜多糖的制备，合并CH2Cl2萃取液，减压蒸馏除去CH2Cl2后，即得主要由大蒜辣素组成的油状液体；(3)收集步骤(2)的中得到的CH2Cl2萃余液，经减压浓缩后喷雾干燥，得大蒜多糖提取物。

【技术特征摘要】
1.一种利用蒜片加工废水制备蒜氨酸酶、大蒜辣素和大蒜多糖的方法，其特征在于包括如下步骤：(1)蒜片加工废水预冷后用截留分子量为10,000Da的超滤膜进行超滤浓缩，截留液合并即为蒜氨酸酶粗酶液；(2)超滤的滤过液经300Da的纳滤膜纳滤浓缩，纳滤浓缩液用CH2Cl2萃取多次，萃余液用于下一步大蒜多糖的制备，合并CH2Cl2萃取液，减压蒸馏除去CH2Cl2后，即得主要由大蒜辣素组成的油状液体；(3)收集步骤(2)的中得到的CH2Cl2萃余液，经减压浓缩后喷雾干燥，得大蒜多糖提取物。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述的蒜片加工废水为蒜瓣切片过程中因冲洗刀片而产生的工艺废水、蒜片脱水甩干时产生的废水，或两者的混合物。3.根据权利要求1所述的方法，其特...

【专利技术属性】
技术研发人员：汤鲁宏，季莹莹，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32