确定溶剂校正曲线的方法技术

在一个实施方案中，本发明专利技术涉及一种用于建立溶剂校正曲线以及使用所述曲线来从分析物的传感图获得校正的传感图或校正的报告点的方法。在另一个实施方案中，本发明专利技术提供用于研究分子相互作用的分析系统，其包含包括用于执行所述方法的步骤的程序代码装置的计算机处理装置。还提供用于执行所述方法的步骤的包含存储在计算机可读介质上或承载在电信号或光信号上的程序代码装置的计算机程序产品。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】确定溶剂校正曲线的方法专利
本专利技术涉及用于调节有效(active)和参考检测表面之间的主体信号失配的方法。更具体地说，本专利技术涉及用于建立溶剂校正曲线以及使用所述曲线从分析物的传感图获得校正的传感图或校正的报告点的方法。本专利技术还涉及用于执行所述方法的步骤的分析系统和计算机程序产品。专利技术背景能够实时监测分子相互作用的分析传感器系统(即，无标签系统)正受到越来越多的关注。这些系统经常基于光学生物传感器，且通常被称作相互作用分析传感器或生物特异性相互作用分析传感器。代表性生物传感器系统是由GEHealthcareLifeSciences销售的Biacore®仪器，其使用表面等离子体共振(surfaceplasmonresonance，SPR)来检测样品中的分子与固定在传感表面上的分子结构之间的相互作用。使用Biacore®系统，有可能在不使用标记的情况下实时确定样品中的具体分子的存在和浓度以及附加的相互作用参数，例如分子相互作用的缔合速率常数和解离速率常数。该装置和理论背景在文献(参见例如，Jonsson，U.等人，BioTechniques11：620-627(1991))中充分描述。通常，该技术涉及将配体固定到传感器芯片(流动池)的特殊光学传感器表面，使传感器芯片与含有感兴趣的分析物的样品流接触，和随后测量由配体和分析物之间的结合引起的传感器芯片的表面光学特性中的变化。有关SPR的更多细节，还参考美国专利No.5,313,264、美国专利No.5,573,956和美国专利No.5,641,640。当用弱疏水的分析物分子运行测定时，可能需要在流动缓冲液和样品中包含有机溶剂。对于较小的有机分子分析物(80-1000Da)，通常使用有机溶剂例如2-5%二甲基亚砜(DMSO)。许多这些应用取决于有效表面和参考表面之间的基准减法(referencesubtraction)，以便获得足够的数据品质。然而，取决于固定在有效表面上的配体的量，主体信号(来自流动缓冲液和样品中的折射率的差异)不能被基准减法完全猝灭。这被添加到来自分析物结合的响应中，并且由于失配也随着移液误差而变化，其可以从显著的正值跨到负值。取决于报告点读数，这可能对测定中的数据品质而言是重要的。然而，这可以通过测量在参考物中参考误差与主体响应的函数且随后通过该函数调节每个样品来校正，即溶剂校正。当进行溶剂校正时，用户必须制备具有代表性主体响应的许多溶液(根据Biacore推荐的程序，8种)。为了建立校正曲线，将这些溶液注射到每一对参考-有效检测表面上。由于程序在整个运行中重复至少一次，并且由于不存在多次使用相同位置的方式，板占用率和用户工作量是显著的。需要使溶剂校正过程简单和自动化。专利技术概述本专利技术涉及用于建立溶剂校正曲线以及使用所述曲线从分析物的传感图获得校正传感图或校正报告点的方法。在一方面，它提供了用于建立溶剂校正曲线的方法，其包括：a.提供包含高浓度的有机溶剂的第一溶液和包含低浓度的相同有机溶剂的第二溶液；b.在集成微流体盒(IFC)的流动通道中以预定比例在线混合所述两种溶液，所述流动通道包含具有未固定有配体或类似物的光学传感器表面的流动池；c.从步骤(b)的光学传感器表面获得所述混合溶液的传感图，所述传感图包含所述传感图的稳定部分处的报告点；d.在集成微流体盒(IFC)的另一个流动通道中以如步骤(b)中的相同预定比例在线混合所述两种溶液，所述流动通道包含具有固定有配体或类似物的光学传感器表面的流动池；e.从步骤(d)的光学传感器表面获得所述混合溶液的传感图，所述传感图包含所述传感图的稳定部分处的报告点；f.以所述两种溶液的不同预定比例重复步骤(b)和(c)各n次；和g.使用所述报告点建立溶剂校正曲线；其中n为至少3。在另一方面，它提供了用于获得分析物的校正响应的方法，其包括：a.在包括含有用于分析物的固定配偶体(partners)的光学传感器表面的流动池中生成具有分析物的溶液的传感图；b.在具有不含有用于分析物的固定配偶体的光学传感器表面的相同或另一个流动池中生成溶液的传感图；c.通过以下方式获得校正的响应，首先对于各个信号，从(a)的信号中减去(b)的信号以生成修改的传感图，随后根据通过本专利技术的某些实施方案获得的校正曲线调节所述修改的传感图的信号或来自所述传感图的报告点。在再一方面，它提供了一种用于在微通道中混合两种液体的方法，其包括：a.提供包含特定组合物的第一液体和包含另一种组合物的第二液体；b.在微通道中以预定比例在线混合两种液体；其中，混合所述两种液体包括各自以单独的预设流动速率注射所述两种液体，使组合液体行进通过所述微通道，并使所述流动反向，使得所述组合液体第二次通过所述微通道。在另一方面，本专利技术提供了用于研究分子相互作用的分析系统，其包括计算机处理装置，所述计算机处理装置包括用于执行所述方法的步骤的程序代码装置。在又一方面，本专利技术提供了用于执行所述方法的步骤的包含存储在计算机可读介质上或承载在电信号或光信号上的程序代码装置的计算机程序产品。本专利技术的其它细节和优点将从下面的描述和权利要求而显而易见。附图简述图1A和B说明当两种溶液混合三次时，IFC的一部分的细节，示出流动通道中的方向(箭头)和混合模式。图2示出与用手动混合方法论(预混合)产生的曲线相比，用本专利技术(返回的)产生的溶剂校正点。图3示出使用本专利技术的实施方案收集的数据的传感图。专利技术详述小分子应用越来越多地使用无标签系统进行。如上所述，这些应用通常取决于溶剂校正，其需要大量的动手时间，容易出错并且在仪器中占据大量的试剂/样品位置。对于具有多通道构造的系统，这些问题将恶化。与手动操作相比，本专利技术的实施方案显著地减少了用户努力和位置占用的量。本专利技术的实施方案对于使用具有平行通道的集成微流体盒(IFC)(即所谓的多通道系统)的测定特别有用。本专利技术涉及用于建立溶剂校正曲线以及获得分析物的校正响应的新方法。本专利技术还涉及用于执行所述方法的步骤的分析系统和计算机程序产品。因此，在一方面，本专利技术涉及用于建立溶剂校正曲线的方法，其包括：a.提供包含高浓度的有机溶剂的第一溶液和包含低浓度的相同有机溶剂的第二溶液；b.在集成微流体盒(IFC)的流动通道中以预定比例在线混合所述两种溶液，所述流动通道包含具有未固定有配体或类似物的光学传感器表面的流动池；c.从步骤(b)的光学传感器表面获得所述混合溶液的传感图，所述传感图包含所述传感图的稳定部分处的报告点；d.在集成微流体盒(IFC)的另一个流动通道中以如步骤(b)中的相同预定比例在线混合所述两种溶液，所述流动通道包含具有固定有配体或类似物的光学传感器表面的流动池；e.从步骤(d)的光学传感器表面获得所述混合溶液的传感图，所述传感图包含所述传感图的稳定部分处的报告点；f.以所述两种溶液的不同预定比例重复步骤(b)和(c)各n次；和g.使用所述报告点建立溶剂校正曲线；其中n为至少3。在某些实施方案中，当n为3时，预定比例包括1:0(100%的第一溶液且不含第二溶液)；0:1(100%的第二溶液且不含第一溶液)；以及第一和第二溶液的混合，例如以0.5:0.5的比率混合。在某些实施方案中，预定比例间隔在1:0和0:1之间。在某些优选的实施方案本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于建立溶剂校正曲线的方法，其包括：a. 提供包含高浓度的有机溶剂的第一溶液和包含低浓度的相同有机溶剂的第二溶液；b. 在集成微流体盒(IFC)的流动通道中以预定比例在线混合所述两种溶液，所述流动通道包含具有未固定有配体或类似物的光学传感器表面的流动池；c. 从步骤(b)的光学传感器表面获得所述混合溶液的传感图，所述传感图包含所述传感图的稳定部分处的报告点；d. 在所述集成微流体盒(IFC)的另一个流动通道中以如步骤(b)中的相同预定比例在线混合所述两种溶液，所述流动通道包含具有固定有配体或类似物的光学传感器表面的流动池；e. 从步骤(d)的光学传感器表面获得所述混合溶液的传感图，所述传感图包含所述传感图的稳定部分处的报告点；f. 以所述两种溶液的不同预定比例重复步骤(b)和(c)各n次；和g. 使用所述报告点建立溶剂校正曲线；其中n为至少3。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2014.10.30 US 62/0725741.一种用于建立溶剂校正曲线的方法，其包括：a.提供包含高浓度的有机溶剂的第一溶液和包含低浓度的相同有机溶剂的第二溶液；b.在集成微流体盒(IFC)的流动通道中以预定比例在线混合所述两种溶液，所述流动通道包含具有未固定有配体或类似物的光学传感器表面的流动池；c.从步骤(b)的光学传感器表面获得所述混合溶液的传感图，所述传感图包含所述传感图的稳定部分处的报告点；d.在所述集成微流体盒(IFC)的另一个流动通道中以如步骤(b)中的相同预定比例在线混合所述两种溶液，所述流动通道包含具有固定有配体或类似物的光学传感器表面的流动池；e.从步骤(d)的光学传感器表面获得所述混合溶液的传感图，所述传感图包含所述传感图的稳定部分处的报告点；f.以所述两种溶液的不同预定比例重复步骤(b)和(c)各n次；和g.使用所述报告点建立溶剂校正曲线；其中n为至少3。2.权利要求1的方法，其中混合所述两种溶液包括以单独的预设流动速率注射所述两种溶液，使组合溶液行进通过所述一个或多个流动池，并使所述流动反向，使得所述组合溶液第二次通过所述一个或多个流动池。3.权利要求2的方法，其中所述流动再一次反向，使得所述组合溶液第三次通过所述一个或多个流动池。4.权利要求1的方法，其中混合所述两种溶液包括各自以单独的预设流动速率注射所述两种溶液，使所述组合溶液在进入所述流动池之前行进通过通道和/或阀。5.权利要求1的方法，其中混合所述两种溶液通过控制各种溶液的流动速率来实现。6.权利要求1的方法，其...

【专利技术属性】
技术研发人员：O卡尔斯森，H伯林克，
申请(专利权)人：通用电气健康护理生物科学股份公司，
类型：发明
国别省市：瑞典,SE