一种用于研究诊断标志物参与影响肝癌细胞生长、侵袭及转移过程的方法技术

本发明专利技术公开了一种用于研究诊断标志物参与影响肝癌细胞生长、侵袭及转移过程的方法，包括以下步骤：（1）材料准备；（2）RNA提取；（3）蛋白印迹；（4）免疫荧光染色及激光共聚焦显微观察；（5）生长、侵袭及转移；（6）免疫组化。本发明专利技术对人畜安全、对生态环境影响小、可利用野生植物进行生产加工、生产设备通用性较好、产品改良的技术潜力大、开发投资风险相对较小。

【技术实现步骤摘要】
一种用于研究诊断标志物参与影响肝癌细胞生长、侵袭及转移过程的方法
本专利技术涉及生物
，具体是一种用于研究诊断标志物参与影响肝癌细胞生长、侵袭及转移过程的方法。
技术介绍
在公知的
，生物农药因为对环境友好的特质，近年来发展比较迅速，而且也受到各国政府的高度重视，通过简化登记流程、降低登记门槛等措施为生物农药的开发提供便利。因此，生物农药已成为新农药开发的一个非常活跃的领域。生物农药目前的市场约为15～20亿美元，约占全球农药市场的5%，虽然占比较低，但在整个农药市场增长缓慢的背景下生物农药一直保持着一个非常快的增长势头，从2006年占农药市场的不到1%增长到目前约5%。目前最大的生物农药市场在美国，占全球市场份额的40%以上。欧洲排第二，占总数的25%，亚洲占20%左右排第三，拉丁美洲约占10%。全球生物农药市场是生物农药中规模最大的，约为9亿美元，植物源农药位居次席，约5亿美元，并以每年10%～15%的速度增长。生物农药是一个比较大的范畴，里边包含很多种品种，销售状况也因地区而已，因此不能仅仅因为整个市场表现良好就得出个别品种也具有良好发展前景的结论。而且，相比植物源本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于研究诊断标志物参与影响肝癌细胞生长、侵袭及转移过程的方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）材料准备：准备人肝癌细胞株MHCC97H、胎牛血清、DMEM培养基、青霉素、链霉素、L‑谷氨酰胺、嘌呤霉素、人表皮生长因子，待用；准备人肝癌细胞组织标本，待用；（2）RNA提取：采用Trizol试剂提取细胞总RNA，随后使用反转录试剂盒进行反转录，其中诊断标志物基因序列扩增的引物如下所示：MIM‑B诊断标志物基因序列扩增的上游引物如SEQ ID NO.1所示，下游引物如SEQ ID NO.2所示；Caveolin‑1诊断标志物基因序列扩增的上游引物如SEQ ID NO.3所示，下游引物如SEQ I...

【技术特征摘要】
1.一种用于研究诊断标志物参与影响肝癌细胞生长、侵袭及转移过程的方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）材料准备：准备人肝癌细胞株MHCC97H、胎牛血清、DMEM培养基、青霉素、链霉素、L-谷氨酰胺、嘌呤霉素、人表皮生长因子，待用；准备人肝癌细胞组织标本，待用；（2）RNA提取：采用Trizol试剂提取细胞总RNA，随后使用反转录试剂盒进行反转录，其中诊断标志物基因序列扩增的引物如下所示：MIM-B诊断标志物基因序列扩增的上游引物如SEQIDNO.1所示，下游引物如SEQIDNO.2所示；Caveolin-1诊断标志物基因序列扩增的上游引物如SEQIDNO.3所示，下游引物如SEQIDNO.4所示；（3）蛋白印迹：采用蛋白印迹试剂盒对表达的蛋白质进行定量检测；（4）免疫荧光染色及激光共聚焦显微观察：将MHCC97H进行PBS清洗、固定、孵化，随后进行镜检；（5）生长、侵袭及转移：将人肝癌细胞组织标本进行苏木精伊红固定染色；（6）免疫组化：将染色后的人肝癌细胞组织标本进行镜检和统计学分析。2.根据权利要求1所述的用于研究...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄修燕，黄自丽，
申请(专利权)人：黄修燕，
类型：发明
国别省市：上海,31