虎杖苷和白藜芦醇的新制备方法技术

一种虎杖苷和白藜芦醇的新制备方法，其特征在于将聚酰胺层析技术应用于虎杖苷和／或白藜芦醇的分离纯化。（*该技术在2023年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种自含虎杖苷及白藜芦醇的物质中分离制备虎杖苷及白藜芦醇的方法，特别涉及从植物提取物中分离制备虎杖苷及白藜芦醇的方法。通过本专利技术方法可以实现虎杖苷及白藜芦醇的工业化制备。
技术介绍
虎杖苷(/甙)(又名白藜芦醇苷polydatin，云杉苷peicin)。化学结构为3，4’，5-三羟基茋-3-β-单-D-葡萄糖苷(3，4’，5-trihydroxy-stilbene-3-β-D-glucoside)。其结构如下 白藜芦醇(resveratrol)，化学结构为3，4’，5-三羟基茋，为反式二苯乙烯类(即茋，stilbene)化合物。其结构如下 虎杖苷以及白藜芦醇具有多样的生物学活性，例如抗氧化、抑制肿瘤的形成和发展、改善微循环以及对休克的治疗作用等。见载于文献的虎杖苷及白藜芦醇的分离纯化方法主要包括溶剂(如乙酸乙酯、乙醚)萃取法、硅胶柱层析等(例如，杨云，冯卫生，中药化学成分提取分离手册，中国中药出版社，1998205-207；孙文基，天然药物成分提取分离与制备，中国医药科技出版社，第二版，1999315-317)。近年来还出现了一些与虎杖苷及其苷元的制备有关的专利文献。例如，《白藜芦醇和白藜芦醇甙的制备方法》(中国专利，申请号01118461.2)，其方法是将柱层析和高速逆流色谱层析结合在一起，即通过硅胶柱层析实现对白藜芦醇和白藜芦醇甙的第一步分离(层析流动相选用卤代烃(如氯仿、二氯甲烷、四氯化碳)，脂肪醇或酮(如甲醇、乙醇、丙醇、丙酮))，再将此第一步分离产物通过逆流色谱层析进行第二次分离而得到目标产物。另一中国专利《白藜芦醇和白藜芦醇甙分离方法及其应用》(申请号00121100.5)，其方法涉及对初提物进行乙酸乙酯萃取，进而采用氯仿-甲醇(或乙醇)或乙酸乙酯-乙醇作为层析洗脱液进行硅胶柱层析，再以甲醇-氯仿为结晶溶剂进行重结晶得到白藜芦醇苷，并通过二次层析(洗脱液氯仿-乙酸乙酯)以及重结晶(结晶溶剂丙酮-氯仿)得到白藜芦醇。显然，该方法也涉及对有机溶剂的大量、重复使用。从虎杖中提取白藜芦醇及白藜芦醇苷的报道还见于日本专利昭60-9455(1985)。该专利方法是采用乙醚作为萃取溶剂而获得目标产物，其工艺方法较为繁杂，而乙醚的挥发性、易燃性、毒性较乙酸乙酯、甲醇等溶剂更强。上述这些已公开的方法，多适合于实验室规模下的少量制备，对于规模化的工业生产，其应用价值有限。首先从分离方法看，上述方法均不同程度采用硅胶柱层析作为必需分离手段。硅胶柱存在样品分离量小、填料用量大的缺点，而且填料硅胶难以再生利用，因此生产规模受到限制，工业生产成本较高。而高速逆流层析的应用，如中国专利01118461.2所述，是对硅胶柱层析得到的纯度分别高于70％和90％的产物进行二次逆流层析分离，整个工艺过程涉及多步环节、多种设备。一般说来，与硅胶柱层析相比，逆流层析技术的样品处理量更小，更难满足工业生产要求。此外，从所用溶媒看，上述文献所用溶剂系统均不同程度使用一、二类溶剂如卤代烃类(氯仿等)或甲醇等，保证规模生产条件下的生产安全相对困难，而且溶剂使用成本较高，最终产品不可避免会涉及有害溶剂残留问题。
技术实现思路
本专利技术提供一种从含虎杖苷及白藜芦醇的植物或植物初提物中分离纯化虎杖苷及白藜芦醇的方法。该方法操作简便，易于实现规模化工业生产。本专利技术的主要特征在于首次将聚酰胺层析有机结合应用于虎杖苷和/或白藜芦醇的分离纯化制备中。采用本专利技术方法提取纯化虎杖苷及白藜芦醇的原料包括一种或一种以上的含虎杖苷和/或白藜芦醇化学成分的植物全植株或植株之一部分，如根和/或茎和/或叶和/或花和/或果。例如虎杖(Polygonum cuspidatum)、何首乌(Polygonum multiflorum)，库叶云杉(Picea glehnii)、枫叶藤(Cissus assamica)、葡萄(Vitis Vinifera)、花生(Arachis hypogaea)、掌叶大黄(Rheumpalmatum)、唐古特大黄(Rheum tenguticum)、药用大黄(Rheum officinale)等植物的全植株或其某一部分植物基原。采用本专利技术方法提取纯化虎杖苷及白藜芦醇的原料也可以是上述植物或其一部分基原之初提物，这些初提物包括上述植物的提取物，例如水提取物、醇提取物、乙酸乙酯提取物等，也可以是提取物经萃取等处理后所得的萃取物等。当以植物或其部分基原作为原料时，则在采用聚酰胺层析之前，采用含水或不含水有机溶剂，例如乙醇等，以本领域内已知的常规技术流程在一定的温度下提取，以获得含虎杖苷和/或白藜芦醇的提取物。这些提取物在进行聚酰胺层析之前可以进行适当处理，例如，澄清、萃取、浓缩、干燥等。本专利技术之聚酰胺层析过程包括(1)将含有虎杖苷和/或白藜芦醇的初提物进行上样吸附上样方法可以采用以合适的溶剂溶解初提物，这些溶剂包括含水或不含水甲醇、乙醇、丙酮或其类似溶剂，其中优选含水乙醇作为溶剂；该上样样品可以是含虎杖苷和/或白黎芦醇的溶液，也可以是该溶液经聚酰胺拌样后的固体样品。其中含虎杖苷和/或白黎芦醇的溶液可以是采用常规技术方法从含虎杖苷和/或白藜芦醇的植物原料中获得的含虎杖苷和/或白藜芦醇的提取液，也可以是提取溶液经适当预处理(如澄清、浓缩、萃取等)后所得溶液。(2)层析洗脱提取物上样后以含水乙醇系统作为流动相进行层析洗脱。该洗脱系统可以是某一特定浓度的含水乙醇，也可以是梯度浓度的乙醇水溶液。收集洗脱流出液，得到含虎杖苷和/或白藜芦醇流份。(3)收集或分别收集含虎杖苷和/或白藜芦醇的洗脱流份。(4)处理含虎杖苷和/或白藜芦醇的流份所收集的含虎杖苷和/或白藜芦醇的洗脱流份，进一步采用下列一种或一种以上的处理工艺处理(1)将所收集的流份浓缩、析晶；或(2)将所收集的流份进行二次层析；或(3)采用活性炭将所收集的流份脱色、浓缩、重结晶。由此获得目标成分虎杖苷和/或白藜芦醇。本专利技术的积极效果是本专利技术首次将聚酰胺层析技术应用于虎杖苷(及白藜芦醇)的分离纯化，通过与目标物性质的有机结合，充分发挥了该技术在虎杖苷规模化制备中的特有优势。本专利技术方法的突出特点体现在聚酰胺层析柱可以再生利用，各批生产之间无须更换填料及重新装柱；工业化生产条件的控制容易实现，其所需设备简单，操作简便、安全，生产成本低，易于实现不同生产规模下的工艺条件的转换及交接。在采用聚酰胺层析的基础上，可以在水-乙醇系统下完成全部的生产过程，溶剂系统更安全，显著降低生产过程中所用溶剂对生产人员以及对环境的潜在影响，更适合规模化工业生产。具体实施例方式下列具体实施例是对本专利技术过程的描述，不对本专利技术的范围构成任何限制。实施例1.1 1.提取 植物虎杖的干燥根茎(中药饮片)100g，在77-85℃的温度下，以800ml的50％乙醇水回流提取2遍，每次提取2小时。合并提取液，减压浓缩(60℃，0.07-0.1Mpa)至总体积300ml，浓缩液以2N氢氧化钠溶液调pH至9-10，室温下静置约2小时，离心(4000r/min×5min)，去残渣，上清液作为上样溶液备用。2.分离 将上样溶液上样至备用聚酰胺柱上(柱体积约500ml)，流速约100ml/hr，上样吸附至第一条色带移至近柱底1/本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：赵金华，康晖，姚光辉，曾伟珍，李勇，李靖，于琳，
申请(专利权)人：深圳海王药业有限公司，
类型：发明
国别省市：