一种人参酶解物及其制备工艺和应用制造技术

本发明专利技术涉及中药技术领域，公开了一种人参酶解物及其制备工艺和应用。本发明专利技术所述制备工艺先提取人参，获得人参提取液，浓缩后调节pH值为酸性，获得人参浓缩液；向人参浓缩液中加入复合酶进行酶解，酶解后干燥获得人参酶解物；其中，所述复合酶为纤维素酶和选自果胶酶、半纤维素酶和β‑葡聚糖酶中一种或两种以上的酶。本发明专利技术通过适宜的酶组合以及酶解方式，对人参提取液进行了酶解处理，获得了特定皂苷成分组成的人参酶解物，对MDSC和结肠癌具有很好的抑制作用，同时与化疗药物联用对抑制结肠癌具备协同作用。

Ginseng enzyme hydrolysate and preparation process and application thereof

The invention relates to the technical field of traditional Chinese medicine, and discloses a ginseng enzyme hydrolysate, a preparation process and an application thereof. The preparation process of ginseng extract, ginseng extract obtained after concentration, the pH value is adjusted to obtain acid, ginseng extract; adding compound enzyme to ginseng extract by enzymatic hydrolysis, enzymolysis after drying ginseng hydrolysate; wherein, the composite enzyme for cellulase and pectinase, half from cellulase and beta glucanase in one or more than two kinds of enzymes. The present invention through the appropriate combination of enzymes, enzyme hydrolysis, the ginseng extract by enzymatic treatment, the ginseng saponins composition of specific enzyme hydrolysis, has a good inhibitory effect on MDSC and colon cancer, and chemotherapy combined with inhibition of colon cancer have synergistic effects.

【技术实现步骤摘要】
一种人参酶解物及其制备工艺和应用
本专利技术涉及中药
，具体涉及一种人参酶解物及其制备工艺和应用。
技术介绍
恶性肿瘤是严重威胁人类健康的重大疾病，目前肿瘤的常规治疗方法为手术切除、放疗和化疗，尽管取得了一些进展，但肿瘤复发和转移是困扰临床肿瘤治疗的具有普遍意义的难题。究其原因，在于现有治疗的目标仍然集中在肿瘤细胞本身，而忽略了其微环境的重要性。在体外活性药物能够识别肿瘤抗原并杀伤肿瘤细胞。然而，要消除机体内形成的肿瘤仅靠识别肿瘤抗原是不够的。一个成型的肿瘤是一个复杂的组织，它不仅由肿瘤细胞组成，还包括基质细胞，炎症细胞，脉管系统和细胞外基质(ECM)，所有这些总和定义为肿瘤微环境(TME)。肿瘤的发生和转移与肿瘤细胞所处的内外环境有着密切关系。它不仅包括肿瘤所在组织的结构、功能和代谢，而且亦与肿瘤细胞自身的(核和胞质)内在环境有关。肿瘤微环境与肿瘤细胞之间就像土壤与种子的关系，肿瘤细胞可以通过自分泌和旁分泌，改变和维持自身生存和发展的条件，促进肿瘤的生长和发展。全身和局部组织亦可通过代谢、分泌、免疫、结构和功能的改变，限制和影响肿瘤的发生和发展。肿瘤与环境，两者既是相互依存，相互促进，又是相互拮抗，相互斗争的。肿瘤恶变过程，就是肿瘤细胞与其微环境共进化的过程，其结果就是休眠肿瘤细胞的苏醒，进入快速增殖，并发生转移。因此，改善肿瘤微环境，维持肿瘤细胞的休眠状态，是目前研究的热点和重点。微环境是肿瘤研究前沿。免疫负调控研究为肿瘤治疗提供了新策略。肿瘤微环境中，存在着大量的负调控细胞，它们相互作用，相互影响，伴随着肿瘤细胞和微环境的共进化。由于肿瘤细胞的免疫原性改变和非正常生长，刺激成纤维细胞释放炎症因子，抗原提呈细胞传递肿瘤抗原信号，共同招募免疫细胞浸润到肿瘤局部，而且肿瘤细胞的异常增殖引起对邻近细胞的压迫，导致缺血坏死等组织损伤，产生大量的炎性因子，因此肿瘤局部处于非可控性炎症状态，导致微环境免疫负调控的形成，诱导髓源抑制性细胞(MDSC)的形成。其结果是抑制细胞毒性T细胞(CTL)、自然杀伤细胞(NK)的活性，维持肿瘤局部的免疫耐受状态。MDSC在肿瘤微环境中发挥了免疫抑制效应，抑制了杀伤性T细胞对肿瘤细胞的清除作用，因此目前MDSC成为肿瘤治疗的重要细胞靶点之一。MSC2细胞为MDSC细胞系中一种亚细胞，稳定，常用于诱导髓源抑制性细胞(MDSC)系列实施中，阐述相关机理。人参及其相关提取物、酶解物等具有抑制肿瘤细胞本身的活性，但是目前的现有技术中尚未有相关的产品可以作用于MDSC，并具有明显的抑制活性。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术的目的在于一种人参酶解物的制备工艺，使得所述制备工艺制备的人参酶解物对MDSC具有很好的抑制作用，进而有效改善肿瘤微环境。本专利技术的另外一个目的在于提供一种人参酶解物的制备工艺，使得所述制备工艺制备的人参酶解物对结肠癌具有明显的抑制作用，同时与化疗药物联用对抑制结肠癌具有协同作用。为实现上述专利技术目的，本专利技术提供如下技术方案：一种人参酶解物的制备工艺，提取人参，获得人参提取液，浓缩后调节pH值为酸性，获得人参浓缩液；向人参浓缩液中加入复合酶进行酶解，酶解后干燥获得人参酶解物；其中，所述复合酶为纤维素酶和选自果胶酶、半纤维素酶和β-葡聚糖酶中任意一种或两种以上的酶。本专利技术针对现有技术中缺乏能够抑制髓源抑制性细胞(MDSC)的人参提取物的问题，通过特殊的酶解工艺对人参提取液进行酶解，获得了对MDSC具有较好抑制作用的人参酶解物，解决了技术问题。作为优选，所述提取人参为通过水煎法提取人参。在具体实施方式中，所述提取人参的方法可参照如下：取人参药材，加入人参药材重量10-30倍水，提取1-3次、每次1.5-3小时，过滤，合并滤液，得人参提取液；或者取人参药材，粉碎，过60-120目筛，加入药材重量15-30倍水，煎煮1.5-3小时，得人参提取液。作为优选，所述调节pH值为酸性为调节pH值为4.0-6.5，可采用苹果酸、醋酸、柠檬酸中的一种调节，pH值可具体调节为4.0、4.5、5.0、5.5、6.0或6.5。作为优选，所述人参浓缩液与人参的液料比为5-15ml：1g。在本专利技术具体实施方式中，所述人参浓缩液与人参的液料比为5ml:1g、8ml:1g、9ml:1g、10ml:1g、11ml:1g、12ml:1g或15ml:1g。作为优选，所述复合酶和人参的质量比为0.01-0.14:1。在本专利技术具体实施方式中，所述复合酶和人参的质量比为0.01:1、0.04:1、0.05:1、0.07:1、0.08:1、0.12:1或0.14:1。作为优选，所述复合酶中各酶的质量相同，所采用的纤维素酶酶活为300-3000u/ml，果胶酶酶活为300-3000u/ml，半纤维素酶活为300-3000u/ml，β-葡聚糖酶酶酶活为3000-30000u/ml。作为优选，所述酶解为在40-70℃下酶解1-6天，更优选为酶解4-5天。在具体实施方式中，所述酶解为在55℃下酶解5天、在70℃下酶解6天、在40℃下酶解1天、在60℃下酶解5天、在55℃下酶解4天、在50℃下酶解3天或在45℃下酶解2天。本专利技术所述复合酶可一次性全部加入，但分次加入所获得的人参酶解物活性更佳，故作为优选，所述加入复合酶为将复合酶按重量份分成6等份，每隔4-24h加入一等份；在具体实施方式中，加入的间隔时间可以具体选择为4h、12h、16h、20h或24h。此外，在对酶解后的酶解物干燥前，本专利技术制备工艺还可包括加入辅料后再干燥；优选的所述辅料选自麦芽糊精、微晶纤维素、二氧化硅和淀粉中的一种或几种。经过本专利技术制备的人参酶解物，含水量低于8％，含有0.69-3.7wt％的人参总皂苷，所述人参总苷中含有5.2-11.4wt％的稀有皂苷；具体地，所述稀有皂苷由以下重量份比的物质组成：人参皂苷Rg31.7-3.2份、人参皂苷F10-1.9份、人参皂苷CK0.8-1.8份和人参皂苷Rh20-2.9份；进一步地，所述稀有皂苷由以下重量份比的物质组成：人参皂苷Rg32.1-2.9份、人参皂苷F11.2-1.9份、人参皂苷CK0.8-1.0份和人参皂苷Rh21.0-2.5份。同时，本专利技术制备的人参酶解物对MDSC具有很好的抑制作用，进而可有效改善肿瘤微环境，维持肿瘤细胞的休眠状态从而起到抗肿瘤作用。本专利技术人参酶解物对结肠癌CT26细胞具有很好的抑制作用，同时与化疗药物联用对结肠癌CT26肿瘤水鼠的肿瘤抑制效果优于单一用药选择，具备协同作用。由此，本专利技术提出了由所述制备工艺制备的人参酶解物，以及所述酶解物在制备髓源抑制性细胞(MDSC)抑制剂和/或制备治疗结肠癌药物中的应用。其中，所述治疗结肠癌药物包括所述人参酶解物和化疗药物。所述化疗药物选自广谱抗肿瘤药物。在实施例中，广谱抗肿瘤药物优选5-氟尿嘧啶，剂量为5毫克/公斤/天，皮下注射。本专利技术抗肿瘤人参酶解物可以添加医学或食品可接受的载体、赋形剂、赋形剂和/或填充剂，制成任何一种临床上或药学上可接受的剂型的药物可口服制剂。如可将其制成口服制剂，如常规的固体制剂如片剂、胶囊、软胶囊等；液体制剂如口服液，合剂、糖浆剂等；还可制成如注射剂等其他剂型。由以上技术方案可知，本专利技术通过适宜的酶组合以及本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种人参酶解物的制备工艺，其特征在于，提取人参，获得人参提取液，浓缩后调节pH值为酸性，获得人参浓缩液；向人参浓缩液中加入复合酶进行酶解，酶解后干燥获得人参酶解物；其中，所述复合酶为纤维素酶和选自果胶酶、半纤维素酶和β‑葡聚糖酶中任意一种或两种以上的酶。

【技术特征摘要】
1.一种人参酶解物的制备工艺，其特征在于，提取人参，获得人参提取液，浓缩后调节pH值为酸性，获得人参浓缩液；向人参浓缩液中加入复合酶进行酶解，酶解后干燥获得人参酶解物；其中，所述复合酶为纤维素酶和选自果胶酶、半纤维素酶和β-葡聚糖酶中任意一种或两种以上的酶。2.根据权利要求1所述制备工艺，其特征在于，所述提取人参为通过水煎法提取人参。3.根据权利要求2所述制备工艺，其特征在于，所述通过水煎法提取人参具体为：取人参药材，加入人参药材重量10-30倍水，提取1-3次、每次1.5-3小时，过滤，合并滤液，得人参提取液；或者取人参药材，粉碎，过60-120目筛，加入药材重量15-30倍水，煎煮1.5-3小时，得人参提取液。4.根据权利要求1所述制备工艺，其特征在于，所述调节pH值为酸性为调节pH值为4.0-6.5。5.根据权利要求1所述制备工艺，其特征在于，所述人参浓缩液与人参的液料比为5-15ml:1g。6.根据权利要求1所述制备工艺，其特征在于，所述复合酶和人参的质量比为0.01-0.14:1。7....

【专利技术属性】
技术研发人员：余庆涛，葛亚中，马忠华，秦垂新，
申请(专利权)人：无限极中国有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44