透明质酸／甲氨蝶呤化合物制造技术

可用作关节疾病治疗药物的透明质酸／甲氨蝶呤缀合物。本发明专利技术涉及可用作关节疾病治疗药物的透明质酸／甲氨蝶呤缀合物，其包含透明质酸和通过含有１到８个氨基酸的肽链的接头与所述酸的羧基连接的甲氨蝶呤。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及透明质酸-甲氨蝶呤缀合物及其制药用途。
技术介绍
骨关节炎(下文也称为“OA”)是一种所谓的变性疾病，它基于衰老而发生。在当今老龄化社会中，OA患者的数量已经稳定地增加，但还没有建立适当的诊断或治疗方法。认为OA的初期病理学改变是由于衰老而由机械压力导致的关节软骨的退化和磨损。这些改变以极慢的速度进展并导致病痛逐渐地增进。目前OA药物疗法在全身治疗中使用1)解热镇痛剂(对乙酰氨基酚)或，2)非甾体抗炎药(下文也称为NSAID)，或在局部治疗(关节内注射)中使用3)透明质酸(下文也称为HA)制剂，和4)甾体制剂。当包括NSAID在内的全身性药物疗法没有减轻病痛或关节局部的肿胀时，再进行甾体制剂的关节内注射，它具有最好的抗炎活性。然而，甾体制剂在安全性方面存在问题，例如，因为它们可引起关节内注射综合征(类固醇性关节病)，并且可能具有全身性副作用。因此，HA制剂作为比甾体制剂更安全的关节内注射剂替代方案正在变得更有用。HA是由N-乙酰葡糖胺和葡萄糖醛酸重复单元组成的内源性多糖。HA作为构成滑液的主要成分用于保持滑液的粘弹性、承载能力和润滑作用，并且，在软骨基质中，它通过与软骨蛋白多糖结合形成被称为聚集蛋白聚糖的聚合物而在维持其持水量和粘弹性中发挥着主要作用。由于分子量约600,000道尔顿的HA或其交联产物向膝关节内注射消除了OA引起的疼痛，因此HA制剂广泛用作OA治疗剂。进一步地，与正常滑液中存在的HA分子量接近的高分子量型HA制剂(产品名称SuvenylTM，制造和销售Chugai Pharmaceutical Co.，Ltd.)就适应症而言在日本被批准用于消除伴随有类风湿性关节炎(下文也称为RA)的膝盖疼痛。在这方面上，据说HA的分子量与其效力相互关联，并且高分子量型HA的作用更加持久，且比低分子量型HA更加有效。通常认为HA制剂逆转了由OA(或RA)病理学症状引起的滑液粘性和弹性受损，以消除疼痛。然而，外加HA制剂的效果持续很长一段时间，尽管HA几天之内就从滑液中消失了。因此，也提示了外加HA制剂可能通过不同于上述改善滑液粘弹性的机理消除疼痛的可能性。机理的实例包括对OA滑膜炎的抑制作用，这将在下文描述。OA疼痛和炎症的病理学机制仍然存在很多不清楚的地方，但是近来注意力已经集中于与滑膜炎机理的可能联系上，滑膜炎是由软骨退化继发引发的。OA滑膜炎被认为是促进OA病理学症状的主要加剧因素，因为它不仅成为疼痛和炎症症状如关节积水或发热的主要原因，而且通过蛋白酶、细胞因子和自由基的产生加速了关节破坏。除此之外，OA滑膜炎没有显示如在RA中看到的显著的增殖性变化，而是有很多与RA滑膜炎共同的方面，例如滑膜细胞增殖、血管生成、充血、滑膜下水肿和纤维化。因此，从有效消除OA中的疼痛和炎症以预防其病理学症状进程的观点来看，控制OA滑膜炎是重要的，HA对滑膜的作用还没有完全阐明，但是从使用同位素的实验已知，HA在滑膜中积聚和存在的时间比在关节腔中的时间更长。也已经报道，识别HA的受体(CD44和RHAMM(HA-介导的运动性受体))存在于构成滑膜组织的滑膜细胞表层，并且滑膜细胞具有通过其表层上的CD44将分子量甚至为2,000,000或更高的HA掺入细胞的机制。这些发现提示，HA的至少部分疼痛消除作用是通过它对滑膜作用的产生的；然而，HA制剂没有足够的效力来抑制OA滑膜炎本身诱导的炎性症状，因此，他们对于显示强炎性症状的OA和RA的作用还远远不够。控制滑膜炎的药物是被称作疾病修饰抗风湿药(下文也称为DMARD)的用于治疗RA的一类公知的药物。其中，甲氨蝶呤(下文也称为MTX)是有如下优点的药物，例如，具有极好的效力，并且在它的效果发挥之前具有相对短的时间。然而，在除了它治疗的关节以外的区域中，已知由于MTX的作用机制使得MTX引起了严重的副作用(肝病、造血病、肺病、胃肠道紊乱等)，因为MTX的使用仅被批准用于全身性给药(在日本目前只有MTX胶囊已经被批准作为药物用于治疗RA；其片剂和注射剂还没有被广泛批准)。因此，在MTX的使用中充分监测其副作用和对副作用的发生采取措施是非常必要的。由于非常害怕此类副作用，包括MTX在内的滑膜炎-抑制药物还没有被批准用于其它关节疾病作为适应症例如OA，其症状比RA的症状较为缓和。因此，如果发现能减轻MTX全身性副作用的方法或能使MTX仅在需要MTX有益效果发生的区域发挥其作用的方法，将不仅能提供更安全的RA疗法，而且将MTX用于广泛的关节疾病也是可能的。已经尝试了很多将MTX的作用仅定位于关节和滑膜内的方法作为减轻MTX副作用和仅仅发挥其想要的作用的手段。例如，已经报道了单独局部(关节内)施用MTX的方法；然而，不能发挥其充分的有益效果，因为MTX很快就从关节腔内消失了。也已经报道了利用巨噬细胞的吞噬能力，使用形成了脂质体的MTX来改善其在关节的贮留；然而，尚未证实其临床有用性。因此，为了减少MTX作为关节疾病治疗药的副作用和仅发挥期望的作用，仍然需要进行技术改进。如上所述，滑膜是其中HA易于积聚的组织。除此之外，滑膜细胞具有通过HA受体例如CD44将HA掺入细胞的机制。因此，HA似乎具有提供在滑膜内积聚药物的载体的可能性。之前已经报道了将HA用作药物内部载体的几种技术。然而，在创造适用于关节疾病治疗药、尤其是适用于以MTX为代表的滑膜炎治疗药的药物递送系统(下文也称为DDS)方面，几乎没有将HA应用于技术的已知实例。之前报道的已知实例包括多糖-药物缀合物，其中，药物与包括HA在内的多糖通过肽链缀合(专利文献1日本专利Laid-Open第05-39306号，专利文献2国际公布WO 94/19376，等等)。每篇文献都涉及用于抗癌药的DDS技术，并且强调DDS技术改善了药物向癌组织内的传递。在日本专利Laid-Open第05-39306号中使用了MTX，打算用作抗癌药物。然而，由于该技术的特征在于提高MTX向癌组织内的传递和它在体内不具备长期的持久性，因此，为了增强抗癌效果，MTX的结合率变高了(在专利文献的实验实施例中从6.4％变为19％)，而且HA的分子量降低了(该专利文献的实验实施例中是100,000道尔顿)。除此之外，肽链与HA的羟基通过异脲键合的结合使得缀合物在水溶液中更加不稳定。也有报道的实例，在每个实例中，HA与药物缀合形成的缀合物已经用作关节疾病的治疗药。例如，国际公布WO 99/59603(专利文献3)公开了一种缀合物，其中，HA与药物通过间隔基例如亚丁基胺基团(-C4H8NH-)或亚辛基胺基团(-C8H16NH-)缀合。该专利文献描述了这样的缀合物可以在药物保持缀合的状态下发挥有益效果，假定有益效果在细胞外部。在该缀合物中，事实上，药物与HA通过间隔基的缀合是相对较强的，因此这项技术难以应用到药物上，药物像MTX不能发挥有益效果除非它从缀合物中释放出来。此外，该专利文献涉及使用基质金属蛋白酶抑制剂(下文也称为MMPI)作为药物的缀合物，并且公开的实验实施例也仅涉及MMPI缀合物。没有明确公开使用MTX作为药物的缀合物，也没有描述缀合物作为药物的有用性。国际公布WO 02/44218(专利文献4)公开了使用间隔基制备的HA-药物缀合物，本文档来自技高网...

【技术保护点】
透明质酸－甲氨蝶呤缀合物，其中，甲氨蝶呤通过含１到８个氨基酸的肽链的接头与透明质酸、透明质酸衍生物或其盐的羧基缀合。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：池谷仁志，守川忠志，高桥浩一，田村达也，冈町晃，石泽武宣，佐藤晴彦，樋口义信，
申请(专利权)人：电气化学工业株式会社，中外制药株式会社，
类型：发明
国别省市：JP[日本]