肝素钠生产工艺方法技术

本发明专利技术涉及一种肝素钠生产工艺方法。它解决了过去盐解法、碱解法和酶解法提取肝素钠粗制工序过多，肝素钠生物活性损失大，质量难以控制和稳定，产量收率小，蛋白质分离残留量高的问题。本发明专利技术是通过原料清洗，盐解提取，絮凝沉降，离子交换，洗涤和洗脱，沉淀，脱水和干燥的工艺方法提取肝素钠粗品。本发明专利技术生产工艺设计合理，有效提高和稳定产品的质量，产品活性损失小，蛋白质分离残留量少，纯度高，运营生产成本小，原材料消耗少，同时有效提高了肝素钠产品的经济效益。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种医用肝素纳的提取方法，特别是一种。
技术介绍
肝素钠属高分子化合物，它是6000到8000分子量不同的酸性粘多糖相混合的硫酸氨基多糖的纳盐，白色粉末，可溶于水，不易溶于乙醇和丙酮等有机溶剂。肝素钠在医药中不仅是粘多糖硫酸酯类抗凝血药，同时具有降血脂作用。由于肝素钠是由生物体中提取出来的天然物质，不是化学合成的产品，无副作用，在临床使用中受到医生和患者的青睐，广泛用于防治各种脑血管疾病，阻止凝血酶原转变成纤维蛋白单体，防止血小板的集聚和破坏，治疗突发性血栓栓塞性疾病、动脉硬化和降低胆固醇，防止癌细胞的转移病变都有确切的疗效。肝素钠在医药临床应用的不断普及和扩大，市场需求量也在不断的增加。随着市场需求不断的增加，以往传统的提取生产工艺方法，不适用日益增长的产量和质量。目前，国内从猪小肠提取肝素钠的方法主要有盐解法、碱解法和酶解法等几种，其中以盐解法应用最为普遍。猪小肠粘膜内的肝素通常是与其他粘多糖及蛋白质结合在一起的，用盐解法使肝素在碱性条件下与纳离子反应生成肝素钠，从而与蛋白质的复合物中分离出来，用强碱性阴离子交换树脂从解离液中将肝素负离子吸附，再用盐水将吸附在树脂上的肝素负离子洗脱下来，干燥，获得成品。此工艺虽简单稳定，但获得的粗品肝素钠收率较低，对肝素钠的生物活性影响很大，损失5-7％的肝素钠活性，蛋白质的残留量较高，效价很难达到90USPu/mg以上，质量难以控制和隐定。因此，创新开发新的蛋白质分离工艺方法，有效提高和稳定肝素钠产品的产量和质量，减少肝素钠成品的活性损失，降低原材料的消耗，降低生产运营成本，已成为粗品肝素钠生产的技术难题。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种设计工艺合理，制作成本低，肝素钠粗品收率高，肝素钠活性损失小，质量稳定，减少精制工序的。本专利技术解决其技术问题所采用的技术方案是1)将新鲜肠粘膜清除杂质，进入冷库贮藏，再让其自然解冻，在井水或蒸馏水中浸泡6小时，清冼干净，进刮肠机到制，操作用力均匀，肠衣、肠皮和肠粘膜分开存放，肠粘膜排放到存放池中，定量排放到反应锅中；2)肠粘膜放入反应锅中，然后在反应锅中放入氯化钠和碱液，氯化钠控制在5％度，碱度在PH＝9，搅拌10分钟，打开蒸汽阀通气，再关闭蒸汽阀，第一次在30分钟升温至50℃，保温1小时，第二次升温至60℃，保温3小时，第三次在40分钟升温至90℃，恒温10分钟后出料，捞去反应锅上部废液，用90-120目尼龙网布两次提取滤渣，两次提取滤液合并待用；3)滤液冷却后加入沉降锅，按0.2％的配比加入絮凝沉降剂，搅拌30分钟静置沉降，时间6小时，再澄清，滤去沉降物；4)将澄清滤液放入吸附池，加入2-3Kg罗门哈斯树脂，盐度控制在15°以下，搅拌吸附12小时，过滤提取树脂，弃去滤液，收集的树脂在水中洗至碱度PH＝7；5)清洗后的树脂放入清洗锅，用树脂重量1.2倍的5％配比稀盐水搅拌洗涤2次，每次1小时，洗去树脂表面杂质和低分子肝素，过滤后，弃去洗涤液；6)将洗涤的树脂，用树脂重量1.2倍的17-18％浓盐水搅拌洗脱2次，头次4小时，二次2小时，再收集两次的洗脱液，混合过滤，除去颗粒状杂质；7)过滤的洗脱液放入沉淀锅，加入洗脱液体积95％的50°酒精，搅拌5分钟，加盖密封，静置沉淀24小时，滤去上部酒精，收集底部的沉淀物；8)将沉淀物倒入容器内，加入沉淀物体积95％的酒精，静置沉淀24小时，滤去上部酒精，提取容器内底部沉淀物放至布氏漏斗中抽真空，加丙酮至布氏漏斗中搅拌成糊状，脱水，重复三次，将脱水后的沉淀物置于恒温干燥箱内干燥至恒重，即得成品。本专利技术的有益效果是1，设计工艺合理，在已生成肝素钠的解离液中加入絮凝沉淀剂，使蛋白质和其他粘多糖、类肝素等多种杂质结合产生沉淀，同时通过其优越的絮凝功能，将解离液中不溶于水的微细固体残渣凝聚较大颗粒和其他沉淀物一起沉降，使解离液的固液分离更为完全，获得纯度更高的肝素钠成品。本专利技术与传统工艺方法效价比较表 2，吸附回收率高，平衡时间快。采用美国罗门哈斯公司生产的大孔强碱型苯乙烯阴离子树脂，交换能力优于D254和1299×9等其他树脂，机械强度好，不易堵塞孔道，平衡时间短，树脂不易被解离液污染，有效延长树脂的再生周期和使用期限。本专利技术与传统工艺方法收率比较表 3，优化调整生产过程相应的工艺操作参数，取消精制工序，简化工艺流程，降低生产消耗材料，降低生产运营成本，提高了产品质量。本专利技术与传统工艺方法耗材比较表 具体实施例新鲜猪小肠洗净，清除杂质，进入冷库贮藏。等猪小肠到一定数量时，取出猪小肠用水浸泡6小时，让其自然解冻，清洗干净。再把猪小肠送到多功能不锈钢到肠机进行刮制，刮肠操作时用力要均匀，刮制好的肠衣、肠皮和肠粘膜应分开堆放，及时清理。肠粘膜应统一排放到存放池，保证肠粘膜的新鲜度。然后在反应锅中加入氯化钠和碱液，盐度控制在5％左右，碱度控制在PH＝9，倒入肠粘膜，搅拌10分钟，保持PH值不变。如果肠粘膜为腌制，还应用水稀释至比重计或波美表测量达到标准的0.8-1N，再稀释4-5倍，碱度控制在PH＝9。打开反应锅的蒸汽阀通气，开度不能太大，以免升温过快。第一次在30分钟升温至50℃左右，保温1小时，第二次升温至60℃，保温3小时，第三次在40分钟内迅速升温至90℃，恒温10分钟出料，捞去反应锅浮在上部的油和杂质，用90-120目尼龙网布过滤。对滤渣进行两次提取，两次的滤液合并待用。冷却后的滤液倒入沉降锅，按每锅容积约0.2％的配比加入SH-I混合絮凝沉淀剂，搅拌30分钟后静置沉降，时间不能少于6小时，澄清后，滤去沉淀物。将澄清后的滤液放入吸附池，加入已处理好的的2-3Kg罗门哈斯树脂，搅拌吸附12小时。搅拌要注意均匀，时间充分，不能偷工减料。脱附时盐度控制在15度以下。吸附完成后，过滤提取树脂，弃去滤液，把收集的树脂在水中洗至碱度PH＝7。清洗后的树脂放入清洗锅，按树脂重量1.2倍的5％配比加入稀盐水搅拌洗涤2次，每次1小时，洗去树脂表面的杂质分子和低分子肝素，过滤后弃去洗涤液。洗涤后的树脂，按树脂重量1.2倍的18％配比加入浓盐水搅拌洗脱2次，头次4小时，二次2小时，目的是将树脂内吸附的肝素洗脱出来，收集两次的洗脱液混合后过滤，除去颗粒状杂质。洗脱液过滤后放入沉淀锅，按洗脱液容积95％加入50℃酒精，搅拌5分钟，加盖密封，静置沉淀24小时后，滤去上部酒精，收集底部的沉淀物。再将沉淀物倒入容器内，按沉淀物容积95％加入酒精，静置沉淀24小时，滤去上部酒精，提取沉淀物放至布氏漏斗中抽真空，待抽干水分后，加丙酮至漏斗中搅拌成糊状，进行脱水，重复三次，利用丙酮将沉淀物中的水分脱去，收集脱水后沉淀物置于恒温干燥箱干燥至恒重，如果没有恒温干燥箱，用干燥剂也可进行干燥，干燥后的沉淀物即是肝素钠粗品。权利要求1，一种，其特征是1)将新鲜肠粘膜清除杂质，进入冷库贮藏，再让其自然解冻，在井水或蒸馏水中浸泡6小时，清冼干净，进刮肠机刮制，操作用力均匀，肠衣、肠皮和肠粘膜分开存放，肠粘膜排放到存放池中，定量排放到反应锅中；2)肠粘膜放入反应锅中，然后在反应锅中放入氯化钠和碱液，氯化钠控制在5％度，碱度在PH＝9，搅拌10分钟，打开蒸汽阀通气，再关闭蒸汽阀，第一本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种肝素钠生产工艺方法，其特征是：１）将新鲜肠粘膜清除杂质，进入冷库贮藏，再让其自然解冻，在井水或蒸馏水中浸泡６小时，清洗干净，进刮肠机刮制，操作用力均匀，肠衣、肠皮和肠粘膜分开存放，肠粘膜排放到存放池中，定量排放到反应锅中；　 　２）肠粘膜放入反应锅中，然后在反应锅中放入氯化钠和碱液，氯化钠控制在５％度，碱度在ＰＨ＝９，搅拌１０分钟，打开蒸汽阀通气，再关闭蒸汽阀，第一次在３０分钟升温至５０℃，保温１小时，第二次升温至６０℃，保温３小时，第三次在４０分钟升温至９０℃，恒温１０分钟后出料，捞去反应锅上部废液，用９０－１２０目尼龙网布两次提取滤渣，两次提取滤液合并待用；３）滤液冷却后加入沉降锅，按０．２％的配比加入絮凝沉降剂，搅拌３０分钟静置沉降，时间６小时，再澄清，滤去沉降物；４）将澄清 滤液放入吸附池，加入２－３Ｋｇ罗门哈斯树脂，盐度控制在１５°以下，搅拌吸附１２小时，过滤提取树脂，弃去滤液，收集的树脂在水中洗至碱度ＰＨ＝７；５）清洗后的树脂放入清洗锅，用树脂重量１．２倍的５％配比稀盐水搅拌洗涤２次，每次１小时，洗 去树脂表面杂质和低分子肝素，过滤后，弃去洗涤液；６）将洗涤的树脂，用树脂重量１．２倍的１７－１８％浓盐水搅拌洗脱２次，头次４小时，二次２小时，再收集两次的洗脱液，混合过滤，除去颗粒状杂质；７）过滤的洗脱液放入沉淀锅，加入洗脱 液体积９５％的５０°酒精，搅拌５分钟，加盖密封，静置沉淀２４小时，滤去上部酒精，收集底部的沉淀物；８）将沉淀物倒入容器内，加入沉淀物体积９５％的酒精，静置沉淀２４小时，滤去上部酒精，提取容器内底部沉淀物放至布氏漏斗中抽真空，加丙酮至 布氏漏斗中搅拌成糊状，脱水，重复三次，将脱水后的沉淀物置于恒温干燥箱内干燥至恒重，即得成品。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：胡世辉，
申请(专利权)人：胡世辉，
类型：发明
国别省市：43[中国|湖南]