不溶于水的交联聚碳酸组合物制造技术

一种含有不溶于水的交联多羟基聚羧酸物质，该物质是通过下式聚合物 ＊＊＊ 其中Ｒ是氢或１－４个碳原子的低级亚烷基或低级烷氧基，或苯基， ｑ是７－１００００的整数， 与下式α、Ω二氨基羟基烷烃交联： Ｈ↓［２］Ｎ．［（Ｈ）↓［ｐ］（ＣＨ）↓［２．］（ＯＨ）↓［ｍ］］．ＮＨ↓［２］ 其中ｚ是１－４的整数。 ｐ是０或最大为ｚ－１的整数， ｍ是１或最大为ｚ的整数， 并水解未反应的酸酐基团而制得的，其中二氨基羟基烷初始量与聚（亚烷基马来酸酐）初始量的比例介于约１∶１至约２００∶１ｍｏｌ／ｍｏｌ。（*该技术在2014年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

技术介绍
专利
本专利技术涉及用沉淀法从水介质中除去蛋白质。现有技术传统方法是使用试剂或通过加热从水介质中除去蛋白质的。某些溶剂(氯仿，尿素)使蛋白质变性并使其沉淀。类似地，通过加入盐将介质中电解质的量提高到较高的程度也能沉淀蛋白质。此外，加热不仅使蛋白质变性而且还通常使蛋白质凝结，从而将其从水介质中分离出来。这些去除蛋白质的方法主要有三个缺点。首先，从介质中除去的物质不是纯的蛋白质。而当介质中含有复杂的化学类混合物，如当介质是细胞溶胞产物时，用这些方法除了去除蛋白质外还会去除其他物质。第二，用这些方法去除的蛋白质一般都是不可逆变性或只在诸如渗析的耗时操作中才具有可变性。第三，无论是蛋白质的分离或是纯化，传统方法都包括使用有毒溶剂(苯酚和/或氯仿)。US.P.4421653中描述的聚合物材料试图解决这些问题。该材料是与二胺交联的聚乙烯马来酸酐衍生物，但是，为了将一体积的血清脱蛋白需要多达9体积的溶液。这种“脱蛋白剂”的大幅度过量使用表明其效率低下、过于昂贵、不适于工业生产。此外，此基料在碱范围内(即pH10)沉淀蛋白质，使所要的蛋白质在温和碱条件下非常难以从基料中解析出来。专利技术概述本专利技术提供了一组不溶于水的交联多羟基聚羧酸组合物，它通过式(I)聚合物 其中R是氢或1-4个碳原子的低级亚烷基或低级烷氧基，或苯基，q是7-10000的整数，与式(II)的α，Ω二氨基羟基烷烃交联H2N..NH2(11)其中z是1-4的整数，p是0或最大为z-1的整数，m是1或最大为z的整数，并水解未反应的酸酐基团而获得，其中，二氨基羟基烷的初始量与聚(亚烷基马来酸酐)的初始量的比例介于约1∶1和约200∶1mol/mol之间。这些交联的多羟基聚羧酸组合物有至少两个链节，每个链节的链节构型如下式 其中每个链节中的至少一个链节内马来酰部分的一个羰基基团与式(IV)部分共价相连，-HN..NH-部分(IV)使其中存在有至少一个式(V)的链节内交联部分 其中R是氢或1-4个碳原子的低级亚烷基或低级烷氧基，或苯基，z是1-4的整数，p是0或最大为z-1的整数，m是1或最大为z的整数，其中交联与聚(亚烷基碳酸)链节的比例介于约1∶2和约200∶2之间。在式I聚合物与式II羟基二胺的反应产物中还存在有相应的、假定为式VI的“聚马来酯” 其中y是最大为m的整数，其他的值如上所述。本文公开的制备交联多羟基聚羧酸组合物的方法是，使式I的聚合物与式II的α、Ω二氨基羟基烷交联，并且用酸水解未反应的酸酐基团，得到式V和Ⅵ化合物的混合物。用强碱作温和的处理，在室温下适当地稀释碱水几个小时，优选至少过夜，这样可以很容易地将该式(VI)的聚马来酯水解回原来的多元醇(V)。混合物的碱水解作用产生基本上纯的式V。这两种交联多羟基聚羧酸组合物都提供了从含蛋白的水介质中沉淀蛋白质的方法，该方法包括向其中添加有效量的这种交联多羟基聚羧酸组合物，得到蛋白质/多羟基聚羧酸组合物基料。但是式V的化合物基本上比含有相应酯的混合物更有效。最好是，多羟基聚羧酸组合物的使用量(以重量计)至少等于含蛋白水介质中蛋白质的预计含量。此外，优选在水介质中使用多羟基聚羧酸组合物。已经发现在这个沉淀步骤中蛋白质和多羟基聚羧酸组合物在它们各自水介质中的重量浓度介于约3∶1至约1∶3之间时很有利，当蛋白质和交联多羟基聚羧酸组合物在它们各自水介质中的重量浓度基本相等时最合适。实际的沉淀操作多少依赖于pH值，但依赖的范围相当广。当R是氢时，含有交联多羟基聚羧酸组合物介质的pH值优选介于约3至约6.2之间，这样组分混合后得到的介质的pH值不超过约6.5。同样，当R是苯基时，含有交联多羟基聚羧酸组合物介质的pH值优选介于约5.5至约7.5，以使组分混合后得到的介质的pH值不超过约7.5。发生沉淀反应后最好将反应混合物离心，以从中回收粒状的基料。通过用pH值为约8.6-约9.5的缓冲液处理所述的基料，可以将蛋白质从基料中分离出来而不使所述的蛋白质变性。对每体积粒状基料来说，缓冲液的适宜使用量为约1-约5体积，pH值约8.6-约9.5。虽然本专利技术并不限于此，但当缓冲液是三羟甲基氨基甲烷缓冲液时已获得优异的效果。这个方法还特别实用于从含有蛋白和核酸的液体中分离核酸。这时，核酸或其混合物的来源经常是一种悬浮在硫氰酸弧盐水溶液中的细胞溶胞产物。另一种从待回收的基料中回收交联多羟基聚羧酸组合物的方法是可以通过十二烷基硫酸钠水溶液处理基料，然后最好将反应混合物离心，并且从剩余的颗粒中或者以剩余颗粒的形式回收交联多羟基聚羧酸组合物。在这个方法中，蛋白质发生变性，对每体积基料剩余颗粒使用约1-约3体积浓度约0.5-约2％w/w的十二烷基硫酸钠。此后，最好包括进一步的洗涤步骤，洗涤已回收的多羟基聚羧酸残渣并将其再悬浮于缓冲液中，当R＝苯基，适宜使用pH值为7.1-7.5的磷酸缓冲盐水。或者，当R＝H时，使用pH值为4-4.5的乙酸缓冲液。优选实施方案的说明交联多羟基聚羧酸组合物本专利技术包括由式I聚合物和式IIα、Ω二氨基羟基烷交联所得物质的组合物 H2N..NH2(II)式I括号中所示的原子符号代表聚合物的重复单元，q代表与二氨基羟基烷交联之前聚合物中该单元的数目。q代表的单元数可以在7到10000之间变化。R是氢或1-4碳原子的低级亚烷基或低级烷氧基，或苯基。式I中符号R优选为氢。这时，其中q为120-约250的聚合物可以从美国密苏里州圣路易斯的Monsanto Chemical Co.得到。其名称为乙烯马来酸酐共聚物(EMA)。R为甲氧基的式I聚合物也是优选的。这时，其中q为约100-约600的聚合物可以名为Gantrez An从新泽西州韦恩的GAF Corp.化学部得到。另外R为次甲基、乙烯基、甲氧基或乙氧基的式I聚合物也是优选的。在式II中，z是1-4的整数，p是0或最大为z-1的整数，m是1或最大为z的整数。应当理解，式II中每一个(CH)基团要么有一个要么没有羟基基团与其相连。交联链上的整个交联部分至少具有一个羟基，并且可以最多达到每个(CH)基团上有一个羟基，即在两个酰胺基团之间最多有z个羟基。诸如式II的α、Ω二氨基羟基烷是可商购的，如1，3-二氨基-2-羟基-丙烷(威斯康星州密尔沃基市的Aldrich Chemical Co.)。任何存留在不溶于水的交联多羟基聚羧酸中的酸酐基团均被水解。在不溶于水的交联多羟基聚羧酸组合物中，二氨基羟基烷初始投料量与聚(亚烷基马来酸酐)初始投料量的比介于约1∶1和约200∶1 mol/mol之间。在另一个实施方案中，不溶于水的交联多羟基聚羧酸有至少两个链节，每个链节的构型如式III 其中，在每个链节中，至少一个马来酰部分的一个羰基基团共价联接至式IV的α、Ω二氨基羟基烷基上-HN..NH-部分 (IV)这使得其中存在有至少一个式V的交联部分 符号R、p、z和m的值分别与上述式I和II中的相同。式V中对聚(亚烷基碳酸)链节的交联率介于约1∶2至约200∶2之间(从1∶2至200∶2)。制备交联多羟基聚羧酸组合物的方法在本专利技术的另一个实施方案中，制备不溶于水的交联多羟基聚羧酸组合物的方法包括使式I的聚合物与式II的α、Ω二氨基羟基烷交联，并且水解未反应的酸酐基本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：J·库卢佩，
申请(专利权)人：力戈化学公司，
类型：发明
国别省市：