一种冠心舒通胶囊一测多评含量检测方法技术

本发明专利技术提供一种冠心舒通胶囊一测多评含量检测方法，其中色谱条件为：色谱柱以十八烷基键合硅胶柱为填充剂，以甲醇为流动相A相，以0.4％甲酸水溶液为流动相B相；其体积配比为流动相A相：流动相B相为：3-90：97-10，进行线性梯度洗脱；检测波长280nm；柱温35℃，进样量5μL；该含量检测方法可以同时测定冠心疏通胶囊中没食子酸、丹参素钠、原儿茶酸、原儿茶醛、香草醛、迷迭香酸、丹酚酸B、丁香酚、隐丹参酮、丹参酮ⅡA的含量，该检测方法具有简便、准确、高效、重现性、稳定性良好的特点。

Method for testing and evaluating multiple evaluation content of Guanxin relaxing capsule

The invention provides a gxst QAMs method of the content determination, the chromatographic condition: chromatographic column with eighteen alkyl bonded silica as filler, with methanol as the mobile phase to the A phase, with 0.4% formic acid aqueous solution as mobile phase and B phase; the volume ratio of the mobile phase A: mobile phase B phase: 3-90:97-10, linear gradient elution; detection wavelength 280nm; column temperature of 35 DEG C, the injection volume was 5 ~ L; content detection method of the content determination of gallic acid in Guanxin Capsule dredging, sodium Danshensu, protocatechuic acid, protocatechuic aldehyde, vanillin, rosmarinic acid, salvianolic acid B, eugenol, cryptotanshinone, tanshinone A, the detection method is simple, accurate, high repeatability, good stability.

【技术实现步骤摘要】
一种冠心舒通胶囊一测多评含量检测方法
本专利技术涉及属于中成药化学分析检测领域，尤其涉及一种冠心舒通胶囊一测多评含量检测方法。
技术介绍
冠心舒通胶囊是由陕西步长制药有限公司独家生产，现今执行的国家药品标准编号为WS3-155(Z-025)-2005(Z),其在治疗冠心病方面具有突出的疗效，该制剂是以蒙医理论为依据研制而成的一种新药，由广枣、丹参、丁香、冰片、天竺黄等5味药制备而成，具有活血化瘀、通经活络、行气止痛的功能，用于胸痹心血瘀阻导致的冠心病、心绞痛等疾病的治疗。为了保证复方制剂的安全性与有效性，中药复方制剂质量控制的方法与手段成为中药现代化的最重要研究之一。按照传统中医药学的“整体观”，中药药效是药品中多个药效成分的综合效应的结果，而中药制剂的多中心多靶点特点使得单一成分或指标难以表达中药的质量，由王智民等人提出的“一测多评法”，利用中药有效成分内在的函数关系和比例关系，通过只测定一个易得的成分，来实现其他等多个成分的同步测定，该方法已逐渐应用于中成药的质量检测领域。由于冠心舒通胶囊有良好的临床效果且市场销售前景广阔，而目前质量标准中仅对丹酚酸B和丹参酮IIA含量进行控制。为了保证该药品的临床疗效，用多成分含量测定方法可以有效地监控冠心舒通胶囊成分含量，以保证制剂质量，但该方法(外标法)存在对照品消耗量大，对照品种类多，操作复杂繁琐的缺陷，而且部分对照品制备方法复杂，供应短缺，限制了该方法在科研、实际生产和市场监督中的应用。因此，迫切需要一种简便、高效、准确、成本低的质量检测方法能同时定性和定量测定冠心舒通胶囊中多个有效组分。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种冠心舒通胶囊一测多评含量检测方法，该检测方法可以同时测定没食子酸、丹参素钠、原儿茶酸、原儿茶醛、香草醛、迷迭香酸、丹酚酸B、丁香酚、隐丹参酮、丹参酮ⅡA的含量，该方法具有简便、准确、高效、重现性、稳定性良好的特点。本专利技术所述的冠心舒通胶囊，均是指由陕西步长制药有限公司生产，其具体的处方配比组成及制备方法为：是由广枣480g、丹参240g、丁香60g、冰片30g、天竺黄30g制备而成。本专利技术提供的一种冠心舒通胶囊一测多评含量检测方法，所述含量检测方法包括如下的步骤：该方法包括如下的步骤：(a)供试品溶液的制备：称取冠心舒通胶囊内容物，加入料液比(g/ml)为1:15～20倍量甲醇溶剂，进行超声提取时间为20～40min，放置至室温，用甲醇补足损失重量，摇匀，过滤，续滤液即为供试品溶液；(b)对照品标准液的制备：精密称重，没食子酸、丹参素钠、原儿茶酸、原儿茶醛、香草醛、迷迭香酸、丹酚酸B、丁香酚、隐丹参酮、丹参酮ⅡA的对照品适量，加甲醇溶解，配制为混合对照品溶液；(c)色谱条件：色谱柱以十八烷基键合硅胶柱为填充剂，以甲醇为流动相A相，以0.4％甲酸水溶液为流动相B相；其体积配比为流动相A相：流动相B相为：3-90：97-10，进行线性梯度洗脱；检测波长275～285nm，柱温30～40℃，进样量3～10μL；(d)色谱峰测定：将上述步骤(a)所制得的供试品溶液注入高效液相色谱仪，按照上述步骤(c)的色谱条件和步骤(d)质谱条件，测定供试液溶液，得到冠心舒通胶囊中各自特征峰的保留时间，即得。作为本专利技术的优选，所述步骤(a)供试品溶液制备方法中，加入料液比1：20的甲醇溶剂，超声提取时间为30min。作为本专利技术的优选，所述步骤(b)对照品标准液的制备中，所述没食子酸浓度为3.03～18.18μg/mL、丹参素钠浓度为35.6～213.6μg/mL、原儿茶酸浓度为6.96～41.76μg/mL、原儿茶醛浓度为1.16～6.96μg/mL、香草醛浓度为0.86832～5.20992μg/mL迷迭香酸浓度为29.5256～177.1536μg/mL、丹酚酸B浓度为438.4～2630.4μg/mL、丁香酚浓度为133.2～799.2μg/mL、隐丹参酮浓度为8.56～51.36μg/mL、丹参酮ⅡA浓度为46～276μg/mL的混合对照品溶液，即得。作为本专利技术的优选，所述步骤(c)的色谱条件中，所述流动相A相为甲醇，流动相B为0.4％甲酸水溶液，其流动相所采用的线性梯度洗脱条件为：0～15min，流动相A相所占的体积比为：3→28，流动相B相所占的体积比为：97→72；15～17min，流动相A相所占的体积比为：28→36％，流动相B相所占的体积比为：72→64％；17～40min，流动相A相所占的体积比为：36→38，流动相B相所占的体积比为：64→62；40～60min，流动相A相所占的体积比为：38→57％，流动相B相所占的体积比为：62→52％；60～80min，流动相A相所占的体积比为：57→75％，流动相B相所占的体积比为：43→25。80～90min，流动相A相所占的体积比为：75→90，流动相B相所占的体积比为：25→10；90～100min，流动相A相所占的体积比为：90→100％，流动相B相所占的体积比为：10→0％。作为本专利技术的优选，所述步骤(c)的色谱条件中，所述检测波长280nm；柱温35℃，进样量5μL。作为本专利技术的优选，所述步骤(c)色谱条件中色谱柱的型号为Kromasil、Diamonsil或AgilentExtend。作为本专利技术的优选，所述步骤(c)色谱条件中色谱柱的型号优选为AgilentExtend。本专利技术高效液相色谱条件优化①提取溶剂的选择分别考察乙酸乙酯、50％甲醇、无水甲醇、50％乙醇、95％乙醇、无水乙醇、水等不同溶剂作为提取溶剂时的峰面积的个数、峰面积的大小。试验结果表明，以峰面积的个数、峰面积的大小为考察指标，选择最佳提取溶剂为甲醇。②甲醇提取体积倍数的选择分别考察了0.5g-25ml、1g-25ml、1.5g-25ml、0.5g-10ml不同甲醇提取体积倍数。试验结果表明，色谱峰的个数及峰分离情况差距不大，故选择0.5g冠心舒通胶囊内容物于10ml的甲醇中进行提取。③检测波长的选择在前期进行冠心舒通胶囊特征图谱研究时，将冠心疏通胶囊中没食子酸、丹参素钠、原儿茶酸、原儿茶醛、香草醛、迷迭香酸、丹酚酸B、丁香酚、隐丹参酮、丹参酮ⅡA分进行全波长扫描，得到紫外吸收曲线，检测结果见表。表1各指标成分的最佳波长实验结果，发现检测波长≤250nm时，冠心舒通胶囊色谱峰基线不稳定，色谱峰太多，使得主要成分很难分离；260-280nm处色谱峰较多，且干扰较少，基线平坦，能综合全面的反映冠心舒通胶囊内在质量，而且确定的待测成分中，在260-290nm附近有最大吸收；≥290nm时，色谱峰较单一，无法综合全面的反映冠心舒通胶囊制剂的整体情况。因此，结合各成分紫外吸收曲线图及260-290nm处波长―峰面积曲线图，确定“一测多评法”测定冠心舒通胶囊含量的检测波长。④流动相选择分别考察流动相系统为甲醇-0.4％醋酸、甲醇-0.4％甲酸时不同的流动相梯度洗脱条件，以色谱峰数目、色谱峰分离情况、色谱峰峰面积等为考察指标，优选色谱条件。最终确定的色谱条件为：AglientC18(ZORBAXExtend-RPC18，4.6mm×250mm，5μm)色谱柱；流动相：甲醇(A)－0.4％甲酸水溶液(B)为流动相梯度洗脱(见本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种冠心舒通胶囊一测多评含量检测方法，其特征在于，所述含量检测方法包括如下的步骤：(a)供试品溶液的制备：称取冠心舒通胶囊内容物，加入料液比为1:15～25倍量甲醇溶剂，进行超声提取时间为20～40min，放置至室温，用甲醇补足损失重量，摇匀，过滤，续滤液即为供试品溶液；(b)对照品标准液的制备：精密称重，没食子酸、丹参素钠、原儿茶酸、原儿茶醛、香草醛、迷迭香酸、丹酚酸B、丁香酚、隐丹参酮、丹参酮ⅡA的对照品适量，加甲醇溶解，配制为混合对照品溶液；(c)色谱条件：色谱柱以十八烷基键合硅胶柱为填充剂，以甲醇为流动相A相，以0.4％甲酸水溶液为流动相B相；其体积配比为流动相A相：流动相B相为：3‑90：97‑10，进行线性梯度洗脱；检测波长275～285nm，柱温30～40℃，进样量3～10μL；(d)色谱峰测定：将上述步骤(a)所制得的供试品溶液注入高效液相色谱仪，按照上述步骤(c)的色谱条件和步骤(d)质谱条件，测定供试液溶液，得到冠心舒通胶囊中各自特征峰的保留时间，即得。

【技术特征摘要】
1.一种冠心舒通胶囊一测多评含量检测方法，其特征在于，所述含量检测方法包括如下的步骤：(a)供试品溶液的制备：称取冠心舒通胶囊内容物，加入料液比为1:15～25倍量甲醇溶剂，进行超声提取时间为20～40min，放置至室温，用甲醇补足损失重量，摇匀，过滤，续滤液即为供试品溶液；(b)对照品标准液的制备：精密称重，没食子酸、丹参素钠、原儿茶酸、原儿茶醛、香草醛、迷迭香酸、丹酚酸B、丁香酚、隐丹参酮、丹参酮ⅡA的对照品适量，加甲醇溶解，配制为混合对照品溶液；(c)色谱条件：色谱柱以十八烷基键合硅胶柱为填充剂，以甲醇为流动相A相，以0.4％甲酸水溶液为流动相B相；其体积配比为流动相A相：流动相B相为：3-90：97-10，进行线性梯度洗脱；检测波长275～285nm，柱温30～40℃，进样量3～10μL；(d)色谱峰测定：将上述步骤(a)所制得的供试品溶液注入高效液相色谱仪，按照上述步骤(c)的色谱条件和步骤(d)质谱条件，测定供试液溶液，得到冠心舒通胶囊中各自特征峰的保留时间，即得。2.根据权利要求1所述含量检测方法，其特征在于，所述步骤(a)供试品溶液制备方法中，加入料液比1：20的甲醇溶剂，超声提取时间为30min。3.根据权利要求1所述的含量检测方法，其特征在于，所述步骤(b)对照品标准液的制备中，所述没食子酸浓度为3.03～18.18μg/mL、丹参素钠浓度为35.6～213.6μg/mL、原儿茶酸浓度为6.96～41.76μg/mL、原儿茶醛浓度为1.16～6.96μg/mL、香草醛浓度为0.86832～5.20992μg/mL迷迭香酸浓度为29.5256～177.1536μg/mL...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘峰，李晔，杨东花，王春柳，龙凯花，黄壮壮，张红，
申请(专利权)人：陕西步长制药有限公司，
类型：发明
国别省市：陕西,61