用于预测慢性乙肝患者对IFNα治疗的应答的方法和试剂盒技术

本发明专利技术涉及用于预测慢性乙肝患者对IFNα治疗的应答的标志物。本发明专利技术还涉及用于预测慢性乙肝患者对IFNα治疗的应答的方法，其包括测定慢性乙肝患者PBMC中这类标志物表达水平的步骤。本发明专利技术还涉及用于上述方法的试剂盒。

Methods and kits for predicting chronic hepatitis B patients' response to IFN alpha therapy

The present invention relates to markers for predicting the response of chronic hepatitis B patients to IFN alpha therapy. The present invention also relates to a method for predicting the response of chronic hepatitis B patients to IFN alpha treatment comprising the steps of determining the levels of such markers in PBMC in patients with chronic hepatitis b.. The present invention also relates to kits for said methods.

【技术实现步骤摘要】
用于预测慢性乙肝患者对IFNα治疗的应答的方法和试剂盒
本专利技术涉及用于预测慢性乙肝患者对IFNα治疗的应答的标志物。本专利技术还涉及用于预测慢性乙肝患者对IFNα治疗的应答的方法，其包括测定慢性乙肝患者PBMC中这类标志物表达水平的步骤。本专利技术还涉及用于上述方法的试剂盒。
技术介绍
乙型肝炎病毒感染，尤其是慢性乙型肝炎病毒感染是全球最为重要的公共卫生问题之一，目前全球约有超过3.5亿的慢性乙型肝炎病毒感染者。慢性乙型肝炎病毒感染可造成慢性乙型病毒性肝炎(ChronichepatitisB,CHB)、肝硬化(Livercirrhosis,LC)和原发性肝细胞癌(Hepatocellularcarcinoma,HCC)等肝脏疾病，由慢性乙型肝炎病毒感染及其所引起的相关疾病所导致的死亡，全球每年超过100万人。大部分的慢性HBV感染患者表现为无明显临床症状，其中约10-30％的患者发展成肝硬化或者肝癌。慢性HBV感染是一个动态过程，其感染的自然史可划分为4个不同的、且不一定存在必然联系的阶段：1)免疫耐受阶段，特点是HBeAg呈阳性，血清HBVDNA复制活跃，ALT水平正常或较低，本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种试剂盒，其包括能够检测标志物表达水平的第一试剂，任选地还包括IFNα和/或刺激物；其中，所述标志物选自OAS2或USP18，所述刺激物选自HBV抗原、HBV抗原的抗原性片段或其任何组合；优选地，所述HBV抗原为HBcAg；更优选地，所述HBcAg具有如SEQ ID NO:38所示的氨基酸序列；优选地，所述抗原性片段具有选自下列的氨基酸序列：SEQ ID NO:3‑37；优选地，所述刺激物包含分别具有如SEQ ID NO:3‑37所示的氨基酸序列的抗原性片段；优选地，所述第一试剂为能够检测所述标志物的mRNA水平或蛋白水平的试剂，例如为能够检测所述标志物的mRNA水平的试剂。

【技术特征摘要】
2016.03.04 CN 20161012117761.一种试剂盒，其包括能够检测标志物表达水平的第一试剂，任选地还包括IFNα和/或刺激物；其中，所述标志物选自OAS2或USP18，所述刺激物选自HBV抗原、HBV抗原的抗原性片段或其任何组合；优选地，所述HBV抗原为HBcAg；更优选地，所述HBcAg具有如SEQIDNO:38所示的氨基酸序列；优选地，所述抗原性片段具有选自下列的氨基酸序列：SEQIDNO:3-37；优选地，所述刺激物包含分别具有如SEQIDNO:3-37所示的氨基酸序列的抗原性片段；优选地，所述第一试剂为能够检测所述标志物的mRNA水平或蛋白水平的试剂，例如为能够检测所述标志物的mRNA水平的试剂。2.权利要求1所述的试剂盒，其包含能够检测OAS2表达水平的第一试剂，任选地还包括IFNα和/或刺激物。3.权利要求1所述的试剂盒，其包含能够检测USP18表达水平的第一试剂和IFNα，任选地还包括刺激物。4.权利要求1-3任一项所述的试剂盒，其还包含用于预处理含有PBMC的样品的第二试剂，其中所述第二试剂包括选自下列的一种或多种试剂：用于稀释样品的稀释剂(例如，磷酸盐缓冲液或生理盐水)；用于阻止血液凝固的抗凝剂(例如，肝素)；用于维持PBMC活性的试剂(例如，培养基或培养液)；和，用于分离PBMC的试剂(例如，淋巴细胞分离液，例如聚蔗糖-泛影葡胺溶液)；更优选地，所述第二试剂包括用于维持PBMC活性的试剂(例如，培养基或培养液)，和/或用于分离PBMC的试剂(例如，淋巴细胞分离液，例如聚蔗糖-泛影葡胺溶液)；优选地，所述试剂盒还包含采血装置(例如无热原真空采血管)和/或PBMC分离装置(例如PBMC细胞分离管)。5.能够检测标志物表达水平的试剂在制备试剂盒中的用途，所述试剂盒用于预测IFNα对患有慢性乙肝的受试者的治疗效果或所述受试者对IFNα治疗的应答；其中，所述标志物选自OAS2或USP18；优选地，所述试剂盒还包括IFNα和/或刺激物，所述刺激物选自HBV抗原、HBV抗原的抗原性片段或其任何组合；优选地，所述HBV抗原为HBcAg；更优选地，所述HBcAg具有如SEQIDNO:38所示的氨基酸序列；优选地，所述抗原性片段具有选自下列的氨基酸序列：SEQIDNO:3-37；优选地，所述刺激物包含分别具有如SEQIDNO:3-37所示的氨基酸序列的抗原性片段；优选地，所述能够检测标志物表达水平的试剂为能够测定所述标志物的mRNA水平或蛋白水平的试剂，例如为能够测定所述标志物的mRNA水平的试剂；更优选地，所述能够检测标志物表达水平的试剂通过PCR定量测定所述标志物的mRNA水平；优选地，所述试剂盒还包含一种或多种选自1)-6)的试剂或装置：1)用于稀释样品的稀释剂，例如磷酸盐缓冲液或生理盐水；2)用于阻止血液凝固的抗凝剂，例如肝素；3)用于维持PBMC活性的试剂，例如培养基或培养液；4)用于分离PBMC的试剂，例如淋巴细胞分离液，例如聚蔗糖-泛影葡胺溶液；5)采血装置，例如无热原真空采血管；和6)PBMC分离装置，例如PBMC细胞分离管；优选地，所述试剂盒包括用于维持PBMC活性的试剂(例如，培养基或培养液)，和/或用于分离PBMC的试剂(例如，淋巴细胞分离液，例如聚蔗糖-泛影葡胺溶液)。6.权利要求5所述的用途，其中所述试剂盒通过包括下述步骤的方法来预测IFNα对患有慢性乙肝的受试者的治疗效果或所述受试者对IFNα治疗的应答：(1)使用能够检测标志物表达水平的试剂测定来自所述受试者的样品中所述标志物的表达水平，其中所述标志物为OAS2；和(2)将该表达水平与参考值进行比较，或对该表达水平进行统计学分析以获得统计分析值，并将该统计分析值与参考值进行比较，并判断所述受试者是否会对IFNα治疗产生应答；其中，所述样品包含外周血单个核细胞(PBMC)，例如全血(例如抗凝全血)、外周血单个核细胞(PBMC)、或外周血白膜层；优选地，在步骤(2)中，使用Logistic回归模型对所述表达水平进行统计分析；优选地，在步骤(1)之前，所述方法还包括下列步骤中的一项或多项：(a)使用采血装置从所述受试者获得样品；(b)使用抗凝剂处理采血装置或来自所述受试者的样品；(c)使用用于维持PBMC活性的试剂处理来自所述受试者的样品；(d)使用稀释剂稀释来自所述受试者的样品；和(e)使用用于分离PBMC的试剂或PBMC分离装置从来自所述受试者的样品中分离获得PBMC。7.权利要求5所述的用途，其中所述试剂盒通过包括下述步骤的方法来预测IFNα对患有慢性乙肝的受试者的治疗效果或所述受试者对IFNα治疗的应答：(1)使用IFNα刺激来自所述受试者的至少一份样品作为待测样品，并将未经IFNα刺激的样品作为对照样品；或，使用IFNα和刺激物共同刺激来自所述受试者的至少一份样品作为待测样品，并将经所述刺激物刺激但未经IFNα刺激的样品作为对照样品；其中，所述刺激物选自HBV抗原、HBV抗原的抗原性片段或其任何组合；(2)使用能够检测标志物表达水平的试剂测定步骤(1)中各个样品中所述标志物的表达水平，并获得所述待测样品中该标志物的表达水...

【专利技术属性】
技术研发人员：葛胜祥，王邵娟，熊丽霞，刘永亮，夏宁邵，
申请(专利权)人：厦门大学，
类型：发明
国别省市：福建,35