一种多功能木霉复合菌剂的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种多功能木霉复合菌剂的制备方法，所述多功能木霉复合菌剂的制备方法，包括以下步骤：(1)孢子悬浮液的制备；(2)木霉的固体发酵；(3)木霉与农药的混配。本发明专利技术利用3种木霉孢子悬浮液，接种于米糠或玉米糠发酵基质中，与甲霜灵锰锌混配使用，工艺简单、能减少化学肥料和农药用量，对环境友好。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种微生物菌剂
，具体是一种多功能木霉复合菌剂的制备方法。
技术介绍
我国化肥和农药过量施用严重，由此引起环境污染和农产品质量安全等重大问题。化肥和农药替代产品研发相对落后，是导致上述问题的原因之一。科技部发布国家重点研发计划专项来解决这一难题，其一，用微生物活化土壤无效态磷；其二，研制集根际促生、溶磷解钾等功能于一体的新型微生物肥料及高效生物杀菌剂；其三，弄清生物活体农药的环境适应与宿存机制及其货架期影响因子。最终研发出化学肥料和农药减施增效综合技术。申请人曾在枇杷韧皮部、黄瓜叶片及茎中分离到3株木霉，编号分别为LY1，LY2,LY3。经检测发现它们对枇杷根腐病菌、石榴干腐病菌、石榴枯萎病菌、万寿菊根腐病菌、万寿菊叶斑病菌抑菌率均>50％。对甲霜灵锰锌有极强的抗药性，在PDA培养基中加入药剂使用浓度，即100mg/L，3个木霉菌株生长均不受影响。在含甲霜灵锰锌的PDA培养基中28℃，恒温培养7d，其菌落直径与对照直径相等，达88.0mm。将LY1木霉接种到健康枇杷植株上，对枇杷植株无伤害，相反，能促进枇杷植株生长，即，接种LY1木霉的枇杷植株比对照叶色浓绿，叶面积明显增大。能在枇杷植株中定殖。盆栽防治效果达60％以上(曾经申报专利技术专利：一株能防治枇杷根腐病的木霉，201410468098.3，实质审查阶段。)。LY2在含扑海因的培养基中，菌落直径达58.0mm。此外，PDA培养基中此木霉菌株很难产孢，而在含甲霜灵锰锌和扑海因的培养基中很容易产孢，含甲霜灵锰锌的PDA培养基中28℃，恒温培养7d，孢子量每皿达6.7×107/mL。说明化学农药能促进其产孢，能在残留化学农药的土壤中定殖。(曾经申报专利技术专利：一种木霉复合杀菌剂的制备方法，201510545500.8，实质审查阶段。)。LY3木霉兼具解磷、降解纤维素的功能，能活化土壤中无效态磷，降解土壤中的植物残体，形成腐殖质供植物吸收利用(曾经申报专利技术专利：一种多功能木霉菌株LY3及其菌剂制备方法，201510736470.9，实质审查阶段。)。鉴于此，该项专利技术专利利用LY1，LY2,LY3木霉菌株具有抗菌、抗化学农药，并且LY1菌株具有促生、化学农药能促进LY2产孢,LY3菌株兼具解磷、降解纤维素的特点，将3个木霉菌株混合培养，研制集促生、抗菌、溶磷、降解纤维素、抗化学农药于一体的新型多功能生物制剂。提高植物病害防治效果，减少化学肥料及农药用量。获得最大的经济及生态效益。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种多功能木霉复合菌剂的制备方法，以解决上述
技术介绍
中提出的问题。为实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：一种多功能木霉复合菌剂的制备方法，具体步骤为：(1)孢子悬浮液的制备：将3种木霉分离菌株分别在PDA培养基中28℃培养7d，待培养皿中长满孢子，用无菌水洗下孢子，配制成1×106/mL孢子悬浮液；(2)木霉的固体发酵：以米糠或玉米糠为发酵基质，其中按质量分数添加0.5％D-果糖、0.5％鼠李糖、0.25％硝酸铵、0.25％酵母膏、0.5％磷酸氢二钠、40％自来水；将上述步骤(1)制备的孢子悬浮液按照1：1：1的比例，以15％的比率接种于上述准备好的基质中，26-30℃、光暗交替、静止培养8-10d；(3)木霉与农药的混配：在上述固体菌剂中，加入100mg/kg甲霜灵锰锌，混匀后装罐包装，贮存在避光处，温度控制在2-8℃，湿度控制在30-50％。作为本专利技术进一步的方案：步骤(1)中3种木霉分离菌株分别来自枇杷韧皮部、黄瓜叶片及茎中。作为本专利技术进一步的方案：步骤(2)中28℃、光暗交替、静止培养9d。作为本专利技术进一步的方案：步骤(3)中温度控制在5℃，湿度控制在40％。与现有技术相比，本专利技术的有益效果是：本专利技术利用3种木霉孢子悬浮液，接种于米糠或玉米糠发酵基质中，与甲霜灵锰锌混配使用，工艺简单、能减少化学肥料和农药用量，对环境友好。具体实施方式下面将结合本专利技术实施例，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。实施例1一种多功能木霉复合菌剂的制备方法，具体步骤为：(1)孢子悬浮液的制备：将3种木霉分离菌株分别在PDA培养基中28℃培养7d，待培养皿中长满孢子，用无菌水洗下孢子，配制成1×106/mL孢子悬浮液；(2)木霉的固体发酵：以米糠或玉米糠为发酵基质，其中按质量分数添加0.5％D-果糖、0.5％鼠李糖、0.25％硝酸铵、0.25％酵母膏、0.5％磷酸氢二钠、40％自来水；将上述步骤(1)制备的孢子悬浮液按照1：1：1的比例，以15％的比率接种于上述准备好的基质中，28℃、光暗交替、静止培养9d；(3)木霉与农药的混配：在上述固体菌剂中，加入100mg/kg甲霜灵锰锌，混匀后装罐包装，贮存在避光处，温度控制在5℃，湿度控制在40％。其中：步骤(1)中3种木霉分离菌株分别来自枇杷韧皮部、黄瓜叶片及茎中。实施例2一种多功能木霉复合菌剂的制备方法，具体步骤为：(1)孢子悬浮液的制备：将3种木霉分离菌株分别在PDA培养基中28℃培养7d，待培养皿中长满孢子，用无菌水洗下孢子，配制成1×106/mL孢子悬浮液；(2)木霉的固体发酵：以米糠或玉米糠为发酵基质，其中按质量分数添加0.5％D-果糖、0.5％鼠李糖、0.25％硝酸铵、0.25％酵母膏、0.5％磷酸氢二钠、40％自来水；将上述步骤(1)制备的孢子悬浮液按照1：1：1的比例，以15％的比率接种于上述准备好的基质中，26℃、光暗交替、静止培养8d；(3)木霉与农药的混配：在上述固体菌剂中，加入100mg/kg甲霜灵锰锌，混匀后装罐包装，贮存在避光处，温度控制在2℃，湿度控制在30％。其中：步骤(1)中3种木霉分离菌株分别来自枇杷韧皮部、黄瓜叶片及茎中。实施例3一种多功能木霉复合菌剂的制备方法，具体步骤为：(1)孢子悬浮液的制备：将3种木霉分离菌株分别在PDA培养基中28℃培养7d，待培养皿中长满孢子，用无菌水洗下孢子，配制成1×106/mL孢子悬浮液；(2)木霉的固体发酵：以米糠或玉米糠为发酵基质，其中按质量分数添加0.5％D-果糖、0.5％鼠李糖、0.25％硝酸铵、0.25％酵母膏、0.5％磷酸氢二钠、40％自来水；将上述步骤(1)制备的孢子悬浮液按照1：1：1的比例，以15％的比率接种于上述准备好的基质中，30℃、光暗交替、静止培养10d；(3)木霉与农药的混配：在上述固体菌剂中，加入100mg/kg甲霜灵锰锌，混匀后装罐包装，贮存在避光处，温度控制在8℃，湿度控制在50％。其中：步骤(1)中3种木霉分离菌株分别来自枇杷韧皮部、黄瓜叶片及茎中。对于本领域技术人员而言，显然本专利技术不限于上述示范性实施例的细节，而且在不背离本专利技术的精神或基本特征的情况下，能够以其他的具体形式实现本专利技术。因此，无论从哪一点来看，均应将实施例看作是示范性的，而且是非限制性的，本专利技术的范围由所附权利要求而不是上述说明限定，因此旨在将落在权利要求的等同要件的含义和范围内的所有变化囊括在本专利技术内。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种多功能木霉复合菌剂的制备方法，其特征在于，具体步骤为：(1)孢子悬浮液的制备：将3种木霉分离菌株分别在PDA培养基中28℃培养7d，待培养皿中长满孢子，用无菌水洗下孢子，配制成1×106/mL孢子悬浮液；(2)木霉的固体发酵：以米糠或玉米糠为发酵基质，其中按质量分数添加0.5％D‑果糖、0.5％鼠李糖、0.25％硝酸铵、0.25％酵母膏、0.5％磷酸氢二钠、40％自来水；将上述步骤(1)制备的孢子悬浮液按照1：1：1的比例，以15％的比率接种于上述准备好的基质中，26‑30℃、光暗交替、静止培养8‑10d；(3)木霉与农药的混配：在上述固体菌剂中，加入100mg/kg甲霜灵锰锌，混匀后装罐包装，贮存在避光处，温度控制在2‑8℃，湿度控制在30‑50％。

【技术特征摘要】
1.一种多功能木霉复合菌剂的制备方法，其特征在于，具体步骤为：(1)孢子悬浮液的制备：将3种木霉分离菌株分别在PDA培养基中28℃培养7d，待培养皿中长满孢子，用无菌水洗下孢子，配制成1×106/mL孢子悬浮液；(2)木霉的固体发酵：以米糠或玉米糠为发酵基质，其中按质量分数添加0.5％D-果糖、0.5％鼠李糖、0.25％硝酸铵、0.25％酵母膏、0.5％磷酸氢二钠、40％自来水；将上述步骤(1)制备的孢子悬浮液按照1：1：1的比例，以15％的比率接种于上述准备好的基质中，26-30℃、光暗交替、静止培养8...

【专利技术属性】
技术研发人员：鲁海菊，张艺萍，张晓永，张丽芳，洪亮，李娜，王栋，王传铭，李河，田婷，翟凤艳，沈云玫，陶宏征，杨建，
申请(专利权)人：红河学院，
类型：发明
国别省市：云南;53