本发明专利技术公开一种水酶法制备富含磷脂的南极磷虾油的方法，该方法通过自溶酶结合外加蛋白酶酶解，首先通过蛋白酶酶解液化南极磷虾肉，离心脱去虾壳，再酶解破坏蛋白和磷脂的复合结构，使磷脂游离出来，再离心分离出富含磷脂层；富含磷脂层经过干燥，乙醇萃取得到磷脂含量大于40w﹪的南极磷虾油、南极磷虾肽以及南极磷虾蛋白。本发明专利技术方法适用于船上操作，可制备半成品，然后将半成品运到岸上后继续加工，既减少蛋白酶用量，又降低运输成本；采用二次酶解破坏蛋白和磷脂的复合结构，使磷脂游离出来，因此南极磷虾油的提取率更高。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于制造加工工艺
，涉及一种水酶法制备富含磷脂的南极磷虾油的方法。
技术介绍
南极磷虾（Euphausia superba）是一种生活在南大洋的甲壳类浮游动物，以藻类为食。南极磷虾长成达6厘米长，2克重。生物质能估计有4～15亿吨，年捕捞量约1.3亿吨。南极磷虾含水量占77.9﹪～83.1﹪，粗蛋白占11.9﹪～15.4﹪，总脂肪占0.5﹪～3.6﹪。总脂肪含量和南极磷虾的性别、性成熟度和捕捞季节等有关。 Soevik & Braekkan 1979年首次报道了南极磷虾氟含量异常的问题，氟含量平均达2400ppm/DW，而且氟主要集中在虾壳中，因此早期脱壳有助于降低产品中的氟含量。 由于南极磷虾生活在0度左右的海水中，其自溶酶包括蛋白酶，磷脂酶在低温时仍保持很高的活性，捕捞上来若不及时加工，产品品质便很难保证。 南极磷虾油含有磷脂型的Omega-3多不饱和脂肪酸（如EPA和DHA），具有降血脂、降血压、降血糖、抗关节炎等功效，同时还含有虾青素及维生素A，维生素E等抗氧化保健成分。人体临床实验表明，磷脂型的EPA和DHA（来自于南极磷虾油）的生物利用度高于甘油三酯型的EPA和DHA（来自于鱼油）。 南极磷虾油的制备方法大致有以下几种： 申请号 CN102071101A 的专利技术《一种从南极磷虾中提取富含磷脂的磷虾油的方法》，该方法以南极磷虾为原料，先利用自身的蛋白酶分解释放脂类，经快速加热使南极磷虾体内的酶失去活性，然后低温干燥，以乙醇为溶剂，提取富含二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA) 磷脂的南极磷虾油。该方法也是利用蛋白酶释放脂类，但是自身蛋白酶无法充分酶解蛋白-脂质复合物，游离磷脂，所以磷脂含量仅占南极磷虾油的32～34﹪。 申请号 CN102638998A 的专利技术《用于获取富含磷脂和中性油脂的磷虾油的无溶剂提取法》，该方法包括：高温加热蒸煮南极磷虾，同时，要避免搅动和研磨；滗析分离加热过的南极磷虾以得到部分去脂和脱水的固体和液体；挤压得到的固体以获得压榨液体和固体部分；离心分离压榨液体以获得富含磷脂的南极磷虾油；离心分离液体以获得富含中性油脂的南极磷虾油和浓稠汁。该方法不使用溶剂，而是使用压榨法得到南极磷虾油，因此无溶剂残留。但是压榨法得到的南极磷虾油，主要以甘油三酯为主，磷脂含量并不高。 申请号 CN102952625A 的专利技术《一种南极磷虾粉膨化造粒浸出提取虾油的方法》，其特征在于，包括如下步骤：1、取南极磷虾粉与淀粉或富含淀粉的植物原料粉混合，其中，所述南极磷虾粉的质量含量为50～100﹪ ；2、对混合物料进行水分调节，至含水量10～40﹪ ；3、将混合物料输入到挤压膨化造粒机中进行膨化造粒，造粒温度为80～140℃，模头压力10～120Bar，获得2～10mm 长度膨化料粒；4、用烘干机调节所述膨化料粒水分，至含水量4～12﹪ ；5、将所述膨化料粒输入油脂浸出设备，提取南极磷虾油。该方法使用挤压膨化技术，使蛋白质充分变性并形成多孔状结构，便于油脂萃取。但是由于在高温高压环境中，会存在南极磷虾油氧化的问题。 水酶法作为一种新兴的制油工艺正日益受到关注和重视，其主要在机械破碎的基础上，采用酶解法释放油脂，利用非油成分对油和水的亲和力差异及油水比重不同将非油成分和油分离；和传统工艺相比, 它条件温和, 工艺路线简单, 而且可以同时提取油和肽。
技术实现思路
本专利技术的目的是为了克服上述存在的问题，提供了一种水酶法制备富含磷脂的南极磷虾油的方法，同时该方法还可得到南极磷虾肽和南极磷虾蛋白，尤其适合于船上操作。为解决上述技术问题，本专利技术采用的技术方案如下：本专利技术通过自溶酶结合外加蛋白酶酶解，首先通过蛋白酶酶解液化南极磷虾肉，离心脱去虾壳，再酶解破坏蛋白和磷脂的复合结构，使磷脂游离出来，再离心分离出富含磷脂层；富含磷脂层经过干燥，乙醇萃取得到磷脂含量大于40w﹪的南极磷虾油、南极磷虾肽以及南极磷虾蛋白。本专利技术方法具体包括以下步骤： 步骤（1）、将新鲜南极磷虾或冷冻南极磷虾破碎至粒径小于等于10mm；步骤（2）、将步骤（1）破碎后的南极磷虾与盐含量小于1w﹪的水按照重量比为1：0.5～1.5混合均匀，然后加入1500U/g～4500 U/g蛋白酶酶解，升温至50～65℃，保温反应15～60分钟，得到酶解液Ⅰ；所述的蛋白酶为枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）产的中性蛋白酶或地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformis）产的碱性蛋白酶；步骤（3）、步骤（2）得到的酶解液Ⅰ经50～200目滤布过滤后，在离心力350～500G下离心，除去固体（即虾壳），降温至50～55℃，然后进行二次酶解，得到酶解液Ⅱ；若步骤（2）采用的是蛋白酶为碱性蛋白酶，步骤（3）二次酶解过程须将处理后的酶解液Ⅰ调节pH值，具体是用氢氧化钠调节酶解液ⅠpH值至7.5～8.5，保温3～6小时后，再用盐酸调节pH值至6.0～7.0，得到酶解液Ⅱ；若步骤（2）采用的是蛋白酶为中性蛋白酶，步骤（3）二次酶解过程中处理后的酶解液Ⅰ无须调节pH值，直接保温3～6小时，得到酶解液Ⅱ； 步骤（4）、加热步骤（3）得到的酶解液Ⅱ至70～90℃，保温5～30分钟，产生沉淀；沉淀在离心力500～700G下离心5～20分钟，分离出上层的富含磷脂层PEF（Phospholipid Enriched Fraction）和下层的肽液层；将肽液层在60～80℃，真空度在 -0.05～-0.1MPa 下减压浓缩后即为南极磷虾肽；步骤（5）、将富含磷脂层PEF低温干燥或冷冻干燥至水分含量小于10w﹪；所述的低温的要求为低于50℃；步骤（6）、用乙醇萃取步骤（5）得到干燥后的富含磷脂层PEF，萃取温度为30～60℃，萃取时间为1～3小时，在萃取过程中不断搅拌，得到萃取液；所述的干燥后富含磷脂层PEF与乙醇的料液比为1：5～15，单位为kg：L；所述的乙醇浓度大于等于95.5﹪（v/v）； 步骤（7）、在离心力500～700G下离心分离或真空度在-0.05～-0.1MPa下对步骤（6）得到的萃取液进行抽滤，得到固体残渣与滤液；所述的固体残渣为南极磷虾蛋白，滤液为深红色；步骤（8）、步骤（7）得到的滤液在30～60℃，真空度在 -0.05～-0.1MPa下旋转蒸发，除去乙醇，得到磷脂含量大于40w﹪的南极磷虾油。步骤（1）～（5）尤其适合于船上操作。由于南极磷虾体内含有丰富的低温自溶酶，所以南极磷虾捕捞之后立即采用该工艺能保持原料新鲜并利用其低温自溶酶辅助酶解，降低外加蛋白酶用量；步骤（6）～（8）由于涉及到易燃易爆的乙醇，因此不宜在船上进行加工。本专利技术的有益效果是：1、与高温蒸煮法相比，采用二次酶解工艺条件温和，保护天然的不饱和脂肪酸（DHA、EPA等）和抗氧本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种水酶法制备富含磷脂的南极磷虾油的方法，其特征在于该方法利用自溶酶结合外加蛋白酶酶解，首先通过蛋白酶酶解液化南极磷虾肉，离心脱去虾壳，再酶解破坏蛋白和磷脂的复合结构，使磷脂游离出来，再离心分离出富含磷脂层；富含磷脂层经过干燥，乙醇萃取得到磷脂含量大于40w﹪的南极磷虾油、南极磷虾肽以及南极磷虾蛋白。
【技术特征摘要】
1. 一种水酶法制备富含磷脂的南极磷虾油的方法，其特征在于该方法利用自溶酶结合外加蛋白酶酶解，首先通过蛋白酶酶解液化南极磷虾肉，离心脱去虾壳，再酶解破坏蛋白和磷脂的复合结构，使磷脂游离出来，再离心分离出富含磷脂层；富含磷脂层经过干燥，乙醇萃取得到磷脂含量大于40w﹪的南极磷虾油、南极磷虾肽以及南极磷虾蛋白。
2.如权利要求1所述的一种水酶法制备富含磷脂的南极磷虾油的方法，其特征在于该方法具体包括以下步骤：
步骤（1）、将新鲜南极磷虾或冷冻南极磷虾破碎至粒径小于等于10mm；
步骤（2）、将步骤（1）破碎后的南极磷虾与盐含量小于1w﹪的水按照重量比为1：0.5～1.5混合均匀，然后加入1500U/g～4500 U/g蛋白酶酶解，升温至50～65℃，保温反应15～60分钟，得到酶解液Ⅰ；
步骤（3）、步骤（2）得到的酶解液Ⅰ经50～200目滤布过滤后，在离心力350～500G下离心，除去虾壳，降温至50～55℃，然后进行二次酶解，得到酶解液Ⅱ；
步骤（4）、加热步骤（3）得到的酶解液Ⅱ至70～90℃，保温5～30分钟，产生沉淀；沉淀在离心力500～700G下离心5～20分钟，分离出上层的富含磷脂层PEF和下层的肽液层；将肽液层在60～80℃，真空度在 -0.05～-0.1MPa 下减压浓缩后即为南极磷虾肽；
步骤（5）、将富含磷脂层PEF低温干燥或冷冻干燥至水分含量小于10w﹪；
步骤（6）、用乙醇萃取步骤（5）得到干燥后的富含磷脂层PEF，萃取温度为30～60℃，萃取时间为1～3小时，在萃取过程中不断搅拌，得到萃取液；
所述的干燥后富含磷脂层PEF与乙醇的料液比为1：5～15，单位为kg：L；
步骤（7）、在离心力5...
【专利技术属性】
技术研发人员：董寰，
申请(专利权)人：董寰，
类型：发明
国别省市：浙江;33
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