一种基于磷酸钙-PEG的质粒转染的方法技术

本发明专利技术提供了一种基于磷酸钙-PEG的质粒转染方法，该方法中使用PEG能够增强DNA-磷酸钙复合物形成的稳定性，提高磷酸钙转染法的转染效率。

Plasmid transfection method based on calcium phosphate -PEG

The invention provides a plasmid transfection method based on calcium phosphate -PEG, in which PEG can enhance the stability of DNA- calcium phosphate complex formation and improve the transfection efficiency of the calcium phosphate transfection method.

【技术实现步骤摘要】
一种基于磷酸钙-PEG的质粒转染的方法
本专利技术属于生物
，具体地说，本专利技术涉及一种基于磷酸钙-PEG的质粒转染的方法。
技术介绍
磷酸钙法转染法是实验室广泛使用一种转染哺乳动物细胞的方法。DNA与磷酸钙形成复合物，粘附到细胞表面，通过细胞内吞作用将DNA摄入细胞内。它具有方便，廉价，细胞毒性小等优点，同时也存在明显局限性。磷酸钙转染法操作时受到多种因素的影响，使得转染效率非常不稳定，不同的实验室选择用磷酸钙转染法时通常需要花很大精力优化转染体系，费时费力。聚乙二醇(polyethyleneglycol，PEG)在医药化工领域广泛使用一种辅料，在实验中常用于做细胞融合，原生质体转染。4％-6％的PEG溶液能促进微粒之间的聚合，增强微粒的稳定性。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种基于磷酸钙-PEG的质粒转染的方法。本专利技术人意外地发现，使用PEG能够增强DNA-磷酸钙复合物形成的稳定性，提高磷酸钙转染法的转染效率。本专利技术的第一方面提供了一种基于磷酸钙-PEG的质粒转染方法，所述方法包括步骤：(1)配制PEG-DNA溶液在1ml2％-6％(w/v)的PEG溶液中加本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种基于磷酸钙‑PEG的质粒转染方法，其特征在于，所述方法包括步骤：(1)配制PEG‑DNA溶液在1ml 2％‑6％(w/v)的PEG溶液中加入5‑15μg质粒DNA(待转染质粒)，混匀制得PEG‑DNA溶液；(2)PEG‑DNA氯化钙溶液配制1ml PEG‑DNA溶液中加入40‑80μl 2M CaCl

【技术特征摘要】
1.一种基于磷酸钙-PEG的质粒转染方法，其特征在于，所述方法包括步骤：(1)配制PEG-DNA溶液在1ml2％-6％(w/v)的PEG溶液中加入5-15μg质粒DNA(待转染质粒)，混匀制得PEG-DNA溶液；(2)PEG-DNA氯化钙溶液配制1mlPEG-DNA溶液中加入40-80μl2MCaCl2溶液，配制成PEG-DNA氯化钙溶液。(3)PEG‐磷酸钙转染复合物配制在离心管中加入1ml2×HBS溶液，逐滴加入所述PEG-DNA氯化钙溶液，配制成PEG-磷酸钙转染复合物；(4)细胞转染将转染复合物加入细胞培养...

【专利技术属性】
技术研发人员：桑伟健，
申请(专利权)人：上海麒盟生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：上海,31