一种桑辛素M‑3'‑O‑β‑D‑葡萄糖苷及其制备方法与应用技术

本发明专利技术涉及桑辛素M‑3'‑O‑β‑D‑葡萄糖苷及其制备方法与应用，可有效解决从桑白皮中提取桑辛素M‑3'‑O‑β‑D‑葡萄糖苷，以及在制备治疗LPS诱导的HPAEC损伤药物中的应用问题，方法是，将桑白皮煎煮，提取液减压浓缩得干燥物，干燥物加蒸馏水混悬，上树脂柱，依次用水、乙醇梯度洗脱，各个梯度洗脱液浓缩至干，干物用甲醇溶解，加入硅胶，加入到色谱柱的液面上梯度洗脱，合并含有目标成分的流份，减压浓缩，得总样A1、A2、A3；总样A3用甲醇溶解，上Toyopearl HW‑40柱，用甲醇洗脱，薄层检识，合并含相同的流份，得到子流份A3‑1，减压浓缩、干燥，用甲醇溶解，上ODS柱，用甲醇洗脱，薄层检识，合并含相同的流份，减压浓缩，本发明专利技术方法新颖独特，易操作使用，开拓了桑白皮的新用途。

A M 3'O cortexmori D beta glucoside and its preparation method and Application

The present invention relates to M 3'O cortexmori D beta glucoside and its preparation method and application, which can effectively solve the problem of extracting cortexmori M 3' O D beta Glucoside from mulberry bark, and application problems of HPAEC damage in preparing medicine for treating LPS induced by the method yes, Sangbaipi decoction, decompression concentrating the extracted liquid to obtain dry, dry distilled water suspension, resin column, followed by water, ethanol elution, each gradient eluent was concentrated to dryness, dry matter dissolved in methanol, adding silica gel, added to the liquid chromatographic column with gradient elution, containing the target component flow, vacuum concentration, total A1, A2, A3; total A3 sample was dissolved with methanol on Toyopearl HW 40 column, eluted with methanol, TLC identification, and contain the same flow, got the portion of A3 1, decompressing and concentrating and drying, The ODS column is dissolved by methanol, eluted with methanol, examined by thin layer and combined with the same stream fraction to decompress and condense. The inventive method is novel and unique, easy to operate and use, and has opened up new uses of mulberry bark.

【技术实现步骤摘要】
一种桑辛素M-3'-O-β-D-葡萄糖苷及其制备方法与应用
本专利技术涉及医药，特别是一种桑辛素M-3'-O-β-D-葡萄糖苷及其制备方法与应用。
技术介绍
桑白皮为桑科植物桑(拉丁学名：MorusalbaL.)的干燥根皮，别名桑根白皮、桑根皮、桑皮、白桑皮，秋末落叶时至次春发芽前采挖根部，刮去黄棕色粗皮，纵向剖开，剥取根皮，晒干。含黄酮类成分：桑素(mulberrin)，桑皮色烯素(mulberrochromene)，环桑素(cyclomulberrin)，环桑皮色烯素(cyclomulberro-chromene)，桑根皮素(morusin)，环桑皮素(cyclomorusin)，氧化二氢桑根皮素(oxydihydromomsin)，桑黄酮(kuwanon)A、B、C、D、E、F、G(即albaninF，moraceninB)、H(即albaninG，moraceninA)、I、K、L、Y、Z，桑白皮素(moracenin)C、D，桑根酮(sffnggenone)A～P；又含桑呋喃(mulberrofuran)A、B、C、K、N、0、M、P、Q，桦皮酸；香豆素类：5,7-羟基香豆素(5,7-dihydmxycoumarin)伞形花内酯(umbelliferone)、东莨菪内酯(即东莨菪素，scopoletin)、莨菪内酯等成分。多糖类：粘液素、桑多糖、甲克素、壳聚糖；还含α-及β-香树精、谷固醇、挥发油、鞣质等。具有降压、利尿、镇静镇痛、抗炎、抗菌、抑制血小板聚集、降糖之功效，对人子宫颈癌JTC-26株的抑制率为70％左右，具有诱生干扰素作用。LPS是内毒素的主要成分，内毒素进入机体后通过诱发过度的炎症反应可引起急性肺损伤(acutelunginjury，ALI)，LPS诱导的ALI是严重创伤或感染后出现最早、发病率最高的并发症之一，肺血管内皮细胞损伤是LPS导致急性肺损伤的关键环节。因此研究血管内皮的受损及其修复对ALI的治疗和防御具有显著意义。内皮细胞功能失调受损后会分泌多种细胞因子、炎症因子，如趋化因子(MCP-1)、粘附因子(ICAM-1、VCAM-1、E-selectin)、炎症因子(TNF-α、IL-1β、IL-6)等。同时内皮细胞也能够释放各种活性物质，协调血管舒张因子及收缩因子之间的平衡，如缩血管物质ET-1及扩血管物质NO，ET-1/NO平衡的破坏是动脉内皮受损的显著特征。iNOS是一种在炎症因子刺激下产生的一种物质，它的含量可以代表血管损伤的程度，最近的研究表明，活化的AMPK能够显著改善TNF-α诱导内皮细胞损伤中NF-κB的核移位，5-aminoimidazole-4-carboxamide-1-β-d-ribofuranoside(AICAR)也能够通过激活AMPK抑制LPS诱导的炎症反应。但至今未见有从桑白皮中提取有效活性部位桑辛素M-3'-O-β-D-葡萄糖苷(简称SP-19)并用于制备治疗LPS诱导的HPAEC损伤药物中的应用。
技术实现思路
针对上述情况，为克服现有技术之缺陷，本专利技术之目的就是提供一种桑辛素M-3'-O-β-D-葡萄糖苷及其制备方法与应用，可有效解决从桑白皮中提取桑辛素M-3'-O-β-D-葡萄糖苷(简称SP-19)，以及在制备治疗LPS诱导的HPAEC损伤药物中的应用问题。本专利技术解决的技术方案是，所述的桑辛素M-3'-O-β-D-葡萄糖苷是从桑白皮中提取的有效活性成分，分子结构式见图1所示，该桑辛素M-3'-O-β-D-葡萄糖苷的制备方法是：将桑白皮煎煮提取，提取液减压浓缩得干燥物，干燥物加蒸馏水混悬，离心除去不溶物，得上清液；上清液上树脂柱，依次用水、质量浓度30％乙醇梯度洗脱，各个梯度洗脱液浓缩至干，干物用甲醇溶解，再加入硅胶，得载有样品的硅胶；将载有样品的硅胶加入到色谱柱的液面上，进行梯度洗脱，将收集的流份经过TLC分析，合并含有目标成分的流份，减压浓缩，得到含有目标成分的总样A1、A2、A3；总样A3用甲醇溶解，上ToyopearlHW-40柱，用甲醇洗脱，薄层检识，合并含相同的流份，得到子流份A3-1，减压浓缩、干燥，用甲醇溶解，上ODS柱，用甲醇洗脱，薄层检识，合并含相同的流份，减压浓缩，得到目标成分棕色粉末桑辛素M-3'-O-β-D-葡萄糖苷(SP-19)：该桑辛素M-3'-O-β-D-葡萄糖苷对LPS诱导的HPAEC损伤有保护作用，有效用于制备治疗LPS诱导的HPAEC损伤的药物，实现桑辛素M-3'-O-β-D-葡萄糖苷在制备治疗LPS诱导的HPAEC损伤药物中的应用。本专利技术是从桑白皮中提取的一种有效活性成分桑辛素M-3'-O-β-D-葡萄糖苷(简称SP-19)，其制备方法新颖独特，易操作使用，其制备的桑辛素M-3'-O-β-D-葡萄糖苷作为唯一活性部位在制备治疗LPS诱导的HPAEC损伤药物中的应用，开拓了桑白皮的新用途，有良好的经济和社会效益。附图说明图1为本专利技术的桑辛素M-3'-O-β-D-葡萄糖苷(简称SP-19)的分子结构图。图2为本专利技术SP-19对HPAEC细胞损伤的影响图。图3为本专利技术AMPK拮抗剂CompoundC对SP-19的影响图。图4为本专利技术SP-19对HPAEC细胞TNF-α的影响图。图5为本专利技术SP-19对HPAEC细胞IL-1β的影响图。图6为本专利技术SP-19对HPAEC细胞IL-6的影响图。图7为本专利技术SP-19对HPAEC细胞ET-1的影响图。图8为本专利技术SP-19对HPAEC细胞NO的影响图。图9为本专利技术SP-19对HPAEC细胞iNOS的影响图。图10为本专利技术SP-19对HPAEC细胞ICAM-1的影响图。图11为本专利技术SP-19对HPAEC细胞VCAM-1的影响图。图12为本专利技术SP-19对HPAEC细胞E-selectin的影响图。图13为本专利技术SP-19对HPAEC细胞MCP-1的影响图。具体实施方式以下结合具体情况对本专利技术的具体实施方式作详细说明。本专利技术在具体实施中，所述的桑辛素M-3'-O-β-D-葡萄糖苷是从桑白皮中提取的有效活性成分，分子结构式见图1所示，该桑辛素M-3'-O-β-D-葡萄糖苷的制备方法是：将桑白皮2.4kg每次用其重量8-12倍的蒸馏水煎煮提取3次，每次60min，合并提取液，减压浓缩得干燥物，加干燥物重量体积2-3倍的蒸馏水混悬，重量体积是指固体物以g计，液体以mL计，6000r/min离心除去不溶物，得上清液；取7.0LDiaionHP-20大孔吸附树脂填料，用质量浓度95％乙醇浸泡24h装柱，用蒸馏水洗至无醇味，上清液浓缩至50℃相对密度1.2-1.4，上树脂柱，依次用水、质量浓度30％乙醇洗脱，每个梯度洗脱液用量为10个柱体积，流速为2BVh-1，各个梯度洗脱液浓缩至干，得到30％乙醇洗脱组分和粗提物，加入50mL甲醇溶解，再加入过160-200目筛的硅胶40g，45℃减压回收甲醇，得到载有样品的硅胶；取过200-300目筛的硅胶500g，加入二氯甲烷800mL，转移到80cm长×8cm内径的色谱柱中，用二氯甲烷充实柱床，将液面降至距硅胶面5cm处，再将上述载有样品的硅胶加入到色谱柱的液面上，依次加入体积比为100:3、100:5、100:10梯度的本文档来自技高网...
桑辛素M‑3'‑O‑β‑D‑葡萄糖苷及其制备方法与应用' class='thumbnailBig' />

【技术保护点】
一种桑辛素M‑3'‑O‑β‑D‑葡萄糖苷，是从桑白皮中提取的有效活性部位，分子结构式为：

【技术特征摘要】
1.一种桑辛素M-3'-O-β-D-葡萄糖苷，是从桑白皮中提取的有效活性部位，分子结构式为：2.根据权利要求1所述的桑辛素M-3'-O-β-D-葡萄糖苷的制备方法，其特征在于，将桑白皮2.4kg每次用其重量8-12倍的蒸馏水煎煮提取3次，每次60min，合并提取液，减压浓缩得干燥物，加干燥物重量体积2-3倍的蒸馏水混悬，重量体积是指固体物以g计，液体以mL计，6000r/min离心除去不溶物，得上清液；取7.0LDiaionHP-20大孔吸附树脂填料，用质量浓度95％乙醇浸泡24h装柱，用蒸馏水洗至无醇味，上清液浓缩至50℃相对密度1.2-1.4，上树脂柱，依次用水、质量浓度30％乙醇洗脱，每个梯度洗脱液用量为10个柱体积，流速为2BVh-1，各个梯度洗脱液浓缩至干，得到30％乙醇洗脱组分和粗提物，加入50mL甲醇溶解，再加入过160-200目筛的硅胶40g，45℃减压回收甲醇，得到载有样品的硅胶；取过200-300目筛的硅胶500g，加入二氯甲烷800mL，转移到80cm长×8cm内径的色谱柱中，用二氯甲烷充实柱床，将液面降至距硅胶面5cm处，再将上述载有样品的硅胶加入到色谱柱的液面上，依次加入体积比为100:3、100:5、100:10梯度的二氯甲烷-甲醇，每个梯度4L，进行梯度洗脱，流速为10mL·min-1，每100mL作为1个流份收集，将收集的流份经过TLC分析，...

【专利技术属性】
技术研发人员：郑晓珂，克迎迎，曹彦刚，杨翠兰，袁培培，傅阳，杨方方，王小兰，冯卫生，
申请(专利权)人：河南中医药大学，
类型：发明
国别省市：河南,41