一种鉴定猪活体背膘厚的基因诊断试剂盒制造技术

本发明专利技术公开了一种鉴定猪活体背膘厚的基因诊断试剂盒。利用本发明专利技术的基因诊断试剂盒来鉴定猪活体背膘厚方法为如下(1)或(2)或(3)或(4)：(1)是检测猪个体的MEG3基因的第460位脱氧核糖核苷酸是T还是A还是T和A；(2)是检测猪个体的MEG3基因第二外显子的第1137位脱氧核糖核苷酸是A还是G还是A和G；(3)是检测猪个体的MEG3基因第二外显子的第1158位脱氧核糖核苷酸是A还是G还是A和G；(4)是检测猪个体的MEG3基因第一内含子的第51位脱氧核糖核苷酸是T还是C还是T和C。通过实验证明：本发明专利技术的方法与猪达100kg体重活体背膘厚的实际测定结果一致，对选择优良猪种有重要意义。

A gene diagnosis kit for identification of porcine dorsal fat thickness

The invention discloses a gene diagnosis kit for identifying the thickness of a pig's dorsal fat. To identify pig backfat thickness method for gene diagnosis by following the kit (1) or (2) or (3) or (4): (1) MEG3 gene detection of porcine individual 460th DNA is T or A or T and A (2) is detected; individual pig MEG3 gene exon 2 1137th DNA is A or G or A and G; (3) the individual is the detection of porcine MEG3 gene exon 2 of 1158th DNA is A or G or A and G; (4) is the first individual detection of porcine MEG3 gene intron fifty-first de oxygen ribonucleotide is T or C or T and C. The experiment proved that the method of the invention is consistent with the actual measurement result of pig 100kg body weight and back fat thickness in vivo, and has important significance for selecting excellent pig breeds.

【技术实现步骤摘要】
一种鉴定猪活体背膘厚的基因诊断试剂盒
本专利技术属于基因工程领域，具体涉及一种鉴定猪活体背膘厚的基因诊断试剂盒，尤其涉及一种基于MEG3基因鉴定或辅助鉴定猪达100kg体重活体背膘厚的方法。
技术介绍
猪为六畜之首，养猪业在世界尤其是中国国民经济中占有重要地位。猪肉在诸多肉类产品中的比重一直保持在三分之一左右，是人们比较喜爱的副食之一。人们的生活不断改善，传统的养殖技术已经不能满足人们对猪肉的需求量。随着现代育种技术的发展，猪的生产性能显著提高，猪的健康养殖和育肥就显得格外重要。近年来，我国通过引进高瘦肉率猪种来提高瘦肉率和生长速率，但猪肉的品质下降和风味单一化已经引起消费者的关注。而猪肉的品质、风味亦取决于猪骨骼肌的生长和脂肪的沉积。在实际生产中，根据国家标准，背膘厚度直接反应猪脂肪含量的高低，对于校正到同一个体重标准下的猪群，背膘厚度数值越大，则瘦肉率越低，骨骼肌含量越少。因此可以用背膘厚作为衡量猪瘦肉率的判断指标。因此，如何有效的提前判断猪背膘是每个猪场经营者及育种学家追求的目标。近十年来，分子生物技术的发展为猪的育种提供了一种基于DNA变异的新型遗传标记。特别是分子标记辅助选择技术的出现，为显著改善猪的这些数量性状提供可能。
技术实现思路
本专利技术的第一个目的是提供一种鉴定或辅助鉴定猪达100kg体重活体背膘厚性状的方法。本专利技术提供的鉴定或辅助鉴定猪达100kg体重活体背膘厚性状的方法为如下(1)和/或(2)和/或(3)和/或(4)：(1)是检测猪个体的基因型是TT基因型还是AA基因型还是TA基因型，根据所述猪个体的基因型确定所述猪个体达100kg体重活体背膘厚大小：AA基因型的猪个体达100kg体重活体背膘厚多于TT基因型的猪个体，TT基因型的猪个体达100kg体重活体背膘厚多于TA基因型的猪个体；所述TT基因型为MEG3基因第二外显子第460位脱氧核糖核苷酸为T的纯合体；所述TA基因型为MEG3基因第二外显子第460位脱氧核糖核苷酸为T和A的杂合体；所述AA基因型为MEG3基因第二外显子第460位脱氧核糖核苷酸为A的纯合体；(2)是检测猪个体的基因型是AA基因型还是GG基因型还是AG基因型，根据所述猪个体的基因型确定所述猪个体达100kg体重活体背膘厚大小：AA基因型的猪个体达100kg体重活体背膘厚多于GG基因型的猪个体，GG基因型的猪个体达100kg体重活体背膘厚多于AG基因型的猪个体；所述AA基因型为MEG3基因第二外显子第847位脱氧核糖核苷酸为A的纯合体；所述AG基因型为MEG3基因第二外显子第847位脱氧核糖核苷酸为A和G的杂合体；所述GG基因型为MEG3基因第二外显子第847位脱氧核糖核苷酸为G的纯合体；(3)是检测猪个体的基因型是AA基因型还是GG基因型还是AG基因型，根据所述猪个体的基因型确定所述猪个体达100kg体重活体背膘厚大小：AA基因型的猪个体达100kg体重活体背膘厚多于GG基因型的猪个体，GG基因型的猪个体达100kg体重活体背膘厚多于AG基因型的猪个体；所述AA基因型为MEG3基因第二外显子第1158位脱氧核糖核苷酸为A的纯合体；所述AG基因型为MEG3基因第二外显子第1158位脱氧核糖核苷酸为A和G的杂合体；所述GG基因型为MEG3基因第二外显子第1158位脱氧核糖核苷酸为G的纯合体；(4)是检测猪个体的基因型是TT基因型还是CC基因型还是TC基因型，根据所述猪个体的基因型确定所述猪个体达100kg体重活体背膘厚大小：TT基因型的猪个体达100kg体重活体背膘厚多于CC基因型的猪个体，CC基因型的猪个体达100kg体重活体背膘厚多于TC基因型的猪个体；所述TT基因型为MEG3基因第一内含子第51位脱氧核糖核苷酸为T的纯合体；所述TC基因型为MEG3基因第一内含子第51位脱氧核糖核苷酸为T和C的杂合体；所述CC基因型为MEG3基因第一内含子第51位脱氧核糖核苷酸为C的纯合体；所述MEG3基因第二外显子的核苷酸序列如序列表中序列1所示；所述MEG3基因第一内含子的核苷酸序列如序列表中序列2所示。上述方法中，所述(1)中，所述检测猪个体的基因型是AA基因型还是GG基因型还是AG基因型的方法为如下A)或B)：A)直接测序；B)测序含有MEG3基因第二外显子第460位脱氧核糖核苷酸的PCR扩增产物；所述(2)中，所述检测猪个体的基因型是AA基因型还是GG基因型还是AG基因型的方法为如下C)或D)：C)直接测序；D)测序含有MEG3基因第二外显子第1137位脱氧核糖核苷酸的PCR扩增产物；所述(3)中，所述检测猪个体的基因型是AA基因型还是GG基因型还是AG基因型的方法为如下E)或F)：E)直接测序；F)测序含有MEG3基因第二外显子第1158位脱氧核糖核苷酸的PCR扩增产物；所述(4)中，所述检测猪个体的基因型是TT基因型还是CC基因型还是TC基因型的方法为如下G)或H)：G)直接测序；H)测序含有MEG3基因第一内含子第51位脱氧核糖核苷酸的PCR扩增产物；所述B)、D)和F)中的PCR扩增产物所用的引物为如下1)或2)：1)由序列表中序列3所示的单链DNA分子和序列表中序列4所示的单链DNA分子组成的引物对A；2)由序列A所示的单链DNA分子和序列B所示的单链DNA分子组成的引物对C；所述序列A为将序列3删除或增加或改变一个或几个核苷酸，且与序列3具有相同功能的核苷酸；所述序列B为将序列4删除或增加或改变一个或几个核苷酸，且与序列4具有相同功能的核苷酸；所述H)中的PCR扩增产物所用的引物为如下3)或4)：3)由序列表中序列5所示的单链DNA分子和序列表中序列6所示的单链DNA分子组成的引物对B；4)由序列C所示的单链DNA分子和序列D所示的单链DNA分子组成的引物对D；所述序列C为将序列5删除或增加或改变一个或几个核苷酸，且与序列5具有相同功能的核苷酸；所述序列D为将序列6删除或增加或改变一个或几个核苷酸，且与序列6具有相同功能的核苷酸。本专利技术的第二个目的是提供检测猪个体的MEG3基因第二外显子的第460位脱氧核糖核苷酸和/或第1137位脱氧核糖核苷酸和/或第1158位脱氧核糖核苷酸的基因型的物质或检测猪个体的MEG3基因第一内含子的第51位脱氧核糖核苷酸的基因型的物质的新用途。本专利技术提供了检测猪个体的MEG3基因第二外显子的第460位脱氧核糖核苷酸和/或第1137位脱氧核糖核苷酸和/或第1158位脱氧核糖核苷酸的基因型的物质或检测猪个体的MEG3基因第一内含子的第51位脱氧核糖核苷酸的基因型的物质在鉴定或辅助鉴定猪个体达100kg体重活体背膘厚中的应用。本专利技术还提供了检测猪个体的MEG3基因第二外显子的第460位脱氧核糖核苷酸和/或第1137位脱氧核糖核苷酸和/或第1158位脱氧核糖核苷酸的基因型的物质或检测猪个体的MEG3基因第一内含子的第51位脱氧核糖核苷酸的基因型的物质在制备鉴定或辅助鉴定猪个体达100kg体重活体背膘厚的产品中的应用。本专利技术还提供了检测猪个体的MEG3基因第二外显子的第460位脱氧核糖核苷酸和/或第1137位脱氧核糖核苷酸和/或第1158位脱氧核糖核苷酸的基因型的物质或检测猪个体的MEG3基因第一内含子的第51位脱本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种鉴定或辅助鉴定猪达100kg体重活体背膘厚性状的方法，为如下(1)和/或(2)和/或(3)和/或(4)：(1)是检测猪个体的基因型是TT基因型还是AA基因型还是TA基因型，根据所述猪个体的基因型确定所述猪个体达100kg体重活体背膘厚大小：AA基因型的猪个体达100kg体重活体背膘厚多于TT基因型的猪个体，TT基因型的猪个体达100kg体重活体背膘厚多于TA基因型的猪个体；所述TT基因型为MEG3基因第二外显子第460位脱氧核糖核苷酸为T的纯合体；所述TA基因型为MEG3基因第二外显子第460位脱氧核糖核苷酸为T和A的杂合体；所述AA基因型为MEG3基因第二外显子第460位脱氧核糖核苷酸为A的纯合体；(2)是检测猪个体的基因型是AA基因型还是GG基因型还是AG基因型，根据所述猪个体的基因型确定所述猪个体达100kg体重活体背膘厚大小：AA基因型的猪个体达100kg体重活体背膘厚多于GG基因型的猪个体，GG基因型的猪个体达100kg体重活体背膘厚多于AG基因型的猪个体；所述AA基因型为MEG3基因第二外显子第847位脱氧核糖核苷酸为A的纯合体；所述AG基因型为MEG3基因第二外显子第847位脱氧核糖核苷酸为A和G的杂合体；所述GG基因型为MEG3基因第二外显子第847位脱氧核糖核苷酸为G的纯合体；(3)是检测猪个体的基因型是AA基因型还是GG基因型还是AG基因型，根据所述猪个体的基因型确定所述猪个体达100kg体重活体背膘厚大小：AA基因型的猪个体达100kg体重活体背膘厚多于GG基因型的猪个体，GG基因型的猪个体达100kg体重活体背膘厚多于AG基因型的猪个体；所述AA基因型为MEG3基因第二外显子第1158位脱氧核糖核苷酸为A的纯合体；所述AG基因型为MEG3基因第二外显子第1158位脱氧核糖核苷酸为A和G的杂合体；所述GG基因型为MEG3基因第二外显子第1158位脱氧核糖核苷酸为G的纯合体；(4)是检测猪个体的基因型是TT基因型还是CC基因型还是TC基因型，根据所述猪个体的基因型确定所述猪个体达100kg体重活体背膘厚大小：TT基因型的猪个体达100kg体重活体背膘厚多于CC基因型的猪个体，CC基因型的猪个体达100kg体重活体背膘厚多于TC基因型的猪个体；所述TT基因型为MEG3基因第一内含子第51位脱氧核糖核苷酸为T的纯合体；所述TC基因型为MEG3基因第一内含子第51位脱氧核糖核苷酸为T和C的杂合体；所述CC基因型为MEG3基因第一内含子第51位脱氧核糖核苷酸为C的纯合体。...

【技术特征摘要】
1.一种鉴定或辅助鉴定猪达100kg体重活体背膘厚性状的方法，为如下(1)和/或(2)和/或(3)和/或(4)：(1)是检测猪个体的基因型是TT基因型还是AA基因型还是TA基因型，根据所述猪个体的基因型确定所述猪个体达100kg体重活体背膘厚大小：AA基因型的猪个体达100kg体重活体背膘厚多于TT基因型的猪个体，TT基因型的猪个体达100kg体重活体背膘厚多于TA基因型的猪个体；所述TT基因型为MEG3基因第二外显子第460位脱氧核糖核苷酸为T的纯合体；所述TA基因型为MEG3基因第二外显子第460位脱氧核糖核苷酸为T和A的杂合体；所述AA基因型为MEG3基因第二外显子第460位脱氧核糖核苷酸为A的纯合体；(2)是检测猪个体的基因型是AA基因型还是GG基因型还是AG基因型，根据所述猪个体的基因型确定所述猪个体达100kg体重活体背膘厚大小：AA基因型的猪个体达100kg体重活体背膘厚多于GG基因型的猪个体，GG基因型的猪个体达100kg体重活体背膘厚多于AG基因型的猪个体；所述AA基因型为MEG3基因第二外显子第847位脱氧核糖核苷酸为A的纯合体；所述AG基因型为MEG3基因第二外显子第847位脱氧核糖核苷酸为A和G的杂合体；所述GG基因型为MEG3基因第二外显子第847位脱氧核糖核苷酸为G的纯合体；(3)是检测猪个体的基因型是AA基因型还是GG基因型还是AG基因型，根据所述猪个体的基因型确定所述猪个体达100kg体重活体背膘厚大小：AA基因型的猪个体达100kg体重活体背膘厚多于GG基因型的猪个体，GG基因型的猪个体达100kg体重活体背膘厚多于AG基因型的猪个体；所述AA基因型为MEG3基因第二外显子第1158位脱氧核糖核苷酸为A的纯合体；所述AG基因型为MEG3基因第二外显子第1158位脱氧核糖核苷酸为A和G的杂合体；所述GG基因型为MEG3基因第二外显子第1158位脱氧核糖核苷酸为G的纯合体；(4)是检测猪个体的基因型是TT基因型还是CC基因型还是TC基因型，根据所述猪个体的基因型确定所述猪个体达100kg体重活体背膘厚大小：TT基因型的猪个体达100kg体重活体背膘厚多于CC基因型的猪个体，CC基因型的猪个体达100kg体重活体背膘厚多于TC基因型的猪个体；所述TT基因型为MEG3基因第一内含子第51位脱氧核糖核苷酸为T的纯合体；所述TC基因型为MEG3基因第一内含子第51位脱氧核糖核苷酸为T和C的杂合体；所述CC基因型为MEG3基因第一内含子第51位脱氧核糖核苷酸为C的纯合体。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述(1)中，所述检测猪个体的基因型是AA基因型还是GG基因型还是AG基因型的方法为如下A)或B)：A)直接测序；B)测序含有MEG3基因第二外显子第460位脱氧核糖核苷酸的PCR扩增产物；所述(2)中，所述检测猪个体的基因型是AA基因型还是GG基因型还是AG基因型的方法为如下C)或D)：C)直接测序；D)测序含有MEG3基因第二外显子第1137位脱氧核糖核苷酸的PCR扩增产物；所述(3)中，所述检测猪个体的基因型是AA基因型还是GG基因型还是AG基因型的方法为如下E)或F)：E)直接测序；F)测序含有MEG3基因第二外显子第1158位脱氧核糖核苷酸的PCR扩增产物；所述(4)中，所述检测猪个体的基因型是TT基因型还是CC基因型还是TC基因型的方法为如下G)或H)：G)直接测序；H)测序含有MEG3基因第一内含子第51位脱氧核糖核苷酸的PCR扩增产物；所述B)、D)和F)中的PCR扩增产物所用的引物为如下1)或2)：1)由序列表中序列3所示的单链DNA分子和序列表中序列4所示的单链DNA分子组成的引物对A；2)由序列A所示的单链DNA分子和序列B所示的单链DNA分子组成的引物对C；所述序列A为将序列3删除或增加或改变一个或几个核苷酸，且与序列3具有相同功能的核苷酸；所述序列B为将序列4删除或增加或改变一个或几个核苷酸，且与序列4具有相同功能的核苷酸；所述H)中的PCR扩增产物所用的引物为如下3)或4)：3)由序列表中序列5所示的单链DNA分子和序列表中序列6所示的单链DNA分子组成的引物对B；4)由序列C所示的单链DNA分子和序列D所示的单链DNA分子组成的引物对D；所述序列C为将序列5删除或增加或改变一个或几个核苷酸，且与序列5具有相同功能的...

【专利技术属性】
技术研发人员：唐中林，孙浩，李奎，梁如意，
申请(专利权)人：中国农业科学院北京畜牧兽医研究所，
类型：发明
国别省市：北京,11