一种肝素钠的高效提取工艺制造技术

本发明专利技术涉及一种肝素钠的高效提取工艺，原料为小肠粘膜，经过酶解、澄清剂的制备、吸附、静置分离、沉淀干燥，制得肝素钠。本发明专利技术采用了新的吸附杂质方法，以硬脂酸单甘油酯和棕榈酸混合作为澄清剂使用，具有十分理想的效果。本发明专利技术具有收率高、废液少、对环境污染小、废液容易处理等优点，适合工业化生产，具有社会和经济效益。

【技术实现步骤摘要】
一种肝素钠的高效提取工艺
本专利技术涉及一种肝素钠的高效提取工艺，属于肝素钠的生产

技术介绍
肝素钠是目前世界上最有效和临床用量最大的抗凝血药物，主要应用于心脑血管疾病和血液透析治疗，其中在血液透析治疗中是唯一有效的特效药物。临床应用及研究显示，肝素钠除具有抗凝血作用外，还具有其他多种生物活性和临床用途，包括降血脂作用、抗中膜平滑肌细胞(SMC)增生、促进纤维蛋白溶解等作用。此外，低分子肝素是由肝素原料药作为原料进一步加工成的一大类抗血栓的药物，具有更为广泛的临床医学用途，成为治疗急性静脉血栓和急性冠脉综合症(心绞痛、心肌梗塞)等疾病的首选药物。肝素是世界上迄今已知的分子结构最复杂的化合物，短期内无法通过人工化学合成，目前只有来源于猪小肠粘膜的肝素钠能够用于临床治疗。肝素原料药的原料是肝素粗品，其提取只能源自健康生猪的小肠粘膜，由于含有大量杂质蛋白、杂质核酸以及杂质微生物等，需经过物理和化学提取分离过程，定向获取天然结构基团完整的肝素，从而制成肝素钠原料药。CN101805764A的专利技术说明传统生产肝素钠的方法一般有两种：盐解法提取、酶解法提取和酶解加盐解法提取。盐解法提取的缺点为：分解不完全，残留量比较大。酶解法的缺点为：分解后的杂质比较多，纯度低，许多杂质也会与树脂结合，造成树脂无效反应，同时还增加用量，降低树脂使用寿命。
技术实现思路
本专利技术针对现有技术存在的不足，提供一种工艺简单、收率高的新方法，该方法有利于工业化生产。一种肝素钠的高效提取工艺，其特征在于，包括以下步骤：(1)酶解取小肠粘膜作为原料，加入碱性蛋白酶，调节pH至9.0-9.5，温度50-60℃，进行酶解；然后，加入盐酸溶液调节pH至5.5-6.0，升温到70-75℃，得到小肠浆液；(2)澄清剂的制备将重量比为3:7-7:3的硬脂酸单甘油酯和棕榈酸混合，升温到70-75℃熔融并搅拌均匀，得到澄清剂备用；(3)吸附将熔融澄清剂加入小肠浆液中，进行保温搅拌；(4)静置分离将步骤(3)得到的料液静置，一段时间后出现明显分层；上层为澄清剂吸附杂质后形成的半固体状物，下层为澄清淡黄色溶液，抽取下层溶液，过滤，调节滤液温度至55-65℃，按每1000L料液加入20kg氯化钠充分溶解，加入树脂，吸附完成后，抽干树脂；用60-65℃水冲洗两次，再加60-65℃3mol/L氯化钠溶液搅拌洗脱2-3次；其中，20kg氯化钠的加入是抑制后面加入的树脂吸附杂质；(5)沉淀干燥加入乙醇进行沉淀，脱水干燥，即得粗品肝素钠。本工艺的有益效果是，利用硬脂酸单甘油酯和棕榈酸作为澄清剂使用，这种方法是以前从未使用过的，这种澄清剂能很大程度的吸附小肠粘膜中的油脂、蛋白质等杂质，有效分离开肝素钠与蛋白杂质，比单纯的使用硬脂酸单甘油酯或棕榈酸的效果更好。澄清剂的加入能得到澄清的淡黄色透明溶液，相比于传统工艺中直接在小肠粘膜料浆中加入树脂进行吸附。进一步，在经步骤(4)处理后，向料液中反复加纯净水超滤3-5次，再加入双氧水氧化，然后进行步骤(5)，可得精品肝素钠。进一步，在步骤(1)中，酶解的时间为3-4h。进一步，在步骤(3)中，小肠酶解液和澄清剂的比例为1000L：10-15kg。进一步，在步骤(3)中，搅拌速度为40-60r/min，搅拌时间为0.5-1h。进一步，在步骤(3)中，搅拌速度为50r/min，搅拌时间为1h。进一步，在步骤(3)中，通过向滤液中加入水调节滤液温度。进一步，加入乙醇的浓度为不低于88％，体积大于洗脱液体积的0.9倍。进一步，双氧水的浓度为27-30％，体积为总体积的1.0-2.0％。综上，本专利技术可以大大减少树脂的使用和污染，具有收率高、废液少、对环境污染小、废液容易处理等优点，适合工业化生产，具有社会和经济效益。具体实施方式以下对本专利技术的原理和特征进行描述，所举实例只用于解释本专利技术，并非用于限定本专利技术的范围。实施例1一种肝素钠的高效提取工艺，其特征在于，包括以下步骤：(1)酶解取小肠粘膜作为原料，加入碱性蛋白酶，调节pH至9.0，温度50℃，酶解4h；然后，加入盐酸溶液调节pH至6.0，升温到70℃，得到小肠浆液；(2)澄清剂的制备将重量比为3:7的硬脂酸单甘油酯和棕榈酸混合，升温到70℃熔融并搅拌均匀，得到澄清剂备用；(3)吸附按照小肠酶解液和澄清剂的比例为1000L：10kg的比例混合，保温搅拌；搅拌速度为40r/min，搅拌时间为1h。(4)静置分离将步骤(3)得到的料液静置，一段时间后出现明显分层；上层为澄清剂吸附杂质后形成的半固体状物，下层为澄清淡黄色溶液，抽取下层溶液，过滤，加入水调节滤液温度至55℃，按每1000L料液加入20kg氯化钠充分溶解，加入树脂，吸附完成后，抽干树脂；用60℃水冲洗两次，再加60℃3mol/L氯化钠溶液搅拌洗脱2-3次；其中，20kg氯化钠的加入是抑制后面加入的树脂吸附杂质；(5)氧化向料液中反复加纯净水超滤3-5次，再加入浓度为27％，体积为总体积的2.0％的双氧水氧化；(6)沉淀干燥向氧化后的料液中加入浓度为88％，体积为洗脱液体积的0.97倍的乙醇进行沉淀，脱水干燥，即得肝素钠。实施例2一种肝素钠的高效提取工艺，其特征在于，包括以下步骤：(1)酶解取小肠粘膜作为原料，加入碱性蛋白酶，调节pH至9.5，温度60℃，酶解3h；然后，加入盐酸溶液调节pH至5.5，升温到75℃，得到小肠浆液；(2)澄清剂的制备将重量比为7:3的硬脂酸单甘油酯和棕榈酸混合，升温到75℃熔融并搅拌均匀，得到澄清剂备用；(3)吸附按照小肠酶解液和澄清剂的比例为1000L：15kg的比例混合，保温搅拌；搅拌速度为60r/min，搅拌时间为0.5h。(4)静置分离将步骤(3)得到的料液静置，一段时间后出现明显分层；上层为澄清剂吸附杂质后形成的半固体状物，下层为澄清淡黄色溶液，抽取下层溶液，过滤，加入水调节滤液温度至65℃，按每1000L料液加入20kg氯化钠充分溶解，加入树脂，吸附完成后，抽干树脂；用65℃水冲洗两次，再加65℃3mol/L氯化钠溶液搅拌洗脱2-3次；其中，20kg氯化钠的加入是抑制后面加入的树脂吸附杂质；(5)氧化向料液中反复加纯净水超滤3-5次，再加入浓度为30％，体积为总体积的1.0％的双氧水氧化；(6)沉淀干燥向氧化后的料液中加入浓度为95％，体积为洗脱液体积的0.9倍的乙醇进行沉淀，脱水干燥，即得肝素钠。以上两个实施例，每根小肠使用树脂的量由传统的20g减少到5g。此外，肝素钠效价均达160usp/mg以上。以上所述仅为本专利技术的较佳实施例，并不用以限制本专利技术，凡在本专利技术的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本专利技术的保护范围之内。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种肝素钠的高效提取工艺，其特征在于，包括以下步骤：(1)酶解取小肠粘膜作为原料，加入碱性蛋白酶，调节pH至9.0‑9.5，温度50‑60℃，进行酶解；然后，加入盐酸溶液调节pH至5.5‑6.0，升温到70‑75℃，得到小肠浆液；(2)澄清剂的制备将重量比为3:7‑7:3的硬脂酸单甘油酯和棕榈酸混合，升温到70‑75℃熔融并搅拌均匀，得到澄清剂备用；(3)吸附将熔融澄清剂加入小肠浆液中，进行保温搅拌；(4)静置分离将步骤(3)得到的料液静置，一段时间后出现明显分层；下层为澄清淡黄色溶液，抽取下层溶液，过滤，调节滤液温度至55‑65℃，按每1000L料液加入20kg氯化钠充分溶解，加入树脂，吸附完成后，抽干树脂；用60‑65℃水冲洗两次，再加60‑65℃3mol/L氯化钠溶液搅拌洗脱2‑3次；(5)沉淀干燥加入乙醇进行沉淀，脱水干燥，即得粗品肝素钠。

【技术特征摘要】
1.一种肝素钠的高效提取工艺，其特征在于，包括以下步骤：(1)酶解取小肠粘膜作为原料，加入碱性蛋白酶，调节pH至9.0-9.5，温度50-60℃，进行酶解；然后，加入盐酸溶液调节pH至5.5-6.0，升温到70-75℃，得到小肠浆液；(2)澄清剂的制备将重量比为3:7-7:3的硬脂酸单甘油酯和棕榈酸混合，升温到70-75℃熔融并搅拌均匀，得到澄清剂备用；(3)吸附将熔融澄清剂加入小肠浆液中，进行保温搅拌；(4)静置分离将步骤(3)得到的料液静置，一段时间后出现明显分层；下层为澄清淡黄色溶液，抽取下层溶液，过滤，调节滤液温度至55-65℃，按每1000L料液加入20kg氯化钠充分溶解，加入树脂，吸附完成后，抽干树脂；用60-65℃水冲洗两次，再加60-65℃3mol/L氯化钠溶液搅拌洗脱2-3次；(5)沉淀干燥加入乙醇进行沉淀，脱水干燥，即得粗品肝素钠。2.根据权利要求1所述的肝素钠的高效提取工艺，其特征在于，在经步骤(4)处理后，向料液中反复加纯净水超滤3-...

【专利技术属性】
技术研发人员：张百超，林正远，
申请(专利权)人：张国志，
类型：发明
国别省市：山东,37