高纯度黄芪多糖、黄芪皂甙的提取方法技术

本发明专利技术属于一种高纯度黄芪多糖、黄芪皂甙的生产方法，其步骤是将黄芪粉碎至颗粒状，称量后，加入６倍量的混合溶剂，混合溶剂为乙醇、水和正丁醇，乙醇∶水∶正丁醇＝４∶３∶３；将蒸气通入罐内，加热，使药液沸腾，回流提取，过滤，得提取液Ａ；再将过滤后的药渣按重量比加入６倍量的蒸馏水，蒸气加热提取，过滤，得提取液Ｂ；合并提取液Ａ、Ｂ于储液罐中；然后将混合后的Ａ、Ｂ提取液，采用超滤－柱层析－溶剂重结晶两重纯化；超滤－醇沉－溶剂洗涤两重纯化方法，分别获得高纯度黄芪皂甙和黄芪多糖两种产品。产品外观较佳，工业生产中黄芪多糖及黄芪皂甙提取率分别达到９４．５％和９２．３％，比现有文献报道黄芪多糖及黄芪皂甙的水提法和醇提法提取率都要高。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于高纯度黄芪多糖、黄芪皂甙的生产方法。
技术介绍
近年来有不少关于水煮醇沉提取黄芪多糖工艺改进与优化的研究报道如中医药学报.2201.029(006).35-36登载石河子大学药学院运用微波技术用水煮醇沉提取黄芪多糖法提取黄芪多糖，可使反应时间缩短约12倍，多糖含量达到6.55％；西北大学的李红民等在西北大学学报自然科学版.2000.030(006).-509-510记载的研究表明，采用碱水溶液提取法可使多糖收率明显提高，分别为11.7％和5.7％；中医药杂志.1998.023(005).-284-286介绍了山西中医药研究院的倪艳等人设计了正交实验，对黄芪多糖水煮提取工艺的优化研究表明，黄芪粗多糖的得率，对于不同提取次数有明显的差异，最佳工艺的多糖得率为2.0％，总多糖含量为37.5％(低温干燥)；中国中医研究院的李树珍等在中草药.195.026(008).-408-410对黄芪不同提取工艺所得粗多糖的糖含量作了比较，其中利用超滤法所得的多糖粗提物，较水煮醇沉法含糖量高出20％，但粗多糖得率较低；兰州医学院的封士兰等在中成药1997.12.25；19(12)5-6也对黄芪多糖的提取工艺进行正交实验研究，以黄芪多糖含量为评价标准，兼顾水分、灰分、及水中不溶物指标，结果发现，黄芪多糖含量与工艺流程中的乙醇浓度、药液浓度及干燥方法有关，确定药液比重为1.05时用80％的乙醇沉淀、喷雾干燥为最佳工艺。关于高纯度黄芪皂甙及多糖提取工艺的研究有中国专利申请号001009690.7；公开号133082；公开日2002.01.09；主分类号C08B37/00公开了中国农大专利技术的黄芪多糖和黄芪皂甙的提取分离方法，该专利技术采用了过树脂柱工艺或采用超滤、过树脂柱工艺，加上合并提取分离过程中同类成分等手段，最大限度地将黄芪中的多糖和皂甙分离出来，并可同时得到纯度较高的多糖和皂甙精粉；中国专利公开了申请号02155002.6；公开号1425674；公开日2003.06.25；主分类号C07H17/07上海博泰医药科技公司申请的专利技术专利——黄芪总皂甙的制备方法。该方法是以黄芪为原料，经水热回流提取2次以上，提取液过滤后上孔吸附树脂柱，进行脱糖、脱水处理，再分离纯化得黄芪总皂甙混合物；首都师范大学开发的高纯度黄芪多糖加工技术，采用膜透析等分离手段，产品纯度达70-80％项目年度编号0100280040。
技术实现思路
黄芪中主要含有多糖、皂甙、黄酮、蛋白质、纤维素和微量元素等。天然黄芪中多糖含量约为20％左右，黄芪皂甙含量较低，约为2％左右。目前黄芪多糖及黄芪皂甙的提取主要有水提法和醇提法。黄芪多糖一般采取水提醇沉法，得率和含量较低，纯化精制工艺繁琐；黄芪皂甙有水煮醇沉取上清液和醇提法，精制采用醇提，然后正丁醇萃取，后浓缩成品，溶剂用量较大。为提高黄芪多糖、黄芪皂甙的提取率及纯度，降低生产成本，我们进行了高纯度黄芪多糖、黄芪皂甙提取、纯化工艺的研究。本专利技术的目的是通过以下技术方案来实现一种，其步骤是a)、将黄芪粉碎至颗粒状，称量后，加入6倍量的混合溶剂，混合溶剂为乙醇、水和正丁醇，乙醇∶水∶正丁醇＝4∶3∶3；b)、将蒸气通入罐内，加热75-80℃，使药液沸腾，提取过程中产生的溶剂蒸汽，经冷却后回流入提取罐内，提取1.8-2.5小时，过滤，得到提取液A；c)、将过滤后的药渣，按重量比加入6倍量的蒸馏水，将蒸气通入罐内，罐内温度为95-100℃，提取1.5-2小时，过滤，得到提取液B；d)、合并提取液A、B。e)、将混合后的A、B提取液，采用超滤方法，分别得到富含黄芪多糖和黄芪皂甙两种产品；f)、将富含黄芪皂甙的超滤液进行柱层析、溶剂提取两重纯化，得高纯度黄芪皂甙。g)、将富含黄芪多糖超滤液进行醇沉、溶剂洗涤两重纯化，得高纯度黄芪多糖。该专利技术在生产过程中取得多项技术突破和创新，主要有以下几个特点(1)根据黄芪多糖及黄芪皂甙的结构和极性不同的特点，我们首先采用混合溶剂(乙醇、水、正丁醇)对黄芪中的多糖及皂甙进行了提取，薄层层析色谱(TLC)分析表明，黄芪中皂甙成分全部提取。然后将残渣水提，通过正交实验优化，得到黄芪多糖及黄芪皂甙最佳提取生产工艺，工业生产中黄芪多糖及黄芪皂甙提取率分别达到94.5％和92.3％。(2)采用超滤技术粗分黄芪多糖和黄芪皂甙。粗提取液首先超滤，分别得到富含黄芪多糖和黄芪皂甙两种产品。设备采用国内大规模生产的廉价的中空纤维超滤膜。超滤较中药生产中常用的醇沉和絮凝方法有以下优点①时间短，而醇沉和絮凝一般需要静置一段时间；②产品损失少，而醇沉和絮凝在大分子沉淀的同时，会有黄芪皂甙类化合物析出，影响产品收率；③不影响黄芪皂甙的化学组成和质量，在室温和无需添加其他任何化学试剂条件下可以达到生产目的，而醇沉和絮凝特别是絮凝方法需要加入其他化学试剂，这样在产品溶液中会有残留絮凝剂。④中空纤维超滤膜通过酸碱洗涤，可以再生，重复利用。通过超滤方法分别得到含量大于50％的黄芪多糖和黄芪皂甙产品。(3)黄芪皂甙经柱层析-溶剂两重纯化，使最终产品皂甙含量大于80％；将富含黄芪皂甙超滤液进行柱层析纯化，可以去除其他小分子杂质。通过动态吸附和静态吸附实验，我们找到最佳的柱层析吸附剂和洗脱剂，在最佳工艺条件下，黄芪皂甙的含量达到83％(紫外分光度光法)。(4)黄芪多糖经醇沉、溶剂洗涤两重纯化，使最终产品多糖含量大于80％；将富含黄芪多糖超滤液进行醇沉，可以去除其他大分子杂质。最后通过溶剂洗涤，将产品进一步纯化。使产品中黄芪多糖含量达到86％。(5)分别采用冷冻干燥和瞬间喷雾干燥工艺，从而保证黄芪多糖和黄芪皂甙天然产物不因加工工艺而改变其特性，同时产品外观较佳，黄芪多糖呈淡黄色，黄芪皂甙呈棕黄色。(6)同一生产设备，采用不同的纯化方法和步骤，黄芪多糖和黄芪皂甙分别可以提供50％、70％、80％三个规格的产品。综上所述，有关高纯度黄芪多糖及皂甙的提取中，水煮醇沉法、超滤技术、喷雾干燥技术等的应用，国内已有专利技术和文献报道。但本课题拟采用混合溶剂提取高纯度黄芪多糖及皂甙，使黄芪多糖及皂甙提取率分别达到94.5％和92.3％，黄芪皂甙经柱层析—溶剂重结晶两重纯化，黄芪多糖经醇沉-溶剂洗涤两重纯化使最终产品多糖和皂甙含量分别大于80％，国内未见相同报道。具体实施例方式实施例1 将黄芪粉碎至颗粒状，称1吨的黄芪颗粒，加入6吨的混合溶剂，混合溶剂为乙醇、水和正丁醇，乙醇∶水∶正丁醇＝4∶3∶3；将蒸气通入提取罐的夹套内，加热78℃，使药液沸腾，提取过程中产生的溶剂蒸汽，经罐顶部冷却后回流入提取罐内，提取2小时，过滤，用泵抽出提取液A至储液罐中；再将过滤后的药渣，按重量比加入6倍量的蒸馏水，将蒸气通入罐的夹套内，罐内温度为100℃，提取1.8小时，过滤，用泵抽出提取液B至储液罐中；合并提取液A、B于储液罐中；将混合后的A、B提取液，采用超滤方法，分别得到富含黄芪多糖和黄芪皂甙两种产品；将富含黄芪皂甙的超滤液进行柱层析、溶剂提取两重纯化，得高纯度黄芪皂甙；将富含黄芪多糖超滤液进行醇沉、溶剂洗涤两重纯化，得高纯度黄芪多糖。实施例2将黄芪粉碎至颗粒状，称量后，加入6倍量的混合溶剂。混合溶剂为乙醇、水和正丁醇，乙醇∶水∶正丁醇＝4∶3∶本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种高纯度黄芪多糖、黄芪皂甙的提取方法，其步骤是：ａ）、将黄芪粉碎至颗粒状，称量后，加入６倍量的混合溶剂，混合溶剂为乙醇、水和正丁醇，乙醇∶水∶正丁醇＝４∶３∶３；　ｂ）、将蒸气通入罐内，加热７５－８０℃，使药液沸腾，提取过 程中产生的溶剂蒸汽，经冷却后回流入提取罐内，提取１．８－２．５小时，过滤，得到提取液Ａ；ｃ）、将过滤后的药渣，按重量比加入６倍量的蒸馏水，将蒸气通入罐内，罐内温度为９５－１００℃，提取１．５－２小时，过滤，得到提取液Ｂ；ｄ） 、合并提取液Ａ、Ｂ。ｅ）、将混合后的Ａ、Ｂ提取液，采用超滤方法，分别得到富含黄芪多糖和黄芪皂甙两种产品；ｆ）、将富含黄芪皂甙超滤液进行柱层析、溶剂提取两重纯化，得高纯度黄芪皂甙。ｇ）、将富含黄芪多糖超滤液进行醇沉、溶 剂洗涤两重纯化，得高纯度黄芪多糖。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：赵光龙，杨旭忠，赵晓虎，赵自丰，
申请(专利权)人：甘肃祁连山生物科技开发有限责任公司，
类型：发明
国别省市：62[中国|甘肃]