同步检测2种瓜类检疫性病害的RT‑PCR检测引物组、试剂盒及其应用制造技术

本发明专利技术属于瓜类检疫性病害检测技术领域，尤其涉及一种同步快速检测黄瓜绿斑驳花叶病毒(CGMMV)和瓜类细菌性果斑病病菌(Aac)2种侵染瓜类的检疫性病害的RT‑PCR检测引物组、试剂盒及其应用。本发明专利技术专门针对黄瓜绿斑驳花叶病毒病、瓜类细菌性果斑病2种检疫性病害设计特异性引物CGMMV‑F/CGMMV‑R、BFB‑F/BFB‑R，并结合RT‑PCR检测技术，实现了对2种病害的同步检测、鉴定。本发明专利技术可同步快速检测黄瓜绿斑驳花叶病毒、瓜类细菌性果斑病菌，该方法保证了检测的灵敏性和特异性，同时减少检测成本、节约时间，是一种特异、灵敏、方便且经济有效的检测方法。

2 kinds of melon quarantine disease RT PCR detection primer set, kit and application of synchronous detection

The invention belongs to the technical field of melons quarantine disease detection, in particular to a simultaneous rapid detection of Cucumber green mottle mosaic virus (CGMMV) and melon bacterial fruit blotch pathogen (Aac) disease quarantine of 2 kinds of infection melon RT PCR detection kit and primer set, should be used. The invention specifically for Cucumber green mottle mosaic virus disease, bacterial blotch of cucurbits 2 quarantine disease specific primers were designed for CGMMV F/CGMMV R, BFB F/BFB R, and RT PCR detection technology, realizes the synchronous detection, identification of 2 diseases. The invention can simultaneous rapid detection of Cucumber green mottle mosaic virus, bacterial fruit blotch, this method ensures the detection sensitivity and specificity, and reduce the detection cost and save time, is a specific, sensitive, convenient and economical and effective detection method.

【技术实现步骤摘要】
同步检测2种瓜类检疫性病害的RT-PCR检测引物组、试剂盒及其应用
本专利技术属于瓜类检疫性病害检测
，尤其涉及一种同步快速检测黄瓜绿斑驳花叶病毒(CGMMV)和瓜类细菌性果斑病病菌(Aac)2种侵染瓜类的检疫性病害的方法。
技术介绍
黄瓜绿斑驳花叶病是一种毁灭性病害，2006年被确定为全国农业植物检疫性有害生物，其病原为黄瓜绿斑驳花叶病毒(Cucumbergreenmottlemosaicvirus，CGMMV)，是一种短杆状病毒，基因组为正单链RNA，全长为6.4Kb，属于芜菁花叶病毒科(Tymoviridae)烟草花叶病毒属(Tobamovirus)成员。该病毒主要为害葫芦科作物，严重威胁西瓜、甜瓜、葫芦等的生产，主要借助种子进行远距离传播，亦可通过摩擦接触、土壤病残体、嫁接和授粉等方式传播。该病害在西瓜上的发生最早于1968年在日本关东地区，造成西瓜产业9亿日元的损失；1978年印度德里地区的甜瓜侵染率高达70-80％；我国，2003年在广西南宁的观赏南瓜上发现该病害，2005年报道其病原为CGMMV；2005年在辽宁盖州地区的西瓜上也发现该病害；至今，我国大部分地区均本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种同步检测2种瓜类检疫性病害的RT‑PCR检测引物组，其特征在于：包括特异引物对CGMMV‑F和CGMMV‑R、引物对BFB‑F和BFB‑R，其分别具有SEQ ID No.1至SEQ ID No.4所示的序列。

【技术特征摘要】
1.一种同步检测2种瓜类检疫性病害的RT-PCR检测引物组，其特征在于：包括特异引物对CGMMV-F和CGMMV-R、引物对BFB-F和BFB-R，其分别具有SEQIDNo.1至SEQIDNo.4所示的序列。2.一种同步检测2种瓜类检疫性病害的RT-PCR检测试剂盒，其特征在于：反应体系的总体积15uL，其中2×mixBuffer7.5uL，引物CGMMV-F/R各0.5uL、BFB-F/R各0.2uL，反转录产物1uL及ddH2O5.1uL。3.根据权利要求2所述的同步检测2种瓜类检疫性病害的RT-PCR检测试...

【专利技术属性】
技术研发人员：谢慧婷，李战彪，秦碧霞，崔丽贤，杨世安，伍豪，蔡健和，
申请(专利权)人：广西壮族自治区农业科学院植物保护研究所，
类型：发明
国别省市：广西,45