卷烟滤嘴中主流烟气杀菌剂截留量的高效液相‑串联质谱检测方法技术

本发明专利技术公开了一种卷烟滤嘴中主流烟气杀菌剂截留量的高效液相‑串联质谱检测方法，包括以下步骤：(1)在吸烟机对卷烟进行抽吸；(2)将滤嘴剪碎后放入离心管中，加入乙酸乙酯‑环己烷和内标液，振荡使至样品浸润；(3)加入固相萃取试剂，振荡后离心分离；(4)取上层清液至净化离心管中，振荡后离心分离；(5)取上层清液采用高效液相‑串联质谱法进行分析，条件为：色谱柱：C18液相色谱分析柱；柱温：25℃；进样量：10μL；流动相组成为水和乙腈的梯度混合物、流速为200uL/min；扫描方式：正离子扫描；监测方式：多反应监测；电喷雾电压：5500V；雾化气压力：0.414MPa；离子源温度：500℃。

High performance liquid cigarette filter in mainstream smoke germicide interception phase tandem mass spectrometric method

The invention discloses a high efficiency liquid in cigarette filter mainstream smoke germicide interception phase tandem mass spectrometric method, which comprises the following steps: (1) suction in cigarette smoking machine; (2) the tip cut into the centrifuge tube, adding ethyl acetate and cyclohexane internal standard solution, oscillation to make the sample infiltration; (3) adding solid phase extraction reagent, the oscillation after centrifugal separation; (4) the supernatant liquid to purify the centrifugal tube, oscillation after centrifugal separation; (5) taking the supernatant by high performance liquid chromatography tandem mass spectrometry analysis condition: chromatographic column: column liquid chromatography analysis C18; column temperature: 25 C; sample size: 10 L; the composition of the mobile phase velocity gradient, become mixture of water and acetonitrile as 200uL/min; scanning mode: positive ion scanning; monitoring: multiple reaction monitoring; electrospray voltage: 5500V; atomizing air pressure: 0. 414MPa; ion source temperature: 500 DEG C.

【技术实现步骤摘要】
卷烟滤嘴中主流烟气杀菌剂截留量的高效液相-串联质谱检测方法
本专利技术属于烟草化学分析
，具体涉及一种卷烟滤嘴对主流烟气粒相物中杀菌剂截留量的高效液相-串联质谱检测方法。
技术介绍
杀菌剂是用于防治由各种病原微生物引起的植物病害的一类农药，一般指杀真菌剂。但国际上，通常是作为防治各类病原微生物的药剂的总称。从控制作物病害的角度来说，目前杀菌剂有着其他物质无法替代的作用，杀菌剂的总体需求在持续增加，全球杀菌剂增长速度达到近8％，三唑类杀菌剂仍将是主角。为了防止烟叶为病虫害侵噬，保证烟叶产量，在烟叶的种植过程中也不可避免地使用了杀菌剂。目前，烟草中农药残留的问题已经越来越引起烟草界和全社会的关注。烟草作为一种特殊的消费品，是通过烟支燃烧形成烟气后进入人体消费，在此过程烟丝中的农药残留以一定的转移率转移到了烟气中。因此，单纯以烟叶中的农药残留限量来判断卷烟烟气的农药残留安全性是不准确的，必须明确烟叶中农药残留向主流烟气中的迁移情况，才能更准确评价卷烟烟气农药残留的安全性。卷烟滤嘴可以吸附卷烟主流烟气中的化学成分，但由于滤嘴的滤材差异，吸附效果也有差异。因此，建立一种卷烟滤嘴对主流烟气中杀菌剂截留量检测方法，对考察不同滤嘴对烟气中杀菌剂的截留效果有重要意义。目前，在烟草中使用的杀菌剂常见的测定方法有高效液相法、液相色谱法或者气质、高效液相电子捕获检测器和质谱联用检测法、高效液相火焰光度检测器检测法、液质联用法等，但评价的准确性有待提高。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供更加准确的评价卷烟烟气农药残留的安全性的方法。本专利技术采用乙酸乙酯-环己烷收集抽吸后的卷烟滤嘴，经基质分散固相萃取净化，用高效液相-串联质谱联用法测定滤嘴中截留到的杀菌剂的含量。经文献搜索，未发现与本
技术实现思路
相同文献的公开报道。本专利技术提供一种卷烟滤嘴对主流烟气中杀菌剂截留量的检测方法，以研究滤嘴对主流烟气中杀菌剂的截留情况。本专利技术提供一种卷烟滤嘴中主流烟气杀菌剂截留量的高效液相-串联质谱检测方法，包括以下步骤：(1)在吸烟机对卷烟进行抽吸；(2)取下步骤(1)卷烟上的滤嘴，将滤嘴外的成型纸和接装纸去除后，将滤嘴剪碎后放入离心管中，加入乙酸乙酯-环己烷和内标液，振荡使至样品浸润；(3)加入固相萃取试剂，振荡后离心分离；(4)取步骤(3)离心后的上层清液至净化离心管中，振荡后离心分离；(5)取步骤(4)离心后的上层清液采用高效液相-串联质谱法进行分析；(6)所述高效液相-串联质谱的条件为：色谱柱：C18液相色谱分析柱；柱温：25℃；进样量：10μL；流动相组成为水和乙腈的混合物、流速为200uL/min；扫描方式：正离子扫描；监测方式：多反应监测；电喷雾电压：5500V；雾化气压力：0.414MPa；离子源温度：500℃。优选地，所述的内标液为1ug/1000mL的丙草丹甲醇溶液。优选地，步骤(2)、(3)和(4)所述振荡的频率2500r/min，时间为6min。优选地，步骤(3)和(4)所述离心分离的转速为4000r/min，离心时间为10min。优选地，步骤(3)所述固相萃取试剂为质量比为2:1:8:2的柠檬酸钠、柠檬酸氢二钠、无水硫酸镁和氯化钠的混合物。优选地，步骤(4)所述净化离心管中含有质量比为1:1:2的N-丙基乙二胺、石墨化碳和无水硫酸镁的混合物。优选地，步骤(6)所述水和乙腈的梯度混合物为体积比90:10，50:50，50:50，40:60，20:80，5:95，5:98，90:10，90:10。本专利技术的优点在于：用基质分散固相萃取净化抽吸后卷烟滤嘴的提取液，采用高效液相-串联质谱联用法进行分析，实现滤嘴中杀菌剂截留量的检测。为研究滤嘴对主流烟气中杀菌剂的截留情况提供检测依据，更准确评价卷烟烟气农药残留的安全性。附图说明无具体实施方式下面对本专利技术的分析方法步骤作详细描述：a.在吸烟机上装上待测卷烟，参照中华人民共和国国家标准GB/T19609-2004《卷烟用常规分析用吸烟机测定总粒相物和焦油》，抽吸20支卷烟；b.卷烟抽吸完毕后，取下滤嘴，去除残留烟丝。将滤嘴外的成型纸和接装纸去除后剪碎滤嘴至长0.5cm，宽0.2cm，放入50mL离心管中，加乙酸乙酯-环己烷30mL，100uL内标液，2500r/min振荡6min至样品被乙酸乙酯-环己烷充分浸润；c.加入固相萃取试剂，包含1.0g柠檬酸钠、0.5g柠檬酸氢二钠、4.0g无水硫酸镁、1.0g氯化钠；置于漩涡混合振荡仪上以2500r/min速度振荡6min，然后以4000r/min离心10min；d.移取离心上清液2mL至净化离心管中，净化离心管中含50mg的N-丙基乙二胺、50mg石墨化碳、100mg无水硫酸镁，置于漩涡混合振荡仪上以2500r/min振荡6min，然后以10000r/min离心2min，取上清液1mL经0.22μm滤膜过滤，之后采用高效液相-串联质谱法进行分析。e.高效液相-串联质谱的条件为：色谱柱：C18液相色谱分析柱；柱温：25℃；进样量：10μL；流动相组成为水和乙腈的梯度混合物、流速为200uL/min；扫描方式：正离子扫描；监测方式：多反应监测；电喷雾电压：5500V；雾化气压力：0.414MPa；离子源温度：500℃。仪器与试剂WatersAcquityUPLC超高效液相色谱仪(美国Waters公司)，AB3200QTrap串联质谱仪(美国ABSciex公司)，Talboys多管旋涡混合仪(美国Talboys公司)，Millipore超纯水机(美国Millipore公司)，Eppendorf5804台式离心机(德国Eppendorf公司)。乙腈、甲醇：色谱级，购自美国Tiade公司；乙酸乙酯、环己烷：购自dikma公司；农药标准物质丙草丹，用作内标物质，纯度≥95％：购自Dr.Ehrenstorfer公司；固相萃取试剂：提取试剂包含1.0g柠檬酸钠、0.5g柠檬酸氢二钠、4.0g无水硫酸镁、1.0g氯化钠；净化离心管含50mg的N-丙基乙二胺、50mg石墨化碳、100mg无水硫酸镁，购自美国Agilent公司。具体实验步骤将待测市售卷烟，在GB/T16447-2004规定的烟草及烟草制品调节和测试的大气环境条件下平衡48h，经分选后，用符合ISO30008要求的吸烟机，在常规分析用吸烟机标准条件(1口/分钟，2秒/口，35.0mL/口)下抽吸。卷烟抽吸完毕后，取下滤嘴，去除残留烟丝。将滤嘴外的成型纸和接装纸去除后剪碎滤嘴至长0.5cm，宽0.2cm，放入50mL离心管中，加乙酸乙酯-环己烷30mL，100uL内标液，2500r/min振荡6min至样品被乙酸乙酯-环己烷充分浸润、提取。用固相萃取试剂进行净化。加入固相萃取试剂充分混合(置于漩涡混合振荡仪上以2500r/min振荡6min)，然后以4000r/min离心10min；移取离心上清液2mL至净化离心管中,于漩涡混合振荡仪上以2500r/min振荡6min，然后以10000r/min离心2min，取上清液1mL经0.22μm滤膜过滤，得到待检测液。测定条件——色谱柱：C18液相色谱分析柱(柱长150mm，内径2.1mm，固定相粒径3μm)或相当者；——柱温：25℃；——进样量：10本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种卷烟滤嘴中主流烟气杀菌剂截留量的高效液相‑串联质谱检测方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)在吸烟机对卷烟进行抽吸；(2)取下步骤(1)卷烟上的滤嘴，去除滤嘴外的成型纸和接装纸，将滤嘴剪碎后放入离心管中，加入乙酸乙酯‑环己烷和内标液，振荡使至样品浸润；(3)加入固相萃取试剂，振荡后离心分离；(4)取步骤(3)离心后的上层清液至净化离心管中，振荡后离心分离；(5)取步骤(4)离心后的上层清液采用高效液相‑串联质谱法进行分析；(6)步骤(5)所述高效液相‑串联质谱的条件为：色谱柱：C18液相色谱分析柱；柱温：25℃；进样量：10μL；流动相组成为水和乙腈的梯度混合物、流速为200uL/min；扫描方式：正离子扫描；监测方式：多反应监测；电喷雾电压：5500V；雾化气压力：0.414MPa；离子源温度：500℃。

【技术特征摘要】
2016.11.13 CN 20161104954951.一种卷烟滤嘴中主流烟气杀菌剂截留量的高效液相-串联质谱检测方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)在吸烟机对卷烟进行抽吸；(2)取下步骤(1)卷烟上的滤嘴，去除滤嘴外的成型纸和接装纸，将滤嘴剪碎后放入离心管中，加入乙酸乙酯-环己烷和内标液，振荡使至样品浸润；(3)加入固相萃取试剂，振荡后离心分离；(4)取步骤(3)离心后的上层清液至净化离心管中，振荡后离心分离；(5)取步骤(4)离心后的上层清液采用高效液相-串联质谱法进行分析；(6)步骤(5)所述高效液相-串联质谱的条件为：色谱柱：C18液相色谱分析柱；柱温：25℃；进样量：10μL；流动相组成为水和乙腈的梯度混合物、流速为200uL/min；扫描方式：正离子扫描；监测方式：多反应监测；电喷雾电压：5500V；雾化气压力：0.414MPa...

【专利技术属性】
技术研发人员：曾婉俐，李雪梅，杨叶昆，宋春满，米其利，陈建华，向明，田丽梅，
申请(专利权)人：云南中烟工业有限责任公司，
类型：发明
国别省市：云南,53