反义组合物及其制备和使用方法技术

本发明专利技术提供了用于反义寡核苷酸如针对SMAD7的反义寡核苷酸的口服给药的药物制剂。该药物制剂可以用于治疗克罗恩病、溃疡性结肠炎和慢性炎性肠病。

【技术实现步骤摘要】
反义组合物及其制备和使用方法本申请是申请日为2009年11月13日、申请号为200980145188.6、专利技术名称为“反义组合物及其制备和使用方法”的专利技术专利申请的分案申请。相关申请本申请要求2008年11月12日提交的申请EP08425727.8和2009年2月1日提交的U.S.S.N61/152,297的优先权，将其完整引入本文作为参考。背景溃疡性结肠炎和克罗恩病是人体慢性炎性肠病(IBD)的主要形式。肠病是发生在遗传易感性个体中的作为环境因素、微生物因素和肠免疫系统中复杂相互作用结果的不适当的免疫应答。已经证实不适当受到正常反向调节机制控制的对粘膜抗原的过度免疫应答导致慢性肠炎。克罗恩病是胃肠道的慢性复发性炎症疾病，其特征在于节段透壁炎症和肉芽肿改变。典型表现包括不连续牵连胃肠道的不同部分和发生并发症，包括狭窄、脓肿或瘘。因为不了解其原因，所以对克罗恩病的医学处置主要凭借经验并且为减轻炎症而设计。医学疗法包括皮质类固醇、抗生素、免疫抑制药和抗-TNFα药。由于目前疗法的治疗失败和严重的副作用，所以需要可替代选择的疗法。IBD发病机制中的重要作用由TGF-β1发挥，其为能调节免疫和非免疫细胞生长、分化和功能的多功能细胞因子。认为固定对炎症刺激的有效反向调节TGF-β1应答的能力下降与疾病如IBD的发病机制相关。TGF-β1起粘膜炎症有效负调节剂的作用并且抑制其活性导致结肠炎发生，这显示与克罗恩病或溃疡性结肠炎的免疫形态学相似性。在具有IBD的患者的发炎的肠中，存在显著的Smad7(作为TGF-β1受体底物的蛋白质)超表达和Smad3磷酸化减少，即TGF-β1介导的信号传导中的决定性步骤。因此，在IBD中，高水平的Smad7可以导致有缺陷的TGF-β1信号传导，从而导致促炎分子基因超表达且TGF-β1不能发挥其抗炎作用。反义寡脱氧核苷酸药物是短链DNA核苷酸，其通过特异性结合负责驱动导致疾病的蛋白质产生的信使RNA(mRNA)的小压段抑制蛋白质翻译。将反义药物的序列设计成与其mRNA靶互补，使得在杂交时，得到的双链压段被细胞识别为异常的并且被破坏，由此防止信息被翻译成蛋白质产物。然而，典型地通过胃肠外给予反义治疗剂，这可能因全身效应而产生不良反应。这种给药还可能不能集中在需要治疗的部位上。因此，对使用基于片剂的制剂治疗IBD和相关疾病的反义治疗的局部样施用存在需求。概述本说明书至少部分涉及用于针对SMAD7的反义寡核苷酸如反义寡核苷酸的口服给药的药物制剂。在一个实施方案中，提供了用于反义寡核苷酸口服给药的药物片剂，其包含颗粒内相，其中颗粒内相包括反义寡核苷酸，如SEQIDNO1表示的反义寡核苷酸或其药学可接受的盐(如钠盐)和药学可接受的填充剂，且还可以包括颗粒外相，其可以包括药学可接受的赋形剂，如崩解剂。关注的寡核苷酸包括SEQIDNO1表示的那些，其中至少一种或在某些实施方案中全部核苷酸间键合是O,O-连接的硫代磷酸类。本说明书提供了包括公开的反义寡核苷酸和包含肠溶衣的片剂。这种片剂可以包括，例如填充剂、崩解剂和/或润滑剂。例如，本文提供了口服剂型，如片剂，其包含约35mg－约500mg的反义寡核苷酸，例如40mg的SEQIDNO1表示的寡核苷酸或其药学可接受的盐。在一个实施方案中，本文提供了用于口服应用的片剂，包含：约0.5％－约10％重量的SEQIDNO1表示的反义寡核苷酸或其药学可接受的盐；约30％－约50％重量的甘露糖醇；和约10％－约30％重量的微晶纤维素。例如，本说明书提供了用于口服应用的药学可接受的片剂，包含颗粒内相和颗粒外相，其中，例如，颗粒内相包含约5％－约10％重量的(例如约8％重量)的SEQIDNO1表示的反义寡核苷酸或其药学可接受的盐、约40％重量的甘露糖醇、约8％重量的微晶纤维素、约5％重量的羟丙基甲基纤维素和约2％重量的羟基乙酸淀粉钠；和例如，颗粒外相，其包含约17％重量的微晶纤维素、约2％重量的羟基乙酸淀粉钠和约0.4％重量的硬脂酸镁，其中该片剂还可以包含肠溶衣。本文还提供了克罗恩病、溃疡性结肠炎和慢性炎性肠病的治疗方法，包括对有此需要的患者给予本文公开的片剂、口服剂型或药物制剂。例如，在口服对患者给予所述药物制剂、片剂或口服剂型时，该药物制剂、片剂或口服剂型基本上被递送至患者终末回肠和/或右结肠。附图简述图1描述了本文公开为AS1的反义化合物分子结构。图2是AS1制备方法的流程图。图3是描述3.5mgAS1剂量强度的粒度分布的棒形图。图4是描述35mgAS1剂量强度的粒度分布的棒形图。图5是描述250mgAS1剂量强度的粒度分布的棒形图。图6是呈现三种不同剂量强度的AS1在三种不同介质(pH1.0、pH6.6和pH7.2)中的溶出特性(作为片剂溶解百分比)的线性示意图。图7描述了本文所述的批量的溶出特性。详细描述本说明书总地涉及药物组合物，其包括反义寡核苷酸，如图1中所示的。关注的组合物包括针对Smad7起作用且可以口服给药的寡核苷酸。公开的组合物在口服给药时可以将有效量的反义寡核苷酸递送至患者肠系统，例如将有效量的反义寡核苷酸递送至患者终末回肠和/或右结肠。关注的反义寡核苷酸包括包含SEQIDNO:1GTC*GCCCCTTCTCCCC*GCAGC的那些，其中C*表示5-甲基-2'-脱氧胞苷。在一些实施方案中，关注的反义寡核苷酸的至少一种核苷酸间键合是O,O-连接的硫代磷酸类，例如，SEQIDNO:1的20个核苷酸间键合各自可以是O,O-连接的硫代磷酸。在一些实施方案中，本文公开的关注的组合物可以包括SEQIDNO:1的反义寡核苷酸的药学可接受的盐，例如钠盐，其可以任选地包括1－20个O,O-连接的硫代磷酸核苷酸间键合。关注的寡核苷酸盐包括完全中和的那些盐，例如，每个硫代磷酸键与离子如Na+结合。寡核苷酸可以包括天然存在的核碱基、糖类和共价核苷酸间(骨架)键合以及非天然存在的部分。本文称作AS1的典型的反义寡核苷酸如图1所示。在一些实施方案中，本文关注适合于反义寡核苷酸口服递送的组合物，例如片剂，其包括肠溶衣，例如，胃耐受性包衣层，使得该组合物可以将反义化合物递送至例如患者终末回肠和右结肠。例如，这种给药可以产生局部效应，基本上局部将反义化合物直接施用于患者肠的受侵害部分。在一些实施方案中，这种给药基本上可以避免反义化合物不需要的全身吸收。例如，提供用于口服给药的片剂，其包含颗粒(例如，至少部分由颗粒形成的)，其包括公开的反义化合物，例如，AS1，和药学可接受的赋形剂。这种片剂可以被肠溶衣包衣。关注的片剂可以包括药学可接受的赋形剂，如填充剂、粘合剂、崩解剂和/或润滑剂以及着色剂、释放剂、包衣剂、甜味剂、矫味剂如冬青油、橙、木糖醇、山梨醇、果糖和麦芽糖糊精和芳香剂、防腐剂和/或抗氧化剂。在一些实施方案中，关注的药物制剂包括颗粒内相，其包括关注的反义化合物，例如，SEQIDNO.1中所示的，或药学可接受的盐，例如，AS1，和药学可接受的填充剂.例如，可以将AS1和填充剂任选地与其他赋形剂一起掺合并且形成颗粒。在一些实施方案中，可以使用湿法制粒形成颗粒内相，例如将液体(例如，水)加入到掺合的反义化合物和填充剂中，然后干燥、研磨和/或过筛组合，产生颗粒。本领本文档来自技高网...

【技术保护点】
用于反义寡核苷酸口服给药的药物片剂，包含：颗粒内相，其包含SEQ ID NO 1表示的反义寡核苷酸或其药学可接受的盐和药学可接受的填充剂；和颗粒外相，其包含崩解剂。

【技术特征摘要】
2008.11.13 EP 08425727.8;2009.02.13 US 61/152,2971.用于反义寡核苷酸口服给药的药物片剂，包含：颗粒内相，其包含SEQIDNO1表示的反义寡核苷酸或其药学可接受的盐和药学可接受的填充剂；和颗粒外相，其包含崩解剂。2.权利要求1的药物片剂，其中SEQIDNO1的寡核苷酸间键合是O,O-连接的硫代磷酸酯类。3.权利要求1或2的药物制剂，其中反义寡核苷酸是SEQIDNO1的钠盐。4...

【专利技术属性】
技术研发人员：S·巴洛尼，S·贝林维亚，F·维蒂，
申请(专利权)人：诺格拉制药有限公司，
类型：发明
国别省市：爱尔兰,IE