腺苷蛋氨酸的分离纯化方法技术

本发明专利技术涉及一种腺苷蛋氨酸的分离纯化技术，主要包括有机溶剂破菌、离子交换、脱色浓缩、真空干燥（冷冻干燥）几个步骤，与现有技术相较，本技术降低能耗，节省有机溶剂用量，简化分离纯化步骤，产品纯度、收率均有较大程度提高，适宜于工业规模化生产。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种腺苷蛋氨酸的分离纯化技术，具体的说就是包括有机溶剂破菌、离子交换、脱色浓缩、沉淀结晶、真空干燥(冷冻干燥)几个步骤。
技术介绍
腺苷蛋氨酸是广泛存在于动物、植物等各种生物体的重要代谢中间物质，也是人体内一种重要的生理活性物质，参与了40多种生化反应。在生物体代谢网络中，腺苷蛋氨酸的生物合成是经腺苷蛋氨酸合成酶催化蛋氨酸和ATP反应完成，在体内主要起转甲基、转硫、转氨丙基的作用。腺苷蛋氨酸对肝炎、抑郁症、关节炎、肝功能紊乱等疾病有着很好的疗效。临床试验表明，腺苷蛋氨酸的耐受性好，副作用远比相同功效的其他药物轻微。正因为此，腺苷蛋氨酸在欧洲作为药物，在美国作为营养保健品而被广泛使用。腺苷蛋氨酸可以化学合成、体外酶促合成或从微生物发酵提取得到。化学法合成由于它的产率低，反应底物L-高半胱氨酸价格昂贵，反应产物又为腺苷蛋氨酸的混旋物等明显缺点，而很少被实际应用。体外酶促合成尽管反应产物纯度高，但成本太高，所以一般只用于合成同位素标记的腺苷蛋氨酸。而某些微生物可以在细胞内积累腺苷蛋氨酸，通过对这些微生物的发酵，尤其是培养基中添加一定量的蛋氨酸的情况下，可以获得大量的腺苷蛋氨酸，本专利技术即为通过从发酵液中提取分离纯化腺苷蛋氨酸。目前国内外关于较多，主要有直接用有机溶剂沉淀法、离子交换后膜分离法、活性碳除杂后分离纯化法等，与已知文献报道的方法相较，本专利技术有着明显的优势。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种收得率高、纯度好的低成本分离纯化腺苷蛋氨酸的技术。在已知的分离纯化技术中，有机溶剂沉淀法所用有机溶剂为苦酮酸，其工艺流程冗长后续分离过于繁琐，而且苦酮酸有毒，受热或撞击就会爆炸；离子交换后膜分离技术工艺先进，但是未见其具体报道的分离膜和树脂种类，昂贵的膜价格对于工业化生产而言，很难实现；日本专利报道的活性碳除杂后分离纯化，可以较好的除去杂质，只是活性炭对腺苷蛋氨酸也有一定的吸附，势必降低产率。针对现有的技术的不足，本专利技术采用以下步骤实现低成本、高收率、高纯度的分离1破菌向1体积新鲜发酵液里面加入絮凝剂后再加0.1体积的乙酸乙酯，剧烈搅拌1小时后再加入1体积0.05M的硫酸溶液继续搅拌2小时，3000转离心30分钟收集上清液备用；2离子交换控制上清液流速为2B/h过处理好的树脂柱，再以2倍床体积流速为3B/h的去离子水冲洗树脂柱，接着以5倍床体积流速为2B/h的醋酸洗柱后用1倍床体积流速为3B/h的去离子水冲洗树脂柱，最后用8倍床体积流速为2B/h的0.05M硫酸洗脱，收集洗脱液备用；3脱色浓缩将洗脱液控制流速过阴离子交换柱后，反渗透浓缩洗脱液，收集浓缩液备用；4沉淀结晶配置10％的对甲苯磺酸溶液加入浓缩液，控制混合液流速缓缓加入乙酸乙酯(丙酮)得白色沉淀；5干燥将白色沉淀置于冷冻干燥器或真空干燥器干燥。与现有技术相较，本专利技术有以下优点1破菌时不收集菌体去掉了离心步骤不仅节省能耗也简化了生产工序，加入的絮凝剂除杂让产品纯度更高；2预处理树脂时用硫酸活化树脂而不用传统的盐酸，在除去产品中氯离子干扰的同时也节省了生产成本，因为硫酸较盐酸用量少；3沉淀结晶双盐只用一次有机溶剂，节省有机溶剂用量，而且结晶时采用的有机溶剂乙酸乙酯可回收用于破菌，降低了生产成本。4采用的干燥方法与传统的喷雾干燥相比，产品损失要少的多。具体实施例方式下面结合实例对本专利技术做进一步的说明1破菌向10L新鲜发酵液里面加入絮凝剂后再加1L乙酸乙酯，剧烈搅拌1小时后再加入10L浓度为0.05M的硫酸溶液继续搅拌2小时，3000转离心30分钟收集上清液备用；2树脂处理称3kg树脂装填于树脂柱，先用2倍床体积浓度为1M的H2SO4溶液以流速为2B/h过树脂柱，以去离子水洗至中性后，用4倍床体积浓度为2M的NaOH溶液以流速为2B/h过树脂柱，再以去离子水洗至pH值不高于9.0，接着继续用2倍床体积浓度为1M的H2SO4溶液以流速为2B/h过树脂柱，最后以去离子水洗至中性备用；3离子交换控制上清液流速为2B/h过处理好的树脂柱，再以2倍床体积流速为3B/h的去离子水冲洗树脂柱，接着以5倍床体积流速为2B/h的醋酸洗柱后用1倍床体积流速为3B/h的去离子水冲洗树脂柱，最后用8倍床体积流速为2B/h的0.05M洗脱，收集洗脱液6L备用；3脱色浓缩将6L洗脱液控制流速为2B/h过阴离子交换柱后，反渗透浓缩洗脱液至0.5L，收集浓缩液备用；4沉淀结晶配置10％的对甲苯磺酸溶液入浓缩液，控制混合液流速缓缓滴加入乙酸乙酯(丙酮)剧烈搅拌得白色沉淀；5干燥将白色沉淀置于冷冻干燥器或真空干燥器干燥后称重为26.850g。权利要求1本专利技术涉及一种腺苷蛋氨酸的分离纯化技术，其特征在于包括以下步骤破菌、离子交换、脱色浓缩、沉淀结晶和真空(冷冻)干燥。2如权利1要求所述的分离纯化技术，其特征在于1)用乙酸乙酯和硫酸破菌；2)用阳离子交换树脂D152吸附分离腺苷蛋氨酸；3)浓缩采用的方法是反渗透法；4)沉淀结晶时用的有机溶剂为乙酸乙酯或丙酮；5)干燥时采用的方法为真空干燥或冷冻干燥。全文摘要本专利技术涉及一种腺苷蛋氨酸的分离纯化技术，主要包括有机溶剂破菌、离子交换、脱色浓缩、真空干燥(冷冻干燥)几个步骤，与现有技术相较，本技术降低能耗，节省有机溶剂用量，简化分离纯化步骤，产品纯度、收率均有较大程度提高，适宜于工业规模化生产。文档编号C07H1/06GK1907996SQ20051001920公开日2007年2月7日 申请日期2005年8月2日 优先权日2005年8月2日专利技术者崔海容, 刘恭源, 龚时甫 申请人:崔海容, 刘恭源, 龚时甫本文档来自技高网...

【技术保护点】
本专利技术涉及一种腺苷蛋氨酸的分离纯化技术，其特征在于包括以下步骤：破菌、离子交换、脱色浓缩、沉淀结晶和真空（冷冻）干燥。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：崔海容，刘恭源，龚时甫，
申请(专利权)人：崔海容，刘恭源，龚时甫，
类型：发明
国别省市：83[中国|武汉]