禽霍乱凝集抗原的制备方法技术

一种用于生物工程领域的禽霍乱凝集抗原的制备方法，本发明专利技术步骤如下：１）将禽多杀性巴氏杆菌ＣＶＣＣ４５８复苏后连续传代接种鸡胚，分离鉴定细菌作菌种；２）将菌种接种于改良马丁肉汤培养液中，悬浮振荡培养无杂菌后，加入福尔马林，振荡处理进行灭活，无菌检验后，将菌液用磷酸盐缓冲液洗菌体；３）将菌体进行酸处理，用磷酸盐缓冲液或盐酸生理盐水稀释成悬液，水浴，水浴中间轻摇数次，离心弃上清，用磷酸盐缓冲液洗菌体，以生理盐水配成悬液；４）将上述酸处理菌体进行乙二胺四乙酸盐处理，用生理盐水配成悬液，即为禽霍乱凝集抗原。本发明专利技术制备的禽霍乱凝集原具有高度的特异性、敏感性和稳定性，方法简便，适用于平板凝集、试管凝集与微量板凝集试验。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及的是一种生物活性物质的制备方法，具体地说，是一种。用于生物工程领域。
技术介绍
目前，禽霍乱的预防均采用疫苗进行预防接种。对鸡群免疫水平的检测一般采用凝集试验，包括试管凝聚、平板凝聚和微量板凝聚，采用的抗原均为巴氏杆菌灭活抗原，该抗原敏感性较差。多杀性巴氏杆菌CVCC458是《中国菌种目录》在编菌种(英文版，1992年10月机械工业出版社出版，中国微生物菌种保藏管理委员会编著)，中国兽医微生物保藏中心作为中国微生物菌种保藏管理委员会下设机构保证常年为国内外教学、科研、生产单位提供《中国菌种目录》中的微生物，列入《中国菌种目录》的微生物将长期保存，一直对外供应，公众能从中国兽医微生物保藏中心买到的微生物菌种(CVCC中国兽医微生物保藏中心，该中心20多年来为生产、科研、教学提供了6万多株各类兽医微生物菌种)。多杀性巴氏杆菌是禽霍乱的病源，能引起感染禽的急性死亡，死亡率可达100％。CVCC458是列入《中国菌种目录》的微生物，1987年从发病鸡中分离，血清型A组。经对现有技术的文献检索发现，在白文斌等人主编的中国农业出版社2002年12月出版的《动物传染病诊断学》的第本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种禽霍乱凝集抗原的制备方法，其特征在于，具体步骤如下：１）将禽多杀性巴氏杆菌ＣＶＣＣ４５８复苏后连续传代接种鸡胚，分离鉴定细菌；２）将菌种接种于改良马丁肉汤培养液中，悬浮振荡培养无杂菌后，加入福尔马林，振荡处理进行灭活，无 菌检验后，将菌液用磷酸盐缓冲液洗菌体；３）将菌体进行酸处理，用磷酸盐缓冲液或盐酸生理盐水稀释成悬液，水浴，水浴中间轻摇数次，离心弃上清，用磷酸盐缓冲液洗菌体，以生理盐水配成悬液；４）将上述酸处理菌体进行乙二胺四乙酸盐处理，用 生理盐水配成悬液，即为禽霍乱凝集抗原。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：刘永德，汪毅，叶陈梁，吴祖立，
申请(专利权)人：上海交通大学，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]