2-氯-3-(甲基硫烷基)-N-(1-甲基-1H-四唑-5-基)-4-(三氟甲基)苯甲酰胺或其盐在耐受HPPD抑制剂除草剂的转基因作物植物的区域中防治不想要的植物的用途制造技术

2‑氯‑3‑(甲基硫烷基)‑N‑(1‑甲基‑1H‑四唑‑5‑基)‑4‑(三氟甲基)苯甲酰胺或其盐在通过含有一种或多种嵌合基因而耐受HPPD抑制剂除草剂的转基因作物植物的区域中用于防治不想要植物的用途，所述嵌合基因包含(I)编码源于以下生物体的羟苯丙酮酸双加氧酶(HPPD)的DNA序列：(a)燕麦属、(b)假单胞菌属、(c)聚球藻亚科、(d)赭纤虫科、(e)红球菌属、(f)嗜苦菌科、(g)克鲁蒂亚菌属，或(II)上述定义的生物体的HPPD编码基因的一种或多种突变DNA序列，或(III)编码均按WO 2012/021785中所述突变的突变玉米或大豆HPPD的一种或多种DNA序列。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】本专利技术涉及2-氯-3-(甲基硫烷基)-N-(1-甲基-1H-四唑-5-基)-4-(三氟甲基)苯甲酰胺或其盐在耐受HPPD抑制剂除草剂的转基因作物植物的区域中防治不想要的植物的用途。WO2012/028579(PCT/EP2011/064820)公开了几种新的N-(四唑-5-基)芳基甲酰胺或N-(三唑-3-基)芳基甲酰胺及其作为HPPD抑制剂除草剂用于杂草防治的用途，并且WO2012/130685(PCT/EP2012/054981)笼统地公开了N-(四唑-5-基)芳基甲酰胺或N-(三唑-3-基)芳基甲酰胺在转基因植物上的用途并将命名的单独的N-(四唑-5-基)芳基甲酰胺或N-(三唑-3-基)芳基甲酰胺施用于某些转基因植物。HPPD抑制剂除草剂可在显示出代谢耐受性的作物植物(例如玉米(Zeamays)，它们在其中被迅速降解)中用于抵抗禾本科杂草和/或阔叶杂草(Schulzetal.,(1993).FEBSletters,318,162-166；Mitchelletal.,(2001)PestManagementScience,第57卷,120-128；Garciaetal.,(2000)Biochem.,39,7501-7507；Pallettetal.,(2001)PestManagementScience,第57卷,133-142)。为拓宽这些HPPD抑制剂除草剂的范围，人们进行了许多努力，以赋予植物(特别是没有代谢耐受性或代谢耐受性表现不佳的植物)在农艺学田间条件下可接受的耐受性水平。与此同时，通过避开(bypass)HPPD介导的尿黑酸的产生(US6,812,010)，过表达敏感型酶而对转基因植物进行改造，以在植物中产生大量靶酶，其相对施用的除草剂来说是足够的(WO96/38567)。或者，已产生转基因植物，其表达在多个位点已经突变的HPPD蛋白质以获得靶酶，所述靶酶在保留有其催化HPP转化为尿黑酸的性质的同时，对HPPD抑制剂除草剂不如突变前的天然HPPD敏感(例如参见EP496630、WO99/24585)。最近，将假单胞菌属(Pseudomonas)HPPD基因引入烟草和大豆的质体基因组已显示出比核转化更为有效，其甚至赋予了针对至少一种HPPD抑制剂的苗后施用的耐受性(Dufourmanteletal.,2007,PlantBiotechnolJ.5(1):118-33)。在WO2009/144079中，公开了编码在荧光假单胞菌(Pseudomonasfluorescens)HPPD蛋白的第336位突变的羟苯丙酮酸双加氧酶(HPPD)的核酸序列及其用于获得耐受HPPD抑制剂除草剂的植物的用途。在多个位点包含突变的荧光假单胞菌HPPD蛋白质的其他突变体及其赋予对某些HPPD抑制剂除草剂的抗性的能力记载于以PCT申请号PCT/US2013/59598(WO2014/043435)(于2013年9月13日)提交的PCT申请文件中且其要求了US61/701,037(2012年9月14提交)、US61/766,057(2013年2月18提交)和US61/790,404(2013年3月15提交)的优先权。这些突变体中的一些，即荧光假单胞菌HPPD蛋白质的突变体，所述突变体(i)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置换和在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置换(称为PfHPPDEvo33并公开于PCT/US2013/59598(WO2014/043435)的SEQIDNo:6)；(ii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置换，在第336位包含G(Gly)->S(Ser)置换，以及在第340位包含A(Ala)->E(Glu)置换(称为PfHPPDEvo40并公开于PCT/US2013/59598(WO2014/043435)的SEQIDNo:8)；或(iii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置换、在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置换、在第339位包含K(Lys)->A(Ala)置换和在第340位包含A(Ala)->Q(Gln)置换(称为PfHPPDEvo41并公开于PCT/US2013/59598(WO2014/043435)的SEQIDNo:16)，关于赋予对HPPD抑制剂除草剂的耐受性的各转基因植物的产生，所述突变体分别以其缩写PfHPPDEvo33、PfHPPDEvo40和PfHPPDEvo41以引用的方式纳入本文。在此之前，所命名的氨基酸首先具有存在于野生型荧光假单胞菌的HPPD蛋白中的氨基酸的特征且括号中所示的字符以3个字母代码确定了各氨基酸，而在括号前所示的字符以1个字母代码确定了各氨基酸。在WO04/024928中，专利技术人已寻求通过增加HPP前体进入这些植物的细胞的通量来增加异戊二烯基醌(prenylquinone)在植物细胞中的生物合成(例如质体醌、生育酚的合成)。这已经通过预苯酸脱氢酶(PDH)的过表达将所述前体的合成与“莽草酸”途径连接来进行。他们还指出，用编码PDH酶的基因转化植物使得增加所述植物对HPPD抑制剂的耐受性成为可能。在WO2002/046387中，记载了由燕麦(Avenasativa)获得的编码HPPD的基因，以产生过表达该基因的植物并因此导致其耐受多种HPPD抑制剂除草剂。在WO2008/150473中，示例说明了两种不同的耐受性机制——经修饰的编码突变HPPD酶的燕麦基因和CYP450玉米单加氧酶(nsf1基因)——的组合，以获得改进的针对HPPD抑制剂除草剂的耐受性，但是没有公开证实基于两种蛋白质的组合的协同作用的数据。在WO2010/085705中，记载了燕麦HPPD的几种突变体以及包含编码该突变HPPD的基因的植物并因此导致对与未突变的HPPD相比的多种HPPD抑制剂除草剂具有增加的耐受性。在WO2012/021785中，记载了多种生物的HPPD蛋白质的几种突变体，优选由玉米获得的HPPD。由体外的所述突变的HPPD酶以及包含编码所述突变的HPPD的基因的植物获得数据，从而产生与未突变的HPPD相比对多种HPPD抑制剂除草剂增大的耐受性。最近，已经鉴定了几种来自多种生物的编码HPPD酶的新基因，其用于获得作物植物，所述作物植物对施用的不同HPPD抑制剂除草剂表现出农学上适用的耐受水平，所述新基因为例如(i)WO2011/076877(PCT/EP2010/070561)公开的由属于聚球藻亚科(Synechococcoideae)的细菌及其某些突变体获得的基因；(ii)WO2011/076882(PCT/EP2010/070567)公开的由属于赭纤虫科(Blepharismidae)的原生生物获得的基因；(iii)WO2011/076892(PCT/EP2010/070578)公开的由属于红球菌属(Rhodococcus)的细菌及其某些突变体获得的基因；(iv)WO2011/076885(PCT/EP2010/070570)公开的由属于嗜苦菌科(Picrophi本文档来自技高网...

【技术保护点】
2‑氯‑3‑(甲基硫烷基)‑N‑(1‑甲基‑1H‑四唑‑5‑基)‑4‑(三氟甲基)苯甲酰胺或其盐在通过含有一种或多种嵌合基因而耐受HPPD抑制剂除草剂的转基因作物植物的区域中用于防治不想要植物的用途，所述嵌合基因包含(I)编码源于以下生物体的羟苯丙酮酸双加氧酶(HPPD)的DNA序列：(a)燕麦属、(b)假单胞菌属、(c)聚球藻亚科、(d)赭纤虫科、(e)红球菌属、(f)嗜苦菌科、(g)克鲁蒂亚菌属，或(II)上述定义的生物体的HPPD编码基因的一种或多种突变DNA序列，或(III)编码均按WO 2012/021785中所述突变的突变玉米或大豆HPPD的一种或多种DNA序列。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2013.11.28 EP 13194780.61.2-氯-3-(甲基硫烷基)-N-(1-甲基-1H-四唑-5-基)-4-(三氟甲基)苯甲酰胺或其盐在通过含有一种或多种嵌合基因而耐受HPPD抑制剂除草剂的转基因作物植物的区域中用于防治不想要植物的用途，所述嵌合基因包含(I)编码源于以下生物体的羟苯丙酮酸双加氧酶(HPPD)的DNA序列：(a)燕麦属、(b)假单胞菌属、(c)聚球藻亚科、(d)赭纤虫科、(e)红球菌属、(f)嗜苦菌科、(g)克鲁蒂亚菌属，或(II)上述定义的生物体的HPPD编码基因的一种或多种突变DNA序列，或(III)编码均按WO2012/021785中所述突变的突变玉米或大豆HPPD的一种或多种DNA序列。2.根据权利要求1所述2-氯-3-(甲基硫烷基)-N-(1-甲基-1H-四唑-5-基)-4-(三氟甲基)苯甲酰胺或其盐的用途，其中转基因作物中含有的至少一种嵌合基因包含编码选自以下的羟苯丙酮酸双加氧酶(HPPD)的DNA：SEQIDNo.2、SEQIDNo.4、SEQIDNo.7、SEQIDNo.9、SEQIDNo.11、SEQIDNo.13、SEQIDNo15、SEQIDNo.17、SEQIDNo、25和SEQIDNo27、SEQIDNo.29、SEQIDNo31、SEQIDNo32、SEQIDNo33、SEQIDNo35、SEQIDNo36、SEQIDNo37、SEQIDNo39、SEQIDNo40、SEQIDNo41、SEQIDNo43、SEQIDNo46。3.一种用于防治不想要植物的方法，其包括在通过含有一种或多种嵌合基因而耐受HPPD抑制剂除草剂的转基因作物植物的区域中施用权利要求1所述的2-氯-3-(甲基硫烷基)-N-(1-甲基-1H-四唑-5-基)-4-(三氟甲基)苯甲酰胺或其盐，所述嵌合基因包含(I)编码源于以下生物体的羟苯丙酮酸双加氧酶(HPPD)的DNA序列：(a)燕麦属、(b)假单胞菌属、(c)聚球藻亚科、(d)赭纤虫科、(e)红球菌属、(f)嗜苦菌科、(g)克鲁蒂亚菌属，或(II)上述定义的生物体的HPPD编码基因的一种或多种突变DNA序列，或(III)编码均按WO2012/021785中所述突变的突变玉米或大豆HPPD的一种或多种DNA序列，且其中所述施用在(a)不想要的植物、(b)不想要植物的种子，和/或(c)植物生长的区域上进行。4.根据权利要求3所述的方法，其中转基因作物中含有的至少一种嵌合基因包含编码选自以下的羟苯丙酮酸双加氧酶(HPPD)的DNA：SEQIDNo.2、SEQIDNo.4、SEQIDNo.7、SEQIDNo.9、SEQIDNo.11、SEQIDNo.13、SEQIDNo15、SEQIDNo.17、SEQIDNo、25、和SEQIDNo27、SEQIDNo.29、SEQIDNo31、SEQIDNo32、SEQIDNo33、SEQIDNo35、SEQIDNo36、SEQIDNo37、SEQIDNo39、SEQIDNo40、SEQIDNo41、SEQIDNo43、SEQIDNo46。5.根据权利要求3或4所述的方法，其中所述转基因作物植物属于选自以下属的双子叶作物：花生属、甜菜属、芸苔属、黄瓜属、南瓜属、向日葵属、胡萝卜属、大豆属、棉属、番薯属、莴苣属、亚麻属、番茄属、烟草属、菜豆属、豌豆属、茄属和蚕豆属，或属于选自以下属的单子叶作物：葱属、凤梨属、天门冬属、燕麦属、大麦属、稻属、黍属、甘蔗属、黑麦属、高粱属、小黑麦属、小麦属、玉蜀黍属。6.根据权利要求3、4或5中任一项所述的方法，其中2-氯-3-(甲基硫烷基)-N-(1-甲基-1H-四唑-5-基)-4-(三氟甲基...

【专利技术属性】
技术研发人员：F·波雷，C·沃尔德拉夫，B·雷伯，A·库恩，E·加茨魏勒，K·特拉博尔德，
申请(专利权)人：拜耳作物科学股份公司，
类型：发明
国别省市：德国;DE