The present invention discloses a method for rapid detection of deep fungal morphology based on contrast staining, relating to a method for detecting deep fungi. It includes the equipment required for fungal detection of aseptic disinfection and preservation method and aseptic operation methods; samples were obtained in patients with elbow vein blood about 1ml in venous blood in a sterile environment drops not solidified into a container with 0.8ml ampoule 1% Chicago blue saline solution diluted 15 fold and staining. Under sterile conditions, one drop after dyeing mixture droplets in a sterile glass slide, covered with coverslips after staff through the microscope and 5 million pixel electronic eyepiece above amplified image with high resolution imaging software will load mixture on a slide show on the computer screen was recorded. The invention can clearly display various living cells, and can bring revolutionary changes for the detection of clinical diseases. The present invention also relates to a rapid detection reagent for deep fungal morphology based on contrast staining.
【技术实现步骤摘要】
基于对比染色的深部真菌形态学快速检测方法及试剂
本专利技术涉及一种用于检测深部真菌的方法,具体的说是一种基于对比染色的深部真菌形态学快速检测方法。本专利技术还涉及一种基于对比染色的深部真菌形态学快速检测试剂。
技术介绍
随着近些年来环境污染的不断恶化,真菌感染人群也在不断扩大。真菌感染者由以往的继发感染人群,发展为目前的原发性真菌感染“正常”人群(由环境、职业、过劳等因素诱发)。此外,伴有基础疾病的患者和老年人,如糖尿病患者均为真菌感染的易感人群,现代介入技术及外科手术治疗的广泛应用也给真菌感染创造了条件。目前,检测深部真菌有以下四种方法:体液直接涂片形态学检测、血清学检测、病原菌基因检测以及病理学检测。体液直接涂片形态学检测为目前主要的深部真菌检测的方法,主要依靠可获得的体液或分泌物涂片检测及培养鉴定,但由于所获得的体液或分泌物来源于与外界相通的内体表(即管腔黏膜),无法与空气隔离,易于污染,导致其检测结果特异性差,不能反映深部感染真实情况,且真菌培养耗时长,一般需要2周以上,培养的阳性率极低,不能快速检测而便于后续的临床抢先治疗。血清学检测包括血清半乳甘露聚糖 ...
【技术保护点】
基于对比染色的深部真菌形态学快速检测方法,其特征在于:它包括如下步骤,步骤一:无菌处理检测深部真菌所需的器具,并无菌保存检测所需的器具;步骤二:用1‑2ml规格注射器取被检测者肘静脉血1毫升;步骤三:先在无菌环境中将一滴未凝固的静脉血滴入盛有0.8ml检测试剂的安瓿瓶中,然后轻摇安瓿瓶直至静脉血在安瓿瓶内呈均匀分布,最后将安瓿瓶静置20分钟,使芝加哥天蓝对静脉血进行染色;其中,0.8ml检测试剂的制备方法为:先将0.8~1.5克芝加哥天蓝粉剂溶入到100ml无菌生理盐水中,然后将芝加哥天蓝和生理盐水的混合液经一次性针头滤器过滤消毒,接着将芝加哥天蓝和生理盐水的混合液放入到经 ...
【技术特征摘要】
1.基于对比染色的深部真菌形态学快速检测方法,其特征在于:它包括如下步骤,步骤一:无菌处理检测深部真菌所需的器具,并无菌保存检测所需的器具;步骤二:用1-2ml规格注射器取被检测者肘静脉血1毫升;步骤三:先在无菌环境中将一滴未凝固的静脉血滴入盛有0.8ml检测试剂的安瓿瓶中,然后轻摇安瓿瓶直至静脉血在安瓿瓶内呈均匀分布,最后将安瓿瓶静置20分钟,使芝加哥天蓝对静脉血进行染色;其中,0.8ml检测试剂的制备方法为:先将0.8~1.5克芝加哥天蓝粉剂溶入到100ml无菌生理盐水中,然后将芝加哥天蓝和生理盐水的混合液经一次性针头滤器过滤消毒,接着将芝加哥天蓝和生理盐水的混合液放入到经过无菌处理的安瓿瓶中,最后将带有芝加哥天蓝的无菌生理盐水以每安瓿0.8ml分装于规格为5ml的安瓿瓶中备用;步骤四:对载玻片和盖玻片进行无菌处理或消毒处理;其中,对载玻片和盖玻片进行无菌处理或消毒处理的方式可以为如下两种中的一种,其中,第一种对载玻片和盖玻片进行无菌处理或消毒处理的方式为:先在75%酒精溶液中将载玻片和盖玻片浸泡3个小时以上,然后在制片时用酒精灯对载玻片和盖...
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