一种定点固定蛋白A的免疫吸附材料及其制备方法技术

技术编号:16023062 阅读:48 留言:0更新日期:2017-08-19 05:12
摘要:本发明专利技术属于生物分离工程领域,涉及到一种用于血液净化的蛋白A免疫吸附材料及其制备方法。公开了琼脂糖凝胶微球与重组蛋白A偶联的生物高分子分离材料,该材料以琼脂糖凝胶为载体,经烯丙基缩水甘油醚活化后,通过与重组蛋白A氨基端(C端)半胱氨酸上的巯基偶联,最后封端,实现将蛋白A的C端定点固定在琼脂糖凝胶微球上,得到一种蛋白A高吸附性能的免疫吸附材料。该材料的优点是:重组蛋白A在琼脂糖凝胶微球上结构均一、有序固定,使吸附材料对抗体的吸附能力提高,可应用于临床上免疫吸附治疗。

Immune fixing material for fixed-point fixing protein A and preparation method thereof

The invention belongs to the field of biological separation engineering, and relates to a protein A immune adsorption material used for blood purification and a preparation method thereof. Open the agarose gel microsphere and the recombinant A protein coupled biopolymer separation material, the material by agarose gel as the carrier, the allyl glycidyl ether after activation by recombinant protein and A N-terminal (C) cysteine thiol coupling, finally terminated, the A protein C end is fixed on the fixed point agarose gel microspheres, obtained a protein A immunoadsorption material high adsorption properties. The advantage of this material is that recombinant protein A is structurally uniform and orderly immobilized on agarose gel microspheres, so that the adsorption capacity of adsorption materials to antibody is improved, and it can be used in clinical immuno adsorption therapy.

【技术实现步骤摘要】
一种定点固定蛋白A的免疫吸附材料及其制备方法
本专利技术属于医用生物材料,具体的是涉及用于血液净化的蛋白A免疫吸附材料及其制备方法。
技术介绍
即使在医学发达的今日,人类仍有很多难治性疾病无法攻克,难治性自身免疫性疾病就是其中一种。自身免疫性疾病发病机制复杂,可累及全身多器官多系统,传统治疗方案以糖皮质激素和细胞毒药物为主,但治疗效果一直不佳,是目前难以对付的、威胁人类健康与生命的主要疾病之一。免疫吸附疗法是近十多年发展起来的一种新技术,它将对致病抗体具有特定亲和力的物质作为配基与载体结合,从而制备得到吸附柱,选择性地清除患者血液中的致病抗体,从而达到净化血液、缓解病症的目的。目前,免疫吸附疗法在器官移植排斥反应、肾脏病、神经系统疾病、血液病和心血管疾病等方面有着显著疗效,日益受到医学界的广泛关注。蛋白A是某些金黄色葡萄球菌细胞壁上的一种蛋白质,其分子量为约42kD,其氨基末端含有5个高度类似的免疫球蛋白Fc段结合区(EDABC),可与人血浆中的抗体及其免疫吸附物的Fc段特异结合。如果将蛋白A固定在某一载体上制备成载体-SPA复合物免疫吸附柱,当人体血浆通过该吸附柱时,血浆中的抗体及本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于清除抗体的重组蛋白A免疫吸附材料,是将重组蛋白A共价键合于琼脂糖凝胶微球上的高分子材料,它具有如下的化学结构:

【技术特征摘要】
1.一种用于清除抗体的重组蛋白A免疫吸附材料,是将重组蛋白A共价键合于琼脂糖凝胶微球上的高分子材料,它具有如下的化学结构:其中:代表琼脂糖凝胶微球;rSPA代表重组蛋白A;(C)表示重组蛋白A的C端键合在琼脂糖凝胶微球上。2.权利要求1中的免疫吸附材料,其特征在于将重组蛋白A固定在琼脂糖凝胶微球上制备而成,材料吸附抗体量达到60mg/mL以上。3.权利要求1中所述的重组蛋白A用钴离子螯合亲和层析纯化。4.权利要求1中所述的重组蛋白A的基因序列是将蛋白A编码序列(SEQ.ID.NO:1)中B结构域进行串联,形成的5个B结构域的串联体。5.权利要求1中所述的蛋白A在纯化后用巯基乙醇进行处理,防止巯基之间形成二硫键。6.权利要求1中所述的蛋白A的固定量达到20mg/mL以上。7.权利要求1中的重组蛋白A免疫吸...

【专利技术属性】
技术研发人员:罗章凯张文
申请(专利权)人:重庆希尔康血液净化器材研发有限公司
类型:发明
国别省市:重庆,50

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