液态奶中低聚果糖含量的检测方法技术

本发明专利技术提供了一种液态奶中低聚果糖含量的检测方法，采用与样品中添加的低聚果糖的品牌号相同的低聚果糖作为标准物，配制成不同浓度的标准工作液；称取两份相同质量的样品，一份加入标准物，加水溶解后配成加标液，另一份直接加水配成相同体积的样品液，将加标液和样品液经预处理后连同工作液依次加至离子色谱仪中进行梯度洗脱，并分别得到色谱图；将加标液和样品液的色谱图进行对比后筛选出用于定量的特异峰，根据特异峰进行定量计算，得到液态奶中低聚果糖含量。该方法简便快捷，无需复杂的操作，最大程度减少了不确定因素带来的误差，结果准确性大幅度提高。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及奶制品领域，具体而言，涉及液态奶中低聚果糖含量的检测方法。
技术介绍
低聚果糖又名寡果糖或蔗果三糖族低聚糖，天然低聚果糖存在于多种植物或水果中，如菊苣、菊芋、香蕉、洋葱及蜂蜜等，工业上利用果糖基转化酶转化、精制、浓缩而成。低聚果糖的生理功能主要是双向调节体内菌群，润肠通便，调节血脂，降低胆固醇，促进人体内B族维生素的合成，促进食物中钙、铁、锌等矿物质和蛋白质的消化吸收，防止肥胖，防止龋齿等。由于低聚果糖具有优越的生理功能，因此，低聚果糖被广泛应用于各类液态奶中。生产厂家在生产液态奶的过程中，将低聚果糖原料按照一定的比例添加至原料中制得成品。在出厂检验时，为了确保成品中低聚果糖的含量符合添加要求，需要对其含量进行检测，符合低聚果糖添加标准的产品方可作为成品进行销售。因此，液态奶中低聚果糖含量的检测结果是否准确至关重要。有鉴于此，特提出本专利技术。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种可准确、方便地对液态奶中的低聚果糖含量进行检测的方法。该方法选择与液态奶中添加的低聚果糖的品牌号相同的低聚果糖作为标准物添加至样品中配成定标液，与样品液经过相同的处理后得到色谱峰，将两者的色谱峰进行对比，选择保留时间和峰形相同且加标液峰面积大于样品液峰面积的色谱峰为特异峰进行相应的计算。由于本专利技术提供的检测方法是直接通过确定低聚果糖的色谱峰而进行定量计算，因此，本专利技术的检测方法简便快捷，无需复杂的操作，最大程度地减少了检测过程中的不确定因素带来的误差，使得检测结果的准确性大幅度提高。为了实现本专利技术的上述目的，特采用以下技术方案：一种液态奶中低聚果糖含量的检测方法，包括如下步骤：(1)采用与样品中添加的低聚果糖的品牌号相同的低聚果糖作为标准物，配制成不同浓度的标准工作液；(2)称取两份相同质量的样品，一份加入所述标准物，加水溶解后配成加标液，另一份直接加水配成相同体积的样品液，将所述加标液和所述样品液经预处理后连同所述工作液依次加至离子色谱仪中进行梯度洗脱，并分别得到色谱图；(3)将所述加标液和所述样品液的色谱图进行对比后筛选出用于定量的特异峰，拟合得到所述工作液的标准曲线，再根据样品液色谱图中特异峰的峰面积找出所述标准曲线上对应的浓度，得到液态奶中低聚果糖含量。本专利技术提供的检测方法的检测原理如下：选择与液态奶中添加的低聚果糖的品牌号相同的低聚果糖作为标准物，配制成不同浓度的工作液。由于所用的标准物与液态奶中的低聚果糖出自同一生产厂家，确保标准物在色谱检测过程中和液态奶中的低聚果糖具有相同的色谱行为和响应特性。其次，在样品液中添加一定量的标准物作为加标液，将加标液和样品液经过相同的处理后进样至离子色谱仪中进行检测。由于加标液中的样品质量和样品液中的样品质量相同，且加标液和样品液均经过相同的处理，从而使得两者的色谱图在相同保留时间处具有峰形相同的色谱峰，这一色谱峰既包含低聚果糖的色谱峰也包含液态奶中其它组分的色谱峰，但由于加标液中低聚果糖的含量大于样品液，而其他组分的含量均相同，因此，加标液中低聚果糖生成的色谱峰虽然和样品液中的低聚果糖生成的色谱峰具有相同的保留时间和峰形，但前者的峰高一定大于后者，即前者的峰面积一定大于后者。因此，通过这一对比，筛选出液态奶中低聚果糖生成的特异峰，将其用作含量测定。根据不同浓度工作液的特异峰的峰面积得到标准曲线，后根据所述样品液中特异峰的峰面积，找出所述标准曲线上对应的浓度，得到所述样品液中低聚果糖的浓度，计算得到液态奶中低聚果糖含量。由上述内容可以看出，本专利技术提供的检测方法是直接通过确定低聚果糖的色谱峰而进行定量计算的，由于不通过对各种低聚果糖成分进行分离和含量检测，使得检测方法简便快捷。而且，本专利技术提供的检测方法只需借助离子色谱仪进行检测，对设备的要求较低。本专利技术提供的检测方法步骤简单，无需复杂的操作，最大程度地减少了检测过程中的不确定因素带来的误差，使得检测结果的准确性大幅度提高。并且，本专利技术的检测方法中利用的离子色谱仪直接得到峰面积、拟合出标准曲线，得到样品待测液中低聚果糖的浓度，不但方便快捷，而且计算机操作也进一步保证了结果的准确性。利用离子色谱仪进行检测过程中，多种因素均会对色谱图产生影响。为了保证加标液和样品液中的低聚果糖产生的色谱峰峰形好，不拖尾，优选地，步骤(2)中，所述梯度洗脱的步骤中，所用的流动相包括超纯水、500-520mmol/LNaOH溶液和970-980mmol/LCH3COONa溶液。进一步优选地，步骤(2)中，所述梯度洗脱的步骤中，洗脱时间为60～65min，流动相的流速为0.40～0.45mL/min，且所述超纯水的体积分数为0-79.8％，所述NaOH溶液的体积分数为0-80％，所述CH3COONa溶液的体积分数为0-100％。其梯度洗脱的具体条件如下表所示，在离子色谱检测过程中，可根据下表设置离子色谱仪流动相的各个参数。表1离子色谱仪流动相的参数设置表基于同样的考虑，优选地，步骤(2)中，所述离子色谱仪的分析柱为3mm×150mmDionexCarboPacPA20，保护柱为3mm×30mmDionexCarboPacPA20。进一步优选地，所述分析柱的柱温为30-35℃。优选地，步骤(2)中，所述预处理的步骤具体包括：在所述加标液和所述样品液中加入相同体积的乙腈，混匀后经高速离心获得上清液，依次取相同体积的所述加标液和所述样品液的上清液，加入等量水稀释后再过滤，收集滤液。上述预处理步骤中，通过水浴使得加标液和样品液充分溶解，再通过加入乙腈去除加标液和样品液中的蛋白质和脂肪等大分子物质，避免对色谱图的峰形和峰位置产生影响；通过高速离心和过滤进一步将大分子物质沉淀。为了保证离心效果，优选地，所述高速离心的步骤中，离心温度为18-20℃，转速为8000-9000rpm，且离心时间为5-8分钟。为了保证过滤效果，优选地，所述过滤的步骤具体包括：将稀释后的上清液依次通过0.22μm的Nylon滤膜。优选地，步骤(3)中，当存在1个以上的特异峰时，分别测得所述工作液在每个特异峰处的标准曲线，后根据所述样品待测液中相应特异峰的峰面积，一一找出相应标准曲线上对应的浓度，取所有浓度的平均值作为所述样品液中低聚果糖的浓度。优选地，步骤(3)中，所述本文档来自技高网...

【技术保护点】
液态奶中低聚果糖含量的检测方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)采用与样品中添加的低聚果糖的品牌号相同的低聚果糖作为标准物，配制成不同浓度的标准工作液；(2)称取两份相同质量的样品，一份加入所述标准物，加水溶解后配成加标液，另一份直接加水配成相同体积的样品液，将所述加标液和所述样品液经预处理后连同所述工作液依次加至离子色谱仪中进行梯度洗脱，并分别得到色谱图；(3)将所述加标液和所述样品液的色谱图进行对比后筛选出用于定量的特异峰，拟合得到所述工作液的标准曲线，再根据样品液色谱图中特异峰的峰面积找出所述标准曲线上对应的浓度，得到液态奶中低聚果糖含量。

【技术特征摘要】
1.液态奶中低聚果糖含量的检测方法，其特征在于，包括如下
步骤：
(1)采用与样品中添加的低聚果糖的品牌号相同的低聚果糖作
为标准物，配制成不同浓度的标准工作液；
(2)称取两份相同质量的样品，一份加入所述标准物，加水溶
解后配成加标液，另一份直接加水配成相同体积的样品液，将所述
加标液和所述样品液经预处理后连同所述工作液依次加至离子色谱
仪中进行梯度洗脱，并分别得到色谱图；
(3)将所述加标液和所述样品液的色谱图进行对比后筛选出用
于定量的特异峰，拟合得到所述工作液的标准曲线，再根据样品液
色谱图中特异峰的峰面积找出所述标准曲线上对应的浓度，得到液
态奶中低聚果糖含量。
2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，步骤(2)
中，所述梯度洗脱的步骤中，所用的流动相包括超纯水、
500-520mmol/LNaOH溶液和970-980mmol/LCH3COONa溶液。
3.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于，步骤(2)
中，所述梯度洗脱的步骤中，洗脱时间为60～65min，流动相的流速
为0.40～0.45mL/min，且所述超纯水的体积分数为0-79.8％，所述
NaOH溶液的体积分数为0-80％，所述CH3COONa溶液的体积分数
为0-100％。
4.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，步骤(2)
中，所述离子色谱仪的分析柱为3mm×150mmDionexCarboPac
PA20，保护柱为3mm×...

【专利技术属性】
技术研发人员：叶满香，谭永成，
申请(专利权)人：云浮市新金山生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44