一种牛凝血酶的制备方法和牛凝血酶技术
The method and preparation of bovine thrombin bovine thrombin
The invention discloses a preparation method of bovine thrombin and bovine thrombin, relates to the technical field of protein extraction. Including the invention discloses a preparation method of bovine thrombin: anticoagulant to bovine plasma containing sodium citrate is added in a concentration of 0.8 1.1mol/L BaCl
【技术实现步骤摘要】
一种牛凝血酶的制备方法和牛凝血酶
本专利技术涉及蛋白质提取
，具体而言，涉及一种牛凝血酶的制备方法和牛凝血酶。
技术介绍
凝血酶是一种丝氨酸蛋白酶，也是血液凝血级联反应中的主要效应蛋白酶，显现出促凝和抗凝的特性。凝血酶是由在凝血酶原复合物中的非活性凝血酶原在Xa因子(FXa)因子的作用下通过蛋白裂解的方式产生。当循环凝血因子在暴露的血管外组织与组织因子相接触时，凝血酶会在组织上聚集。凝血酶通过激活血小板，催化纤维蛋白原转化为纤维蛋白，促进血块稳定而在血栓性疾病的引发和传播上有着核心作用。目前，国内外主要以动物血浆例如牛血浆为原料制备凝血酶(牛凝血酶)，也有报道从鲑鱼和鸵鸟血浆中制备凝血酶。其提取的方法主要有等电点沉淀法和氢氧化镁沉淀法。但现有的方法所提取的凝血酶对工艺设备条件要求高、并存在凝血酶的收率低、活性低等问题。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种牛凝血酶的制备方法，该方法以牛血浆为原料，采用柠檬酸钡吸附法提取出牛凝血酶，其具有较高的收率，所提取的牛凝血酶比活高。本专利技术的另一目的在于提供一种牛凝血酶，由上述的制备方法所制得，该牛凝血酶具有纯度和...
【技术保护点】
一种牛凝血酶的制备方法，其特征在于，其包括：往含有柠檬酸钠的抗凝牛血浆中加入BaCl
【技术特征摘要】
1.一种牛凝血酶的制备方法，其特征在于，其包括：往含有柠檬酸钠的抗凝牛血浆中加入BaCl2溶液，离心、收集沉淀；其中，BaCl2溶液浓度为0.8-1.1mol/L，BaCl2溶液与所述抗凝牛血浆的体积比为(5-7)：50。2.根据权利要求1所述牛凝血酶的制备方法，其特征在于，所述制备方法还包括：用EDTA溶液溶解所述沉淀，离心、取上清液，用Tris-HCl缓冲液透析，得到牛凝血酶酶原液，经激活处理后、得到激活后的牛凝血酶粗酶液；所述牛凝血酶粗酶液经浓缩处理后，用DEAE柱层析进行纯化，得到精制的牛凝血酶溶液。3.根据权利要求2所述牛凝血酶的制备方法，其特征在于，所述EDTA溶液浓度为0.18-0.22mol/L，pH为7.8-8.2。4.根据权利要求2所述牛凝血酶的制备方法，其特征在于，所述Tris-HCl缓冲液浓度为0.048-0.052mol/L，pH为7.1-7.3。5.根据权利要求2-4中任一项所述牛凝血酶的制备方法，其特征在于，所述激活处理包括：往所述牛凝血酶酶原液中加入...
【专利技术属性】
技术研发人员：贾芳苗，刘冬，邓飞，
申请(专利权)人：成都远睿生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：四川,51
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