一种中药注射剂颜色定量检测方法技术

本发明专利技术公开一种中药注射剂颜色定量检测方法，所述检测方法包括以下步骤：步骤1)将中药注射剂制备成溶液，如果是中药注射液则直接进行步骤(2)；步骤2)将中药注射剂溶液或中药注射液加入到多孔板或比色皿中；置于酶标仪或分光光度计扫描设定波长范围内的吸收光谱；步骤3)计算吸收光谱曲线下面积，将曲线下面积与对照品或规定值进行比较，进行结果判断。本发明专利技术将中药注射剂中的颜色性状描述变得准确客观，既可以采用全部紫外‑可见区吸收光谱曲线下面积进行判断，也可采用含部分紫外区的吸收曲线下面积进行判断。本发明专利技术为中药注射剂颜色性状的检查提供了准确方法，特别适用中药注射剂颜色性状检查。

Color quantitative detection method for Chinese medicine injection

The invention discloses a method for detecting quantitative injection of traditional Chinese medicine color, the detection method comprises the following steps: 1) the preparation of traditional Chinese medicine injections into solution, if it is a traditional Chinese medicine injection directly step (2); step 2) injection of traditional Chinese medicine or traditional Chinese medicine injection solution will be added to the porous plate or cuvette placed; microplate or scanning spectrophotometer set the absorption spectra in the wavelength range; step 3) calculation of absorption spectra of the area under the curve, the area under the curve with the standard or specified value, to judge the results. The present invention will be described in the color character of traditional Chinese medicine injections become accurate and objective, can use all of the UV visible absorption spectra area under the curve to judge, but also can be used with ultraviolet absorption curve of the area under the judge. The invention provides an accurate method for checking the color characteristics of Chinese medicine injections, and is especially suitable for examining the color characteristics of Chinese medicine injections.

【技术实现步骤摘要】
一种中药注射剂颜色定量检测方法
本专利技术涉及中药检测
，尤其涉及一种中药注射剂颜色定量检测方法。
技术介绍
中药注射剂最早产生于上世纪四十年代，由钱信忠等学者开创，现已广泛应用于临床。经过近百年的发展，高峰时最多有近800个品种，经市场和临床筛选淘汰，目前有批文可以上市的中药注射剂约142个品种，是我国医药市场独特的一个组成部分。我国从1977年版《中华人民共和国药典》(简称《药典》)起，就一直收录有中药注射剂品种。中药注射剂能提升药效、使某些中药的疗效得到更好地发挥，在推进中药剂型发展，拓展中药的应用范围，服务广大人民健康等方面的确功不可没。从第一支中药注射剂柴胡注射液的专利技术至今，中药注射剂大体经历了诞生、发展、整顿、提高的阶段。从技术上来讲，业界大体上已经解决了中药注射剂的有效性问题(尽管作用机制尚不完全清除)，安全性依然是业界难题。随着中药注射剂的广泛应用，不良反应不断发现，甚至致死性不良反应也屡有报道。前几年发生的“清开灵注射液事件”、“双黄连注射液事件”、“鱼腥草注射液事件”等说明中药注射剂的安全性不容忽视，受到业界甚至公众的广泛关注。目前中药注射剂处于一个严控阶段，国家层面逐步启动了中药注射剂再评价活动，许多专家也在大力呼吁还应推动中药注射剂“再提高”。中药注射剂按所含成分的复杂程度，可分为单体成分注射剂(如灯盏花素注射液)、有效部位注射剂(如血塞通注射液和柴胡注射液)、单方注射剂(如丹参注射液)和复方注射液(清开灵注射液)；其中单方注射剂和复方注射剂具有中药总提取物的特征，既是反映中药用药、配伍理论的代表性剂型，也是问题较多较严重的剂型。已有的资料表明，中药注射剂的成分越复杂，不良反应也越复杂。对于静脉用中药注射剂而言，产生重大安全性事件的几乎都是成分复杂的注射液，如刺五加注射液、双黄连注射液、鱼腥草注射液等，几乎未见单体成分注射液的严重不良反应。在实际工作中，也的确发现，成分越复杂的中药注射剂，颜色往往越深，而单方和复方制剂往往颜色较深，为棕红色或棕黄色等，参见表1。颜色性状是中药注射剂的重要内容，但各种质量标准的描述都较为宏观，不甚准确。即使部分制剂有针对该性状描述的检查内容，也是用标准色卡进行肉眼比对或只用仪器进行单波长检查。因此，在质量标准的实际执行中，要么覆盖面不全，要么存在很大的主观误差，导致这种性状描述几乎无实际性的执行力。表1药注射剂质量标准中的颜色描述(部分)因此，中药注射剂颜色性状的描述一直是中药注射剂质量检查的短板，特别是具有总提取物特征的单方、复方制剂，其颜色性状表述在质量标准里也是五花八门(见表1)。安全性问题目前已成为中药注射剂社会广为关注的问题，由于中药注射剂的颜色性状是内在物质的综合反映，重视该性状的定量描述和客观定量检查有利于提升中药注射剂的内在质量标准，监控其内在质量变化。实践证明，过期失效的中药注射剂颜色较深，变色(主要是颜色加深)也是中药注射剂重要的早期变质表现；但这种表现一直被学术界和技术界忽视。
技术实现思路
针对现有技术的不足，本专利技术提供了一种中药注射剂颜色定量检测方法。本专利技术既可以采用全部紫外-可见区吸收光谱曲线下面积进行判断，也可采用包含部分紫外区特定波长区的吸收曲线下面积进行判断。本专利技术为中药注射剂颜色性状的检查提供了准确方法，特别适用于具有总提取物特征的单方、复方中药注射剂颜色性状检查。本专利技术的技术方案如下：一种中药注射剂颜色定量检测方法，其特征在于，所述检测方法包括以下步骤：步骤1)将中药注射剂制备成溶液，如果是中药注射液则直接进行步骤(2)；所述中药注射剂为具有总提取物特征的单方或复方中药注射液或注射用粉针剂。步骤2)将中药注射剂溶液或中药注射液加入到多孔板或比色皿中；置于酶标仪或分光光度计扫描设定波长范围内的吸收光谱；为了避免饱和吸收，可以将中药注射剂溶液或中药注射液稀释1-128倍。所述的多孔板为平底紫外透明96孔板或384孔板。所述波长范围为200-800nm的部分或全部波长并同时至少包含部分紫外区波长，步进波长为0.5-2nm。200-800nm包括紫外光和可见光的波长范围。可以根据实验需要进行选择波长范围，如选择400-800nm的可见光、200-400nm的紫外光、或者既包含紫外光又包含可见光的200-600nm，使用包含紫外区的波长范围检测效果更好。步骤3)计算吸收光谱曲线下面积；将曲线下面积与对照品或规定值进行比较，进行结果判断。结果判断中，对以总提取物为特征的中药注射剂，规定波长范围内的吸收光谱曲线下面积大于对照品或规定值应判定为不符合要求。具体的规定值根据中药注射剂品种视情况确定。结果判断中，对以单体成分或活性部位为特征的中药注射剂，活性成分主吸收区的吸收光谱曲线下面积小于对照品或规定值应判定为不符合要求；而非活性成分主吸收区的吸收光谱曲线下面积大于对照品或规定值应判定为不符合要求。规定值由根据中药注射剂品种视情况的情况确定。《药典》中有规定采用单波长比色的方法检测中药注射液颜色的方法，由于中药注射剂所含成分复杂，往往在可见区波长区缺乏具有特征性的吸收波长，这种检测往往比较片面。《药典》也有用标准色卡肉眼比对的检查方法，但肉眼色卡比对的主观误差较大，结果准确率不高。为解决上述问题，本专利技术利用吸收曲线下面积的原理，定量检查中药注射剂的颜色。将中药注射剂制备成规定体积的液体，如果已是中药注射液则可以直接用于检查。检查时，将中药注射剂溶液置于紫外透明容器，如96孔板或比色皿中，在200-800nm扫描吸光度(光经为1cm时)或光密度(多孔板检测，光经不为1cm时)，计算溶液200-800nm下的吸收曲线下面积。对于具有总提取物特征的单方或复方中药注射剂而言，颜色加深是反映中药注射剂稳定性下降、变质的重要指标，因此可与对照溶液或规定值进行比较，当吸收光谱曲线下面积大于一定值时可以判定该注射剂的颜色性状不符合要求。对于以单体成分或有效部位为特征的中药注射剂而言，当活性成分的主吸收区吸收光谱曲线下面积低于一定值，或非活性成分吸收区的吸收光谱曲线下面积超出一定值则可以明确判定颜色性状不符合要求。与现有技术相比，本专利技术具有以下有益效果：本专利技术提供的方法检测出的颜色结果更加客观，更加准确，特别适用于中药注射剂颜色性状检查。由于该方法简便，也可作为中药注射剂内在质量变化的快速筛查方法。本专利技术也可以用于中药液体制剂的颜色性状检查，将中药固体制剂溶解稀释后也可用本专利技术检查其颜色性状。鉴于中药注射剂的安全性问题较为突出，为增强本专利技术的针对性，故以中药注射剂为主要保护范围。附图说明图1去大分子和富含大分子的中药注射剂。Q、S、D、Dz分别为清开灵注射液、双黄连注射液、灯盏细辛注射液和丹参注射液。1-3分别表示经3k、10k和30k分子筛处理后获得的去大分子注射液；4为中药注射剂原液；5-7分别表示经3k、10k和30k分子筛处理后获得的富含大分子注射液，大分子物质得到10倍富集。图2清开灵注射液原液未烘烤和60℃烘烤后的可见吸收光谱。Q0是烘烤前的吸收光谱，Q15和Q30分别是烘烤15、30天的吸收光谱。图3清开灵注射液原液未烘烤(0D)和60℃烘烤15天(15D)和30天(30D)后的可见吸收光谱曲线下面积(400-800本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种中药注射剂颜色定量检测方法，其特征在于，所述检测方法包括以下步骤：步骤1)将中药注射剂制备成中药注射剂溶液，如果是中药注射液则直接进行步骤(2)；步骤2)将中药注射剂溶液或中药注射液加入到多孔板或比色皿中，置于酶标仪或分光光度计扫描设定波长范围内的吸收光谱；步骤3)计算吸收光谱曲线下面积，将曲线下面积与对照品或规定值进行比较，进行结果判断。

【技术特征摘要】
1.一种中药注射剂颜色定量检测方法，其特征在于，所述检测方法包括以下步骤：步骤1)将中药注射剂制备成中药注射剂溶液，如果是中药注射液则直接进行步骤(2)；步骤2)将中药注射剂溶液或中药注射液加入到多孔板或比色皿中，置于酶标仪或分光光度计扫描设定波长范围内的吸收光谱；步骤3)计算吸收光谱曲线下面积，将曲线下面积与对照品或规定值进行比较，进行结果判断。2.如权利要求1所述的中药注射剂颜色定量检测方法，其特征在于，步骤1)所述中药注射剂为中药单方或复方总提取物制备的中药注射液或注射用粉针剂。3.如权利要求1所述的中药注射剂颜色定量检测方法，其特征...

【专利技术属性】
技术研发人员：段为钢，殷华，张祎，吕小满，李月，段金连，王明明，白雯，
申请(专利权)人：云南中医学院，
类型：发明
国别省市：云南,53