一种制备蜂毒肽的方法技术

本发明专利技术公开了一种蜂毒肽的分离纯化方法，属于生物技术领域。所述蜂毒肽为从蜂毒中提取得来的多肽，采用葡聚糖凝胶色谱、冷冻干燥，结合离心、乙醇沉淀的分离方法，获得蜂毒肽。本发明专利技术的蜂毒肽，得率较高，生产用时短，工艺简单，纯度为电泳纯，保持蜂毒肽原有的结构和最高的生理活性，可应用于医药等领域。

【技术实现步骤摘要】
一种制备蜂毒肽的方法
本专利技术涉及一种制备蜂毒肽的方法，属于生物

技术介绍
蜂毒是工蜂毒腺分泌的一种具有芳香气味的透明液体，主要由多肽类、活性酶类、非肽类物质组成，蛋白质多肽类物质是蜂毒中的主要成分，约占蜂毒的70%-80%。蜂毒肽是由26个氨基酸残基组成的多肽，分子量为2840Da，约占蜂毒干重的50%，其一级结构氨基酸残基序列为NH2-Gly-Ile-Gly-Ala-Val-Leu-Lys-Val-Leu-Thr-Thr-Glu-Leu-Pro-Ala-Leu-Ile-Ser-Trp-Ile-Lys-Arg-Lys-Arg-Glu-Gln-COOH。蜂毒肽具有抗炎、抑菌、抗癌、抗辐射、抑制血小板凝集等作用，可有效地治疗肩周炎、风湿性关节炎、类风湿性关节炎等多种疾病，在医药领域具有一定的应用。蜂毒肽是从蜂毒中分离纯化得来的，具有生物活性高、不污染环境等特点，可以研制开发出机体免疫调节剂等产品，具有很大的市场开发前景，因而引起了学术界广泛的关注。用溶媒萃取、三柱层析、溶媒萃取与三柱层析相结合等方法制备蜂毒肽，其产品制备过程繁琐，生产周期较长，有机溶剂使用量大。Kreil（本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种制备蜂毒肽的方法，步骤如下：①蜂毒的除杂将粗蜂毒加入到pH为4.0‑5.5的缓冲溶液中，使其浓度为0.5‑1.5mg/mL，以2500‑3500r/min离心3‑7min去除不溶性的杂质，得上清液；②蜂毒肽的分离将①中所得上清液过葡聚糖凝胶G‑25柱，用蒸馏水洗脱，流速控制在25‑30mL/h，测定各分离组分的分子量，在葡聚糖凝胶柱下收集分子量为2840Da的层析组分经冷冻干燥得固体样品；③蜂毒肽的纯化将②中冷冻干燥所得的固体用2‑4倍体积的无水乙醇进行溶解，经2500‑3500r/min离心4‑6min，沉淀物质即为蜂毒肽。

【技术特征摘要】
1.一种制备蜂毒肽的方法，步骤如下：①蜂毒的除杂将粗蜂毒加入到pH为4.0-5.5的缓冲溶液中，使其浓度为0.5-1.5mg/mL，以2500-3500r/min离心3-7min去除不溶性的杂质，得上清液；②蜂毒肽的分离将①中所得上清液过葡聚糖凝胶G-25柱，用蒸馏水洗脱，流速控制在25-30mL/h，测定各分离组分的分子量，在葡聚糖凝胶柱下收集分子量为2840Da的层析组分经冷冻干燥得固体样品；③蜂毒肽的纯化将②中冷冻干燥所得的固体用2-4倍体积的无水乙醇进行溶解，经2500-3500r/min离心4-6min，沉淀物质即为蜂毒肽。2.如权利要求1所述的制备蜂毒肽的方法，粗蜂毒是将蜜蜂蛰刺排出的毒液用蒸馏水溶解，经冷冻干燥所得。3.如权利要求1所述的制备蜂毒肽的方法，缓冲液为醋酸-醋酸钠缓冲溶液。4.如权利要求1所述的制备蜂毒肽的方法，除杂为除去不溶于缓冲溶液的物质。5.如权利要求1所述的制备蜂毒肽的方法，葡聚糖凝胶G-25为葡...

【专利技术属性】
技术研发人员：王元秀，孙敏，丁良，
申请(专利权)人：济南大学，
类型：发明
国别省市：山东,37