本发明专利技术涉及旋复花植物总多糖，及其用于糖尿病及并发症的治疗和免疫调节之用途。
【技术实现步骤摘要】
,及其调节或治疗糖尿病及并发症和免疫调节用途的制作方法
本专利技术涉及来自植物旋复花的总多糖，及其用于糖尿病及并发症 的调节或治疗和免疫调节之用途。
技术介绍
旋复花(包括Inw7fl 和Znw7fl j属菊科植物。具有消痰、下气、软坚和行水之功效。文献报道旋复花地上部分 含旋复花内酯、天人菊内酯、槲皮素、槲皮黄甙、咖啡酸、绿原酸等 多种成分(黄泰康，常用中药成分与药理手册，p1608, 1994 )。 Takao Kobayashi等发现服用500mg/kg/天的欧亚旋覆花(//2w/fl 5//"力力/a Z.)水提物能显著降低由多次低剂量链脲霉素诱导的自身免疫性糖尿 病小鼠的血糖，减轻P细胞损伤，减少分泌Y -干扰素的细胞数量(;7/^of力era/ 7researc力，16: 377-382 )。旋复花(//7i/7a力/7/zz/cfl) 水提物具有显著降血糖和降血脂作用("/o厶户/ ar瓜Aw//， 2006， 29(3 ) : 455 - 459 )，并申请专利技术专利(专利申请号200510069547. 8 ); "香附旋覆花汤"加味方(12味中药)治疗II型糖尿病一例报道(张 秀云，山东中医杂志，1996， 15 ( 6 ): 255 )。
技术实现思路
本专利技术人在研究中发现采用水或含有机溶剂的水溶液提取旋复花 (包括Inw/s ys; 2'/ 2'ca和6r/fa/2/2/ca)植物(包括花序、蓬 和叶)获得水提物，该水提物再经有机溶剂沉淀获得旋复花总多糖。 旋复花总多糖无毒，具有明显的降血糖和降血脂功效，提高糖尿病动 物葡萄糖耐受能力，而且能提高免疫功能低下动物的T细胞和B细胞 的增殖能力。本专利技术在上述发现的基础上现以完成。因此，本专利技术第一方面涉及一种，其中所述总多糖具有附图1或2所示的特征。本专利技术再一方面涉及一种，其中所述总多糖 是如下得到的用选自水、甲醇、乙醇、丙醇、正丁醇、丙酮或它们 的至少两种混合物提取旋复花，所得上述旋复花提取物进一步用选自 甲醇、乙醇、丙醇、正丁醇、丙酮、乙酸乙酯或它们的至少两种混合 物沉淀。本专利技术还涉及一种产品，其包括及糖复合物 及至少一种食用或药物栽体。本专利技术进一 步涉及旋复花总多糖在制备用于调节或治疗糖尿病、 糖尿病并发症及免疫调节产品中的用途。根据本专利技术，术语"总多糖"是指寡糖，多糖，及糖复合物。根据本专利技术，术语"糖复合物"是指含有糖成分的复合分子，如 糖和肽链共价结合形成的糖蛋白、蛋白聚糖和肽聚糖，糖与脂类共价 结合形成的糖脂和脂多糖等。根据本专利技术，术语"产品"指功能性食品，保健品或药品。附图说明图1为实施例2旋复花总多糖DEAE-纤维素柱层析图- -曲线表示收集的洗脱液用苯盼-硫酸法显色后，在490nm 波长处检测含有糖的吸收峰；-〇-曲线表示收集的洗脱液在280nm波长处检测的吸收峰。其中A处代表用水进行洗脱得到的吸收峰；Bl和B2代表用0. 25mol/L碳酸氢钠进行洗脱得到的吸收峰； C代表用0. 50mol/L碳酸氢钠进行洗脱得到的吸收峰； D代表用0. 10mol/L氢氧化钠进行洗脱得到的吸收峰。图2为图1的局部放大图。具体实施方案下面的实施例用于进一 步说明本专利技术，但其不意味着对本专利技术的任何限制。实施例1旋复花l公斤用10升水室温浸泡48小时，过滤。残渣再用5升 水继续浸泡24小时，过滤，合并滤液，601C减压浓缩至2-4升。然 后用95%的乙醇沉淀，乙醇终浓度为80%，醇沉24小时。离心，沉 淀用2. 5升水溶解，离心，无离子水透析48 - 72小时。60"减压浓缩 后冷冻干燥，即获得旋复花总多糖7. 33克(得率0.733% )。实施例2旋复花1公斤，加入10升95%乙醇室温浸泡72小时，过滤，残 渣再用6升95%乙醇继续浸泡48小时，过滤。残渣自然凉干或50"C 烘干后，用IO升水室温浸泡48小时，过滤。残渣再用5升水继续浸 泡24小时，过滤，合并滤液，60C减压浓缩至2-4升。然后用95% 的乙醇沉淀，乙醇终浓度为80%，醇沉24小时。离心，沉淀用2.5 升水溶解，离心，无离子水透析48 - 72小时。60t;减压浓缩后冷冻干 燥，即获得旋复花总多糖5. 51克(得率0. 551% )。实施例3称取实施例2得到的旋复花总多糖1克，用10毫升水溶解，上 DEAE-纤维素柱(4.5 32cm)，依次釆用水、0. 1M NaHC03、 0. 25M NaHC03、 0. 5M NaHC03和0.腿aOH洗脱液进行洗脱，流速为10 ml/min， 同时采用苯酚-硫酸法和280nm紫外吸收法检测总多糖馏份。收集洗 脱峰，用蒸馏水透析，分别在60t:减压浓缩，冷冻干燥。柱层析图傳 见附图1和2。实施例4昆明种小鼠随机分为正常对照组和待造模组。待造模组小鼠禁食16小时后(不禁水)，尾静脉快速注射四氧嘧啶生理盐水溶液，剂量 为60 mg/kg. 96 h后尾尖取血测定小鼠血糖，血糖值>20. 0 mmol/L 的小鼠，同时伴有多饮、多尿症状，被选为糖尿病小鼠。实验分为正 常对照组、模型对照组、实施例2旋复花、总多糖组和二甲双胍组。 采用灌胃方式，旋复花总多糖组给药剂量为250mg/kg， 二甲双胍组剂 量为250fflg/kg，均连续给药20天。给药7天和20天测定血糖。小鼠 给药20天后，眼眶取血，处死。取出肝脏、肾脏和脾脏，称重，计算 重量指数(器官重量/体重)。血样离心10min ( 2000r/min)，取出 血清，进行旋复花多糖和糖复合物对糖尿病小鼠血糖及血浆总胆固醇 (TC )、甘油三酯(TG ) 、 HDL -C和LDL - C的影响(见表1和2 )。 实验数据显示旋复花总多糖具有显著降血糖和降血脂作用，同时能降 低糖尿病小鼠血浆LDL - C的水平。表l旋复花总多糖对糖尿病小鼠血糖得影响<table>table see original document page 6</column></row><table>注与模型组相比，**P<0. 01, n-10._表2旋复花总多糖对糖尿病小鼠生化指标得影响<table>table see original document page 6</column></row><table>注与模型组相比，*p<0. 05. n=10， **P<0. 01, n=10。实施例5Balb/c雄性小鼠腹腔注射环磷酰胺，造成免疫损伤同时给与实施 例2旋复花总多糖(200mg/kg)，左旋咪唑为阳性药(50mg/kg),连 续灌胃l周。断头处死，无菌取脾脏和胸腺，称重后，计算重量指数。 脾脏细胞分别与ConA和LPS培养，研究药物对脾脏T细胞和B细胞增 殖能力的影响，结果见表3和4 。结果表明旋复花总多糖对ConA和LPS 诱导的T细胞和B细胞有促进增殖作用，能改善环磷酰胺引起小鼠的 体液免疫和细胞免疫功能低下症状。表3旋复花总多糖对环磷酰胺引起免疫功能低下的影响1组别 剂量 体重(始)体重(末) 脾脏指数 胸腺指数 mg/kg g g正常组 20.1±1.5 21本文档来自技高网...
【技术保护点】
旋复花总多糖，其特征在于：所述总多糖具有附图１或２的特征。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：单俊杰，赵毅民，
申请(专利权)人：中国人民解放军军事医学科学院毒物药物研究所，
类型：发明
国别省市：11[中国|北京]
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