人抑癌基因及其编码的蛋白质制造技术

本发明专利技术公开了人抑癌基因、由其编码的蛋白质、包含该基因的表达载体以及用该载体转化的微生物。本发明专利技术的抑癌基因可以有效地用于诊断、预防和治疗人类癌症。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及一种人抑癌基因、其编码的蛋白质、包含该基因的表达载体及用该载体转化的细胞。
技术介绍
抑癌基因产物起到抑制正常细胞转化成某种癌细胞的作用，因此抑癌基因产物这种功能的丧失使正常细胞变为恶性转化体(Klein，G，FASEB J.，7，821-825(1993))。为了使癌细胞发展成癌症，细胞应该丧失控制抑癌基因正常拷贝数的功能。发现p53抑癌基因的编码序列中的变异是人类癌症中最普遍的基因变异之一(Bishop，J.M.，Cell，64，235-248(1991)；和Weinberg，R.A.，Science，254，1138-1146(1991))。 然而，因为乳腺癌中报道的p53突变总计在总的乳腺癌的30％的范围内，所以推测只有一些乳腺癌组织表现出p53突变(Keen，J.C. & Davidson，N.E.，Cancer，97，825-833(2003))和Borresen-Dale，A-L.，Human Mutation，21，292-300(2003))。而且，因为白血病中报道的p53突变总计在总的白血病的20％的范围内，所以推测只有一些白血病组织表现出p53突变(Boyapati，A.，等人，Acta Haematol.，111(1-2)，100-106(2004))。 p53突变占肝癌的至少50％，尤其是在遭受黄曲酶毒素B1的或具有高频率的乙型病毒感染的区域，其主要特征是p53癌基因中密码子249的错义突变(Montesano，R.等人，J.Natl.Cancer Inst.，89，1844-1851(1997)；Szymanska，K.& Hainaut，P.Acta Biochimica Polonica，50，231-238(2003))。然而，据报道在美国和西欧p53突变总计只在肝癌的30％的范围内，这里没有这种突变频繁发生的热点(Szymanska，K. & Hainaut，P.Acta Biochimica Polonica，50，231-238(2003))。 同时，因为子宫颈癌中报道的p53突变总计只在总的子宫颈癌的2～11％的范围内，所以推测只有一些子宫颈癌组织表现出p53突变(Crook，T.等人，Lancet，339，1070-1073(1992)；和Busby-Earle，R.M.C.等人，Br.j.Cancer，69，732-737(1994))。 而且，据报道非小细胞肺癌和小细胞肺癌中p53抑癌基因的突变频率总计分别占总的肺癌的约50％和70％(Takahashi，T.等人，Science，246，491-4941989；Bodner，S.M.等人，Oncogene，7，743-749(1992)；Mao，L.Lung Cancer，34，S27-S34(2001))。吸烟是肺癌发病和扩展的最关键因素之一，除了p53之外，其它多种抑癌基因和癌基因共同与肺癌的发病和扩展相关(Osada，H. &Takahashi，T.Oncogene，21，7421-7434(2002))。 因此，本专利技术人已积极尝试通过mRNA差异显示(DD)法从如乳腺、肝、子宫颈、肺等的正常组织中分离新的抑癌基因，mRNA差异显示(DD)法用于更有效地显示如乳腺、肝、子宫颈和肺的正常组织和如乳腺癌、肝癌、子宫颈癌和肺癌的癌组织之间的基因差异性表达(Liang，P.和Pardee，A.B.，Science，257，967-971(1992)；以及Liang，P.等人，Cancer Res.，52，6966-6968(1993))。
技术实现思路
为此，本专利技术企图解决现有技术的问题，因此本专利技术的一个目的是提供一种新的人抑癌基因。 本专利技术的另一个目的是提供由所述抑癌基因编码的抑癌蛋白。 本专利技术的又一个目的是提供包含所述抑癌基因的表达载体。 为实现上述目的之一，本专利技术提供一种具有选自由SEQ ID NO1、SEQID NO5、SEQ ID NO9、SEQ ID NO13、SEQ ID NO17、SEQ ID NO21、SEQ ID NO25、SEQ ID NO29、SEQ ID NO33、SEQ ID NO37、SEQ ID NO41、SEQ ID NO45、SEQ ID NO49、SEQ ID NO53、SEQ ID NO57、SEQID NO61、SEQ ID NO65、SEQ ID NO69、SEQ ID NO73、SEQ ID NO77、SEQ ID NO81、SEQ ID NO85、SEQ ID NO89、SEQ ID NO93、SEQ ID NO97、SEQ ID NO101、SEQ ID NO105、SEQ ID NO109和SEQ ID NO113组成的组中的DNA序列的人抑癌基因。 根据本专利技术的另一个上述目的，本专利技术提供一种具有选自由SEQ ID NO2、SEQ ID NO6、SEQ ID NO10、SEQ ID NO14、SEQ ID NO18、SEQ IDNO22、SEQ ID NO26、SEQ ID NO30、SEQ ID NO34、SEQ ID NO38、SEQ ID NO42、SEQ ID NO46、SEQ ID NO50、SEQ ID NO54、SEQ ID NO58、SEQ ID NO62、SEQ ID NO66、SEQ ID NO70、SEQ ID NO74、SEQID NO78、SEQ ID NO82、SEQ ID NO86、SEQ ID NO90、SEQ ID NO94、SEQ ID NO98、SEQ ID NO102、SEQ ID NO106、SEQ ID NO110和SEQID NO114组成的组中的氨基酸序列的人抑癌蛋白。 根据又一个上述目的，本专利技术提供一种包含所述抑癌基因的表达载体。 根据再一个上述目的，本专利技术提供一种用所述表达载体转化的细胞。 附图说明 结合附图，在下面详细描述中更充分地描述本专利技术的优选实施方式的这些和其它特征、技术方案及优点。在附图中 图1为示出使用SEQ ID NO3的5′-13-mer随机引物H-AP33和SEQ IDNO4的oligo-dT锚定引物的PCR结果的凝胶图； 图2为示出使用SEQ ID NO7的5′-13-mer随机引物H-AP10和SEQ IDNO8的oligo-dT锚定引物的PCR结果的凝胶图； 图3为示出使用SEQ ID NO11的5′-13-mer随机引物H-AP5和SEQ IDNO12的oligo-dT锚定引物的PCR结果的凝胶图； 图4为示出使用SEQ ID NO15的5′-13-mer随机引物H-AP2和SEQ IDNO16的oligo-dT锚定引物的PCR结果的凝胶图； 图5为示出使用SEQ ID NO19的5′-13-mer随机引物H-AP8和SEQ IDNO20的oligo-dT锚定引物的PCR结果的凝胶图； 图6为示出使用SEQ ID NO23的5′-13-mer随机引物H-AP7和SEQ IDNO24的oligo-dT锚定引物的PCR结果的凝胶图； 图7为示出使用SEQ ID NO27的5′-1本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种人抑癌蛋白，其具有选自由ＳＥＱ　　ＩＤ　　ＮＯ：２、ＳＥＱ　　ＩＤ　　ＮＯ：６、ＳＥＱ　　ＩＤ　　ＮＯ：１０、ＳＥＱ　　ＩＤ　　ＮＯ：１４、ＳＥＱ　　ＩＤ　　ＮＯ：１８、ＳＥＱ　　ＩＤ　　ＮＯ：２２、ＳＥＱ　　ＩＤ　　ＮＯ：２６、ＳＥＱ　　ＩＤ　　ＮＯ：３０、ＳＥＱ　　ＩＤ　　ＮＯ：３４、ＳＥＱ　　ＩＤ　　ＮＯ：３８、ＳＥＱ　　ＩＤ　　ＮＯ：４２、ＳＥＱ　　ＩＤ　　ＮＯ：４６、ＳＥＱ　　ＩＤ　　ＮＯ：５０、ＳＥＱ　　ＩＤ　　ＮＯ：５４、ＳＥＱ　　ＩＤ　　ＮＯ：５８、ＳＥＱ　　ＩＤ　　ＮＯ：６２、ＳＥＱ　　ＩＤ　　ＮＯ：６６、ＳＥＱ　　ＩＤ　　ＮＯ：７０、ＳＥＱ　　ＩＤ　　ＮＯ：７４、ＳＥＱ　　ＩＤ　　ＮＯ：７８、ＳＥＱ　　ＩＤ　　ＮＯ：８２、ＳＥＱ　　ＩＤ　　ＮＯ：８６、ＳＥＱ　　ＩＤ　　ＮＯ：９０、ＳＥＱ　　ＩＤ　　ＮＯ：９４、ＳＥＱ　　ＩＤ　　ＮＯ：９８、ＳＥＱ　　ＩＤ　　ＮＯ：１０２、ＳＥＱ　　ＩＤ　　ＮＯ：１０６、ＳＥＱ　　ＩＤ　　ＮＯ：１１０和ＳＥＱ　　ＩＤ　　ＮＯ：１１４组成的组中的氨基酸序列。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：金弦起，金振宇，
申请(专利权)人：金弦起，
类型：发明
国别省市：KR[韩国]