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一种乙肝病毒表面抗原基因与表达载体及细胞株制造技术

技术编号:16030012 阅读:59 留言:0更新日期:2017-08-19 11:29
本发明专利技术公开了一种乙肝病毒表面抗原基因与表达载体及细胞株。该乙肝病毒表面抗原基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,该基因只含有部分核心抗原基因序列和部分X基因,作为生产疫苗的基因,安全性更好。该乙肝病毒表面抗原基因整合到哺乳动物细胞基因组进行表达后,大抗原得以分泌性表达,适合用于生产乙肝病毒表面抗原疫苗。

【技术实现步骤摘要】
一种乙肝病毒表面抗原基因与表达载体及细胞株
本专利技术属于疫苗生产领域,特别涉及一种乙肝病毒表面抗原基因与表达载体及细胞株。
技术介绍
通过优化乙肝病毒大S抗原基因序列和构建高效表达载体的方法均无法高效表达分泌性乙肝表面抗原。这是因为过高的LargeS基因表达会抑制表面抗原的分泌,只有正确比例的LargeS:S才能够获得表面抗原的高效表达,而S抗原基因的调控序列正好位于preS序列之中,所以改变其基因序列来获得大S抗原的高表达是不可取的。部分专利技术(如公开号为CN102851313A的专利申请)中描述了利用去除大部分乙肝病毒核心抗原基因的表达载体(含核质附着区序列),由于其载体中还有SV40等上游强启动子,会干扰乙肝病毒LargeS:S比例,从而影响抗原表达;并且由于其还是随机插入基因组中,会造成插入序列的不稳定,这对于生产性的表达是有风险的。
技术实现思路
本专利技术的首要目的在于克服现有技术的缺点与不足,提供一种乙肝病毒表面抗原基因。本专利技术的另一目的在于提供一种乙肝病毒表面抗原的表达载体,其含有上述乙肝病毒表面抗原基因。本专利技术的再一目的在于提供一种乙肝病毒表面抗原的表达细胞株及其制备方法。本专利技术的目的通过下述技术方案实现:一种乙肝病毒表面抗原基因,其由抗原启动子和部分核心抗原序列(包括间隔)、大S抗原基因和部分X基因序列(包括间隔)依次连接在一起,核苷酸序列如下(SEQIDNO.1)所示。aagaggcaggtcccctagaagaagaactccctcgcctcgcagacgaaggtctcaatcgccgcgtcgcagaagatctcaatctcgggaatctcaatgttagtattccttggactcataaggtgggaactttacggggctttattcttctacggtacctagctttaatcctaattggcaaactccttcttttcctgacattcatttgcaggaggacattgttgatagatgtaagcaatttgtggggccccttacagtaaatgaaaacaggagactaaaattgattatgcctgctaggttttatcccaatgttactaaatatttgcccttagataaagggatcaaaccttattatccagagcatgtagttaatcattacttccagacgagacattatttacacactctttggaaggcgggtatcttatataaaagagagtccacaagtagcgcctcatattgggggtcaccatattcttgggaacaaaatctacagcatgggaggttggtcttccaaacctcgcaaaggcatggggacaaatctttctgtccccaatcccctgggattcttccccgatcatcagttggaccctgcattcaaagccaactcagaaaatccagattgggacctcaacccgcacaaggacaactggccggacgccaacaaggtgggagtgggagcattcgggccagggttcgcacctccccatgggggactgttggggtggagccctcaggctcagggactactcacaacggtgccagcagttcctcctcctgcctccaccaatcggcagtcaggaaggcagcctactcccttatctccacctctaagggacactcatcctcaggccatgcagtggaactccaccactttccaccaaactcttcaagatcccagagtcagggccctgtactttcctgctggtggctccagttcaggaacagtgagccctgctcagaatactgtctctgccatatcgtcaatcttatcgaagactggggaccctgtaccgaacaatgggaggttggtcttccaaacctcgcaaaggcatggggacaaatctttctgtccccaatcccctgggattcttccccgatcatcagttggaccctgcattcaaagccaactcagaaaatccagattgggacctcaacccgcacaaggacaactggccggacgccaacaaggtgggagtgggagcattcgggccagggttcgcacctccccatgggggactgttggggtggagccctcaggctcagggactactcacaacggtgccagcagttcctcctcctgcctccaccaatcggcagtcaggaaggcagcctactcccttatctccacctctaagggacactcatcctcaggccatgcagtggaactccaccactttccaccaaactcttcaagatcccagagtcagggccctgtactttcctgctggtggctccagttcaggaacagtgagccctgctcagaatactgtctctgccatatcgtcaatcttatcgaagactggggaccctgtaccgaacatggagaacatcgcatcaggactcctaggacccctgctcgtgttacaggcggggtttttcttgttgacaaaaatcctcacaataccacagagtctagactcgtggtggacttctctcaattttctaggggaaacacccgtgtgtcttggccaaaattcgcagtcccaaatctccagtcactcaccaacctgttgtcctccaatttgtcctggatatcgctggatgtgtctgcggcgttttatcatattcctctgcatcctgctgctatgcctcatcttcttgttggttcttctggactatcaaggtatgttgcccgtttgtcctctaattccaggatcctcaacaaccagcacgggaccatgcaaaacctgcacaactcctgctcaaggaacctctatgtttccctcatgttgctgtacaaaacctacggacggaaactgcacctgtattcccatcccatcatcttgggctttcgcaaaatacctatgggagtgggcctcagtccgtttctcttggctcagtttactagtgccatttgttcagtggttcgtagggctttcccccactgtctggctttcagttatattgatgatgtggttttgggggccaagtctgtacaacatcttgagtccctttataccgctgttaccaattttcttttgtctttgggtatacatttaaatgtggctgatagggtgcggtgactgtatattgtgcgcgacacccctgtgtacatgtcgtgtgggctcagactcgcgcacaagacctctccggcgcgctgctctatacgcgcgctctgcgtatagtgtagagagagacacgcgcgcatctctctacacgcacactcgtgtgtgtgtctcat本文档来自技高网...
一种乙肝病毒表面抗原基因与表达载体及细胞株

【技术保护点】
一种乙肝病毒表面抗原基因,其特征在于:所述的乙肝病毒表面抗原基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

【技术特征摘要】
1.一种乙肝病毒表面抗原基因,其特征在于:所述的乙肝病毒表面抗原基因的核苷酸序列如SEQIDNO.1所示。2.一种乙肝病毒表面抗原的表达载体,其特征在于:含有空载体和权利要求1所述的乙肝病毒表面抗原基因。3.根据权利要求2所述的乙肝病毒表面抗原的表达载体,其特征在于:所述的空载体为含有重组酶识别位点的载体。4.根据权利要求3所述的乙肝病毒表面抗原的表达载体,其特征在于:所述的重组酶识别位点为LoxP位点。5.根据权利要求4所述的乙肝病毒表面抗原的表达载体,其特征在于:所述的空载体的核苷酸序列如SEQIDNO.2所示。6.一种乙肝病毒表面抗原的表达细胞株,其特征在于:含有权利要求1所述的乙肝病毒...

【专利技术属性】
技术研发人员:赵金红李军涛
申请(专利权)人:李军涛
类型:发明
国别省市:广东,44

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