本发明专利技术提供了一种采用高效液相色谱法分离测定琥珀酸曲格列及其汀光学异构体的方法，包括以三（S）-α-甲基苯基氨基甲酸酯直链淀粉为填料的色谱柱，和以正己烷-低级醇溶液为流动相，其中，正己烷与低级醇的体积比为25:75~75:25，分离测定琥珀酸曲格列汀及其手性异构体的含量。采用该方法可以很好的将琥珀酸曲格列汀与其对映异构体进行有效分离和测定。该本法用于琥珀酸曲格列汀的质量控制，专属性强，准确度高，操作简便。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于分析化学领域，具体涉及用液相色谱法分离测定琥珀酸曲格列汀及其光学异构体的方法。
技术介绍
琥珀酸曲格列汀是一种质量糖尿病的新药，其分子式为C18H20FN5O2·C4H6O4，其结构式为：琥珀酸曲格列汀分子中含有1个手性碳原子，通过不对称合成生成不同的手性异构体，在药物合成过程中需要对光学异构体进行质量控制。含有手性碳原子的对映异构体的分离是手性药物合成和制剂过程中质量控制的难点，因此，实现琥珀酸曲格列汀及其手性异构体的分离测定在琥珀酸曲格列汀的合成和制剂过程的质量控制方面具有重要的现实意义。经反复试验，本专利技术人发现，用三（S）-α-甲基苯基氨基甲酸酯直链淀粉为填料的手性色谱柱，以正己烷—低级醇溶液为流动相即可以将琥珀酸曲格列汀手性异构体进行有效分离，该方法下基线平稳，主峰峰形较好，检测限较高，从而可以准确控制琥珀酸曲格列汀的质量。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种采用高效液相色谱分离测定琥珀酸曲格列汀及其手性异构体的方法，该方法可有效实现琥珀酸曲格列汀与其手性异构体的分离与测定，基线平稳，主峰峰形较好，检测限较高。为实现本专利技术的目的，提供如下实施方案：在一实施方案中，本专利技术的采用液相色谱法分离测定琥珀酸曲格列汀及其光学异构体的方法，包括以三（S）-α-甲基苯基氨基甲酸酯直链淀粉为填料的手性色谱柱，以正己烷—低级醇溶液为流动相，其中，正己烷与低级醇的体积比为25:75~75:25。在上述实施方案中，本专利技术的方法，所说的手性色谱柱选自牌号为DaicelCHIRALPAKAS、DaicelCHIRALPAKAS-H和DaicelCHIRALPAKAS-3的色谱柱，所说的低级醇选自以下化合物：甲醇、无水乙醇、丙醇和异丙醇，优选为无水乙醇或异丙醇，正己烷中还进一步含有微量改性剂，所述改性剂选自三乙胺、二乙胺、三氟乙酸和乙二胺，优选乙二胺，所述微量为0.01-1%，优选为0.02-0.1%。在上述实施方案中，本专利技术的方法，还进一步包括以下步骤：（1）称取琥珀酸曲格列汀样品适量，用无水乙醇溶解样品，配制成每1ml含琥珀酸曲格列汀0.1mg~5mg的样品溶液；（2）设置流动相流速为0.5～2.0ml/min，优选为1.0ml/min；检测波长为205nm~300nm，优选为276nm，色谱柱的柱温箱温度为25℃~45℃，优选为40℃；（3）取（1）的样品溶液，设置进样量为5ml~100ml，优选20μl注入色谱仪，完成琥珀酸曲格列汀与光学异构体的分离测定。在一具体实施方案中，本专利技术的采用液相色谱分离测定琥珀酸曲格列汀及其光学异构体的方法，包括以三（S）-α-甲基苯基氨基甲酸酯直链淀粉为填料的手性色谱柱，以正己烷—低级醇溶液为流动相，其中，正己烷与低级醇的体积比为60：40，所述低级醇选自甲醇、无水乙醇、丙醇和异丙醇，优选为无水乙醇，其中，正己烷中含有微量改性剂，所述改性剂选自三乙胺、二乙胺、三氟乙酸和乙二胺，优选乙二胺，所述微量为0.01-1%，优选为0.02-0.1%，该方法包括以下步骤：（1）称取琥珀酸曲格列汀样品适量，用无水乙醇溶解样品，配制成每1ml含琥珀酸曲格列汀0.1mg~5mg的样品溶液；（2）设置流动相流速为0.5～2.0ml/min，优选为1.0ml/min；检测波长为205nm~300nm，优选为276nm，色谱柱的柱温箱温度为25℃~45℃，优选为40℃；（3）取（1）的样品溶液，设置进样量为5ml~100ml，优选20μl注入色谱仪，完成琥珀酸曲格列汀与光学异构体的分离测定。在上述具体实施方案中，本专利技术的方法，所说的手性色谱柱选自牌号为DaicelCHIRALPAKAS、DaicelCHIRALPAKAS-H和DaicelCHIRALPAKAS-3的色谱柱，所说的低级醇为无水乙醇，正己烷中含有0.02%的改性剂，所述改性剂为乙二胺。在上述具体实施方案中，本专利技术的方法，优选的，其中：高效液相色谱仪：Agilent1100型高效液相色谱仪色谱柱：DaicelCHIRALPAKAS-H手性柱（250mm×4.6mm,5μm）柱温：40℃流动相：正己烷（含0.02%乙二胺）-无水乙醇（60：40V/V）流速：1.0ml/min检测波长：276nm进样量：20μl本专利技术的方法，能够有效分离测定琥珀酸曲格列汀及其光学异构体；选用低级醇，特别是无水乙醇为流动相和溶剂溶解样品，保证了溶液的稳定性；优选进样体积为20μl，柱温为40℃，可获得对称性更好的色谱峰。本专利技术解决了琥珀酸曲格列汀与其光学异构体分离困难的定问题，很好的实现了琥珀酸曲格列汀与其光学异构体的基线分离和测定，特别是在正己烷中加入微量的改性剂后，避免峰出现拖尾现象，基线分离更稳定，从而更好的保证了琥珀酸曲格列汀的质量可控。附图说明图1：空白溶剂的高效液相色谱图图2：琥珀酸曲格列汀原料和琥珀酸曲格列汀对映异构混合液的高效液相色谱图图3：琥珀酸曲格列汀原料的高效液相色谱图图4：空白辅料的高效液相色谱图图5：琥珀酸曲格列汀片的高效液相色谱。具体实施方式以下实施例用于进一步阐明和解释本专利技术的实质，但不以此限制本专利技术的范围。实施例1仪器和条件高效液相色谱仪：Agilent1100型高效液相色谱仪色谱柱：DaicelCHIRALPAKAS-H手性柱（250mm×4.6mm,5μm）柱温：40℃流动相：正己烷(含0.02%乙二胺)-无水乙醇（60：40）流速：1.0ml/min检测波长：276nm进样量：20μl实施步骤分别取琥珀酸曲格列汀原料20mg和琥珀酸曲格列汀对映异构体20mg，置同一10ml量瓶中，加无水乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取5ml至25ml量瓶中，无水乙醇稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。分别取试剂空白溶液和供试品溶液，按上述条件进行高效液相色谱分析，记录色谱图，结果见图1和图2，图1为空白溶剂的高效液相色谱图，图2为琥珀酸曲格列汀原料和琥珀酸曲格列汀对映异构混合液的高效液相色谱图。图2中保留时间为8.111分钟的色谱峰为琥珀酸曲格列汀对映异构体的色谱峰，保留时间为6.910分钟的色谱峰为琥珀酸曲格列汀的色谱峰，由图可以看出，琥珀酸曲格列汀与其对映异构体达到基线分离度。实施例2仪器和条件高效液相色谱仪：Agilent1100型高效液相色谱仪色谱柱：DaicelCHIRALPAKAS-H手性柱（250mm×4.6mm,5μm）柱温：40℃流动相：正己烷(含0.02%乙二胺)-无水乙醇（60：40）流速：1.0ml/min检测波长：276nm进样量：20μl实施步骤取琥珀酸曲格列汀原料25mg，置50ml量瓶中，加无水乙醇溶解并稀释至刻度本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种采用高效液相色谱法分离测定琥珀酸曲格列汀及其对映异构体的方法，包括以三（S）‑α‑甲基苯基氨基甲酸酯直链淀粉为填料的色谱柱，和以正己烷‑低级醇溶液为流动相，其中，正己烷与低级醇的体积比为25:75~75:25。
【技术特征摘要】
1.一种采用高效液相色谱法分离测定琥珀酸曲格列汀及其对映异构体的方法，包括以三（S）-α-甲基苯基氨基甲酸酯直链淀粉为填料的色谱柱，和以正己烷-低级醇溶液为流动相，其中，正己烷与低级醇的体积比为25:75~75:25。
2.根据权利要求1所述的方法，所述手性色谱柱选自下列牌号的色谱柱：DaicelCHIRALPAKAS、DaicelCHIRALPAKAS-H和DaicelCHIRALPAKAS-3。
3.根据权利要求1所述的方法，所述低级醇选自甲醇、无水乙醇、丙醇和异丙醇。
4.根据权利要求3所述的方法，所述低级醇为无水乙醇或异丙醇。
5.根据权利要求3所述的方法，所述流动相，其中，正己烷中含有0.01%-1%的改性剂。
6.根据权利要求1所述的方法，所述正己烷与低级醇的体积比为60:40，其中，正己烷中含有0.02%的改性剂。
7.根据权利要...
【专利技术属性】
技术研发人员：熊娟，张道林，彭良臣，但春燕，
申请(专利权)人：重庆医药工业研究院有限责任公司，
类型：发明
国别省市：重庆;50
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