5α,8α-环二氧-24-二甲基胆甾-6-烯-3β-醇及其苷和酯、其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了从海鞘中提取分离得到的结构式如下式所示的５α，８α－环二氧－２４－二甲基胆甾－６－稀－３β－醇及其苷类、酯类，式中Ｒ可为氢原子、葡萄糖、鼠李糖、木糖、阿拉伯糖、醋酸根、硝酸根、硫酸根的其中一种。本发明专利技术还公开了该类化合物的制备方法和作为抗癌和抗病毒药物的应用。含有本发明专利技术化合物的药物体内体外均具有很强的抗肿瘤活性和抗病毒活性。葡萄糖基；鼠李糖基；阿拉伯糖基；木糖基；硫酸根；硝酸根；醋酸根。（*该技术在2020年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】,8α－环二氧－24－二甲基胆甾－6－稀－3β－醇及其苷类、酯类的制备方法和应用的制作方法
本专利技术涉及一种从海鞘中提取分离得到的，8α-环二氧-24-二甲基胆甾-6-稀-3β-醇及其苷类、酯类及其制备方法和其作为抗病毒、抗癌药物的应用。海鞘(Tunicate)是海洋生物中特有的一类与脊椎动物非常类似的原索动物，因其在分类学上占有特殊的地位，早已成为仿生生物、免疫化学和生理学的极好的研究材料。自80年代以来，国外学者陆续从海鞘中分离出吲哚、环肽、生物碱、含氮大环内酯等多种新的化合物，并发现具有抗病毒、抗癌等多种生理活性，且毒性较低。海鞘在我国资源相当丰富，主要分布在渤海、黄海、东海、南海等海域，在我国已经记载有66种，优势品种主要有柄海鞘(Styelaclava)、玻璃海鞘(Ciona intestinalis)等。但我国对海鞘的研究开发还进行得不是很充分。本专利技术的目的是通过对海鞘的系统和充分的研究，从中提取分离出可作为抗病毒、抗癌药物的，8α-环二氧-24-二甲基胆甾-6-稀-3β-醇及其苷类、酯类。本专利技术的第二个目的是提供从海鞘中提取分离得到，8α-环二氧-24-二甲基胆甾-6-稀-3β-醇及其苷类、酯类的方法。本专利技术的第三个目的是开发，8α-环二氧-24-二甲基胆甾-6-稀-3β-醇及其苷类、酯类作为抗病毒、抗癌药物的应用。本专利技术从海鞘中提取分离得到了结构式如下式，8α-环二氧-24-二甲基胆甾-6-稀-3β-醇及其苷类、酯类， 式中R可为氢原子、葡萄糖、鼠李糖、木糖、阿拉伯糖、醋酸根、硝酸根、硫酸根的其中一种。按照本专利技术的，8α-环二氧-24-二甲基胆甾-6-稀-3β-醇，其中，式中R为氢原子。按照本专利技术的，8α-环二氧-24-二甲基胆甾-6-稀-3β-醇及其苷类，其中，式中R可为葡萄糖、鼠李糖、木糖、阿拉伯糖的其中一种。按照本专利技术的，8α-环二氧-24-二甲基胆甾-6-稀-3β-醇及其酯类，其中，式中R可为醋酸根、硝酸根、硫酸根的其中一种。本专利技术还涉及结构式如下式所示的，8α-环二氧-24-二甲基胆甾-6-稀-3β-醇的提取制备方法， 其中，R可为氢原子、葡萄糖、鼠李糖、木糖、阿拉伯糖、醋酸根、硝酸根、硫酸根的其中一种。包括如下步骤(1)将新鲜海鞘用10-95％的醇水溶液或酮水溶液以1∶6-10的重量比回流提取或浸泡渗透提取至少一次，每次的时间为1-6个小时，将提取液减压浓缩得到浓缩的海鞘提取液；(2)将步骤(1)得到的提取液，过滤除去杂质后，依次用C6-C7烷烃、卤代烃、有机醚、有机酯和C3-C5脂肪醇提取，分别得到有机溶剂提取物和水提取物；(3)将步骤(2)得到的乙酸乙酯提取物经硅胶柱层析和HPLC层析分离，得到式(1)所示的，8α-环二氧-24-二甲基胆甾-6-稀-3β-醇。按照本专利技术的方法，其中，所述的醇为1-4碳醇，所述的酮为丙酮。按照本专利技术的方法，其中，所述的C6-C7烷烃为石油醚、环己烷、己烷；所述的卤代烃为二氯甲烷，三氯甲烷、四氯甲烷；所述的有机醚为乙醚；所述的有机酯为乙酸乙酯、乙酸丁酯，乙酸戊酯；所述的C3-C5脂肪醇为正丁醇。按照本专利技术的方法，其中，将步骤(3)得到的，8α-环二氧-24-二甲基胆甾-6-稀-3β-醇用硅胶进行进一步纯化。本专利技术还涉及结构式如下式所示的，8α-环二氧-24-二甲基 胆甾-6-稀-3β-醇作为抗癌、抗病毒药物的应用。按照本专利技术，其中所述的药物的剂型为片剂、丸剂、胶囊剂、冲剂、喷雾剂、口服液、混悬液、外用搽剂、透皮吸收剂以及注射剂中的任何一种。本专利技术的专利技术人对柄海鞘进行了系统深入的研究，从中首次提取分离得到了结构式如下式所示的，8α-环二氧-24-二甲基胆甾-6-稀-3β-醇 其中，R可为氢原子、葡萄糖、鼠李糖、木糖、阿拉伯糖、醋酸根、硝酸根、硫酸根的其中一种。按照本专利技术的第二个方面，本专利技术提供了结构式如上式所示的，8α-环二氧-24-二甲基胆甾-6-稀-3β-醇的提取制备方法，包括如下步骤(1)将新鲜海鞘用浓度为10-95％(重量)的醇水溶液或酮水溶液以1∶6-10的重量比回流提取或浸泡渗透提取至少一次，每次的提取时间为1-6个小时，将提取液减压浓缩得到浓缩的海鞘提取液；(2)将步骤(1)得到的提取液，过滤除去杂质后，依次用C6-C7烷烃、卤代烃、有机醚、有机酯和C3-C5脂肪醇提取，分别得到有机溶剂提取物和水提取物；(3)将步骤(2)得到的乙酸乙酯提取物经硅胶柱层析和HPLC层析分离，得到式(1)所示的，8α-环二氧-24-二甲基胆甾-6-稀-3β-醇。本专利技术的方法中，首先将新鲜的海鞘用浓度为10-95％的低碳醇的水溶液或酮的水溶液以1∶6-10的重量比回流提取或浸泡渗透提取。该步骤的回流或浸泡渗透提取至少进行一次，优选是用不同浓度的醇或酮的水溶液分次提取，例如，先用95％的乙醇水溶液浸泡渗透提取，然后用80％的乙醇水溶液浸泡渗透提取，再用60％的乙醇水溶液浸泡渗透提取，得到提取液后，合并提取液，然后将其减压浓缩，得到其浓缩液。其中，减压浓缩时的压力为0.01～0.03Pa，温度为25～50℃，所述的醇为C1-C4醇，例如甲醇、乙醇、丙醇和丁醇；所述的酮为丙酮。然后，将得到的浓缩提取液过滤除去杂质后，依次用C6-C7烷烃、卤代烃、有机醚、有机酯和C3-C5脂肪醇提取，分别得到有机溶剂的提取物和水提取物；其中，所述的C6-C7烷烃为石油醚、环己烷、己烷；所述的卤代烃为二氯甲烷，三氯甲烷、四氯甲烷；所述的有机醚为乙醚，所述的有机酯为乙酸乙酯、乙酸丁酯，乙酸戊酯，优选为乙酸乙酯；所述的C3-C5脂肪醇优选为正丁醇。将得到的乙酸乙酯提取物经硅胶柱层析分离，得到式(1)所示的，8α-环二氧-24-二甲基胆甾-6-稀-3β-醇。本专利技术的专利技术人经过充分的研究发现，结构式如下式(1)所示的 ，8α-环二氧-24-二甲基胆甾-6-稀-3β-醇具有良好的抗癌和抗病毒活性，因此进一步开发了其作为抗癌、抗病毒药物的应用。采用本领域公知的辅剂，可以将本专利技术的，8α-环二氧-24-二甲基胆甾-6-稀-3β-醇制备成各种不同的药物剂型，例如片剂、丸剂、胶囊剂、冲剂、喷雾剂、口服液、混悬液、外用搽剂、透皮吸收剂以及注射剂。用于抗癌药物时，本专利技术的化合物的用量为10-30毫克/公斤体重/天；用于抗病毒药物时，本专利技术的化合物的用量为10-25毫克/公斤体重/天。以下用实施例和实验例对本专利技术进行进一步详细的说明。但应该理解的是，本专利技术并不仅仅限于这些实施例和实验例。实施例1 ，8α-环二氧-24-二甲基胆甾-6-稀-3β-醇(SC1)的制备取新鲜海鞘100千克，依次用浓度为95％、80％和50％的乙醇水溶液800千克、500千克和600千克各浸泡2、3和4小时，合并提取液，将其在0.02Pa和40℃下减压浓缩，得到10千克浓缩液。将得到的浓缩液过滤除去杂质后，依次用10千克石油醚、10千克二氯乙烷、10千克乙醚、300千克乙酸乙酯和10千克正丁醇提取，分别得到石油醚、二氯乙烷、乙醚、乙酸乙酯、正丁醇和水提取物。收集乙酸乙酯提取物，在硅胶(200～300目)柱上先用石油醚洗脱，然后用体积比为1∶1的石油醚、乙酸乙酯的混合液洗脱。收集用体积比为1∶1的石油醚、本文档来自技高网...

【技术保护点】
结构式如下式（１）所示的５α，８α－环二氧－２４－二甲基胆甾－６－＊＊＊ （１）稀－３β－醇及其苷类、酯类，式中Ｒ可为氢原子、葡萄糖、鼠李糖、木糖、阿拉伯糖、醋酸根、硝酸根、硫酸根的其中一种。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】

【专利技术属性】
技术研发人员：程云，林文翰，雷海民，高蓉，董志锋，李伯安，张英起，李靖，罗清华，
申请(专利权)人：中国人民解放军传染病研究所，北京中医药大学，
类型：发明
国别省市：11[中国|北京]