用于在低温情况下转装冷冻样本的装载站制造技术

一种用于转装电子显微术的冷冻样本的装载站(100、200)，包括向上开口的腔(104、204)，该腔可至少部分地装填冷却剂，其中，所述腔(104、204)在其侧壁上具有至少两个分别用于不同的样本转移设备(101、102、103)的接头(101a、102a、103a)，其中，所述接头(101a、102a、103a)允许通过所选择的样本转移设备把冷冻样本引入到所述腔(104、204)中，且允许分别通过另一样本转移设备把冷冻样本从所述腔中引出，在所述腔(104、204)中设置有用于至少两个不同地构造的样本保持器(109、110)的接纳部(108、208)，其中，至少两个所述样本保持器(109、110)能够可松开地固定至至少一个所述样本转移设备(101)，用于把所述冷冻样本引入到所述腔(104、204)中和用于把所述冷冻样本从所述腔(104、204)中引出。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及一种用于转装电子显微术的冷冻样本的装载站，其包括向上开口的腔，该腔可至少部分地装填冷却剂。
技术介绍
冷冻固定是一种在电子显微术中经常采用的样本制备方法。在此，把含有水的样本非常迅速地冷冻(冷冻固定)至低于-150℃的温度，也就是说，该样本在避免形成冰晶的情况下被非常迅速地冷却。已表明，冷冻固定尤其适合于结构生物学研究。待研究的对象，比如细胞、酶、病毒或脂质分子层，由此被植入玻璃化的薄冰层中。冷冻固定的巨大优势在于，生物结构能保持其原生状态。另外，通过冷冻固定能把生物过程停止在任一时间点，并在这种玻璃化的状态下，例如在冷冻电子显微镜中予以研究，和/或在具有相应的样本冷却的光学显微镜中予以研究。光学显微镜与电子显微镜之间的关联方法也称为光电关联显微技术(CLEM(correlativelight-electronmicroscopy))，其允许例如对生物样本首先在光学显微镜中长时间地予以观察，直至达到所希望的状态。然后把样本转移到冷冻制备装置中，并予以冷冻固定，用于以电子显微方式进行观察。在CLEM的另一种变型中，以光学显微方式对已经冷冻固定的样本进行研究。冷冻固定的样本还可以采用公知的方式经历其它制备步骤，例如采用冰冻断裂技术(冰冻蚀刻技术)和/或涂层技术进行加工。为了不损害冷冻样本的质量，非常重要的是，将其冷却，并且在所用的处理器(比如冷冻固定设备、冰冻断裂装置、涂层装置)或分析器(比如冷冻电子显微镜、冷却的光学显微镜)之间无污染地转移。可通过链接“http://www.leica-microsystems.com/fileadmin/downloade/Leica％20EM％20VCT100/Brochures/Leica_EMVCT100_Brochure_EN.pdf”访问的用于真空冷冻转移系统的小册子“LeicaEMVCT100”(制造商：莱卡微系统)公开了一种用液态氮冷却的装载站，在该装载站上可联接一个用液态氮冷却的转移容器(LeicaEMVCT100Shuttle)。在该转移容器的推杆上能够可松开地固定样本保持器。通过移动推杆，样本保持器可以从冷却的转移容器传送到装载站的冷却的腔中。在装载站的腔内部设置了用于锁定样本保持器的接纳部。这些很小的冷冻的电子显微的样本大多采用公知的方式位于电子显微的样本载体(比如小网格/栅格或用于扫描电子显微术的探针)上，这些样本在容器中被手动地装入装载站的用液态氮冷却的腔内。例如用镊子把带有样本的样本载体取出，并固定在样本保持器中。这个过程在冷却状态下进行，从而冷冻样本不会融化或解冻，因而不可使用。样本载体带有样本，然后带有样本保持器和样本载体的转移容器与装载站脱离联接，并且为了后续处理或分析而与相应的装置(例如冰冻断裂装置、冷冻电子显微镜)连接。在电子显微术中，样本处理、分析及相应设备的数量和可行性与日俱增。对于不同的应用来说，通常还必须把样本转装到以其它方式构造的样本保持器或以其它方式构造的样本转移设备中。利用上述已知的装载站无法把样本从一个样本保持器转装到以其它方式构造的适于另一种应用的样本保持器中。而且只能连接一个转移容器。因此，使用者大多要应付的是，把位于小容器中且处于液态氮中的样本传送至不同的安装地点。这不仅牵涉到很大的时间耗费，而且包括了可能会损坏或污染样本的关键的工作步骤。于是往往无法想象到在哪一个工作步骤发生了错误。已知的装载站还没有温度控制，对冷却剂的补装要手动地进行。
技术实现思路
因此，本专利技术的目的是，实现尽可能无污染地把冷冻样本从样本保持器转装到被设置用于另一种应用的以其它方式构造的样本保持器或以其它方式构造的样本转移设备中。该目的利用开篇所述类型的装载站得以实现，根据本专利技术，该装载站的特征在于，腔在其侧壁上具有至少两个分别用于不同的样本转移设备的接头，其中，这些接头允许通过所选择的样本转移设备把冷冻样本引入到腔中，且允许分别通过另一样本转移设备把冷冻样本从腔中引出，在腔中设置有用于至少两个不同地构造的样本保持器的接纳部，其中，至少两个样本保持器能够可松开地固定在至少一个样本转移设备上，用于把冷冻样本引入到腔中和用于把冷冻样本从腔中引出。由于本专利技术，能够实现在<-150℃的温度情况下在各个处理器或分析器的通常不同地设计的样本保持器之间尽量无污染地且省时地转装用于电子显微术的冷冻样本。冷冻样本在大多数情况下施加在电子显微的样本载体上，样本载体的设计与相应的应用有关。因此，术语“样本载体”是指所有适用于电子显微术和适用于电子显微的样本制备的载体。用于电子显微术的样本载体对于本领域技术人员来说是普遍已知的。样本载体例如是用于扫描电子显微术的探针式的载体，或者是通常称为栅格或网格载体的小网状的载体。栅格可以具有不同形状的孔(蜂窝、缝槽等)，或者具有一定孔眼数量的栅格，和/或用薄膜涂层(例如Quantifoil公司的涂层的栅格)和/或被碳蒸镀。同样应用于电子显微的样本的冷冻制备的其它载体例如是在EP1267164B1中介绍过的蓝宝石玻璃片。带有样本的样本载体也可以可松开地固定在样本转移设备的样本保持器中。样本保持器可以要么牢固地与样本转移设备连接(例如用于转移电子显微术的样本保持器，比如Gatan公司的冷冻-TEM-保持器(单斜式液态氮冷冻转移保持器，型号626(Model626SingleTiltLiquidNitrogenCryoTransferHolder))，要么它可以可松开地与样本转移设备联接，因而是可更换的。已知的样本转移设备是上面已提及的LeicaEMVCT100Shuttle(制造商：莱卡微系统)，分别用于不同应用的不同设计的样本保持器与该样本转移设备连接。LeicaEMVCT100Shuttle也适合于与根据本专利技术的装载站连接。根据所用的样本载体(例如栅格/小网格)，选择可与LeicaEMVCT100Shuttle联接的样本保持器。替代地，规定了一些应用，使得样本直接施加在样本保持器的表面上，即无样本载体比如栅格/小网格。冷冻样本是很小的电子显微的样本，这些样本可以借助于本专利技术的装载站转装到不同处理器或分析器的不同的样本保持器中。按照上面已提到的在光学显微镜与电子显微镜(光电关联显微技术(CLEM“correlativelight-electronmicroscopy”))之间的关联方法，既在光学显微镜中又在电子显微镜中对冷冻的电子显微的样本予以研究。本专利技术的装载站也能实现把冷冻的电子显微的样本简单地转装到被构造用于光学显微术或电子显微术的样本保持器中。有益地，用于至少两个不同地构造的样本保持器的接纳部设置在腔的底部区域中。在一种有利的改进中，接纳部包括可转动且可翻摆的球冠，在该球冠上可接纳至少两个不同地构造的样本保持器。这些样本保持器因而可松开地锁定在接纳部中。在一种子变型方案中，设置有恰好用于两个不同地构造的样本载体的接纳部，其中，球冠能实现围绕竖直轴线的转动且能实现翻摆。替代地，接纳部也可以接纳多于两个的样本保持器，例如，可以在一个接纳部上以交叉方式锁定四个样本保持器。在另一种改进中，接纳部包括可移动的滑架，在该滑架上可接纳至少两个不同地构造的样本保持器。在一种有本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于转装电子显微术的冷冻样本的装载站(100、200)，包括向上开口的腔(104、204)，该腔可至少部分地装填冷却剂，其特征在于，所述腔(104、204)在其侧壁上具有至少两个分别用于不同的样本转移设备(101、102、103)的接头(101a、102a、103a)，其中，所述接头(101a、102a、103a)允许通过所选择的样本转移设备把冷冻样本引入到所述腔(104、204)中，且允许分别通过另一样本转移设备把冷冻样本从所述腔中引出，在所述腔(104、204)中设置有用于至少两个不同地构造的样本保持器(109、110)的接纳部(108、208)，其中，至少两个所述样本保持器(109、110)能够可松开地固定在至少一个所述样本转移设备(101)上，用于把所述冷冻样本引入到所述腔(104、204)中和用于把所述冷冻样本从所述腔(104、204)中引出。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2014.07.29 DE 102014110722.51.一种用于转装电子显微术的冷冻样本的装载站(100、200)，包括向上开口的腔(104、204)，该腔可至少部分地装填冷却剂，其特征在于，所述腔(104、204)在其侧壁上具有至少两个分别用于不同的样本转移设备(101、102、103)的接头(101a、102a、103a)，其中，所述接头(101a、102a、103a)允许通过所选择的样本转移设备把冷冻样本引入到所述腔(104、204)中，且允许分别通过另一样本转移设备把冷冻样本从所述腔中引出，在所述腔(104、204)中设置有用于至少两个不同地构造的样本保持器(109、110)的接纳部(108、208)，其中，至少两个所述样本保持器(109、110)能够可松开地固定在至少一个所述样本转移设备(101)上，用于把所述冷冻样本引入到所述腔(104、204)中和用于把所述冷冻样本从所述腔(104、204)中引出。2.如权利要求1所述的装载站，其特征在于，所述接纳部(108、208)设置在所述腔(104、204)的底部区域(107、207)中。3.如权利要求1或2所述的装载站，其特征在于，所述接纳部(108)包括可转动且可翻摆的球冠(111)，在该球冠上能够接纳至少两个不同地构造的样本保持器(109、110)。4.如权利要求1或2所述的装载站，其特征在于，所述接纳部(208)包括...

【专利技术属性】
技术研发人员：莱因哈德·莉莉，立安得·加伊奇特，
申请(专利权)人：徕卡显微系统有限公司，
类型：发明
国别省市：奥地利;AT