利用受限空间中超分子水凝胶冻存雪旺细胞的方法技术

本发明专利技术公开了一种利用受限空间中超分子水凝胶冻存雪旺细胞的方法。将已贴壁的雪旺细胞经消化，离心，加入溶有凝胶因子的细胞全培养基并吹散，得到含有凝胶因子的雪旺细胞悬浮液；将所得细胞悬浮液和冻存保护剂导入微通道中；将微通道置于3～5℃冰水浴中，平衡4～5min；最后将微通道直接置于程序降温盒，并放入‑82～‑78℃冰箱。由于超分子水凝胶在受限空间中形成的交联网络结构较非受限空间更加紧密，因此在微通道中的超分子水凝胶比微通道外的超分子水凝胶对细胞的冷冻保护更好。与传统软刻蚀法得到的微通道装置相比，利用玻璃毛细管得到的微流控装置成本更低，制作更为简单，且可冻存体积更大。

Method for cryopreservation of Schwann cells by using ultra molecular hydrogel in confined space

The invention discloses a method for cryopreservation of Schwann cells by using ultra molecular hydrogel in a confined space. The adherent Schwann cells after digestion, centrifugation, adding dissolved gel cell culture medium and get full blown, Schwann cell suspension containing gel factor; the cell suspension and cryoprotectants into the micro channel in the micro channel; at 3 to 5 DEG C ice water bath, balance 4 5min; finally, the micro channel cooling box placed directly in the program, and in 82 ~ 78 DEG C refrigerator. Because of the formation of supramolecular hydrogel cross-linked network structure in the confined space than non confined space more closely, so the supramolecular hydrogel in micro channel than the micro channel outside the supramolecular hydrogel on cell cryopreservation better. Compared with the microchannel device obtained by the conventional soft etching method, the microfluidic device using glass capillary tube has the advantages of lower cost, simpler fabrication, and larger frozen volume.

【技术实现步骤摘要】
利用受限空间中超分子水凝胶冻存雪旺细胞的方法
本专利技术属于细胞低温冻存
，具体涉及一种雪旺细胞的低温冻存方法。
技术介绍
近年来，随着活体细胞和组织在医学，生物学，药学等多个领域的广泛应用，对活体细胞和组织的需求也日益增长，而离体的细胞和组织在常温下难以实现长期保存和长途运输，且细胞的体外培养本身过于耗时耗材。因此，低温冻存作为目前最常用的对活体细胞和组织的保存技术，逐渐成为近年来的研究热点。在传统的低温冻存过程中，随着温度的下降，细胞的生理活动被迫停止，而当温度恢复至生理温度，细胞复苏，细胞又可恢复活性，发挥其生理功能。然而现有的冻存方法会对细胞造成一定程度的冰晶损伤，以及由于冻存保护剂的加入和难以去除带来的毒性伤害，体积变化损伤和渗透损伤。目前将凝胶应用于低温冻存的研究报道中，多为利用水凝胶包埋活细胞的方法来减少低温损伤。Hang等研究了利用海藻酸-多聚赖氨酸-海藻酸微胶囊做微囊化肝细胞冻存相对于直接对肝细胞冻存的影响，复苏后的检测结果表明，微囊化冻存组相对直接冻存组，生存能力更强，附件效率也更高。HaishuiHuang等发现海藻酸盐水凝胶微囊化的细胞可以在冻存后的复苏本文档来自技高网...

【技术保护点】
利用受限空间中超分子水凝胶冻存雪旺细胞的方法，其特征在于包括以下步骤：将已贴壁的雪旺细胞经消化，离心，加入溶有凝胶因子的细胞全培养基并吹散，得到含有凝胶因子的雪旺细胞悬浮液；将所得细胞悬浮液和冻存保护剂导入微通道中；将微通道置于3～5℃冰水浴中，平衡4～5min；最后将微通道直接置于程序降温盒，并放入‑82～‑78℃冰箱。

【技术特征摘要】
1.利用受限空间中超分子水凝胶冻存雪旺细胞的方法，其特征在于包括以下步骤：将已贴壁的雪旺细胞经消化，离心，加入溶有凝胶因子的细胞全培养基并吹散，得到含有凝胶因子的雪旺细胞悬浮液；将所得细胞悬浮液和冻存保护剂导入微通道中；将微通道置于3～5℃冰水浴中，平衡4～5min；最后将微通道直接置于程序降温盒，并放入-82～-78℃冰箱。2.如权利要求1所述利用受限空间中超分子水凝胶冻存雪旺细胞的方法，其特征在于所述的凝胶因子为低分子量的氨基酸类凝胶因子；其浓度为0.75g/L，相转变温度为6-7℃。3.如权利要求1所述利用受限空间中超分子水凝胶冻存雪旺细胞的方法，其特征在于所述的细胞全培养基为含有10vol％胎牛血清和1vol％双抗的RPMI1640全培养基。4.如权利要求1所述利用受限空间中超分子水凝胶冻存雪旺细胞的方法，其特征在于所...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈万煜，李鹏程，
申请(专利权)人：武汉理工大学，
类型：发明
国别省市：湖北,42