一种白芨组培苗鳞球茎诱导培养基及其制备方法技术

技术编号:14286352 阅读:77 留言:0更新日期:2016-12-25 17:02
本发明专利技术公开了一种白芨组培苗鳞球茎诱导培养基及其制备方法,其特征在于:包括MS+白糖20~50g/L+卡拉胶5.5~10g/L+BA0.2~5mg/L+NAA0.1~2.5mg/L+IBA0.3~1.0mg/L+ZT0.1~4mg/L+CCC2.0~10.0mg/L+土豆汁20~50ml/L+香蕉泥25~60ml/L。该白芨组培苗鳞球茎诱导培养基通过采用特定含量MS培养基、BA、NAA、IBA、CCC、土豆汁、香蕉泥及ZT的共同协同调节作用,不仅为白芨的组培苗提供丰富的营养元素,而且形成鳞球茎均比黄豆粒大,提高了组培苗驯化移栽的成活率。降低了育苗生产成本低,并且培育过程中不受自然条件影响,从而大大提高白芨的经济价值。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物
,具体涉及一种白芨组培苗培养基及其制备方法。
技术介绍
白芨为兰科植物,喜温暖、阴凉和较阴湿的环境,不耐寒。常常在丘陵和低山地区的溪河两岸、山坡草丛中及疏林下。以块茎供药用,能收敛止血,消肿生肌;治肺结核咳血,支气管扩张咯血等症。外用治外伤出血、烧烫伤、手足皲裂等症。在生物医药、保健食品、纺织印染、特种涂料和日用化工等方面有巨大的商业利用价值。随着白芨食品的开发利用和印染业、美容业的需求,白芨用量日趋增多,人们长年无节制采挖,加上白芨本身自然繁殖率低,导致资源日渐枯竭。现已列入《濒危动植物种国际贸易公约》予以保护。因此,采用现代生物技术,通过大量、快速克隆繁殖白芨种苗,并开展人工种植,对保护、开发和可持续利用这一名贵中药具有重大的社会意义和经济效益。现有组培技术中,对白芨的组培方面报道不多,且大多数相关报道针对外植体原球茎进行诱导培养、增殖、分化、生根等,对白芨组培中鳞球茎诱导方面的报道甚少。传统白芨栽培方面主要利用野生资源分株繁殖,由于野生资源濒危灭绝且分株繁殖易导致种源退化和病毒感染,通过克隆组培技术快速繁殖白芨种苗是人工栽培必须解决的问题。而组培苗的鳞球茎将直接影响驯化移栽成活率,因此在白芨组培过程中诱导鳞球茎对提高其移栽成活率及资源保护具有非常重要的意义。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种白芨组培苗鳞球茎诱导培养基及其制备方法
该诱导培养基能实现白芨苗在组培时形成鳞球茎,通过此方法,提高白芨组培苗的驯化移栽成活率,解决了传统的栽培技术中繁殖系数低、种源退化的问题。本专利技术的技术方案是:一种白芨组培苗鳞球茎诱导培养基,其特征在于:包括MS+白糖20~50g/L+卡拉胶5.5~10g/L+BA0.2~5mg/L+NAA0.1~2.5mg/L+IBA0.3~1.0mg/L+ZT0.1~4mg/L+CCC2.0~10.0mg/L+土豆汁20~50ml/L+香蕉泥25~60ml/L。在本专利技术的白芨组培苗鳞球茎诱导培养基,每升MS培养基中含有的组分及各组分的重量如下:NH4NO31650mg、KNO31900mg、CaCl2·2H2O 440mg、MgSO4·7H2O 370mg、KH2PO4170mg、KI 0.83mg、H3BO36.2mg、MnSO4·H2O 16.9mg、ZnSO4·7H2O 8.6mg、Na2MoO4·2H2O 0.25mg、CuSO4·5H2O 0.025mg、CoCl2·6H2O 0.025mg、FeSO4·7H2O 27.8mg、Na2-EDTA·2H2O 37.3mg、肌醇100mg、烟酸0.5mg、盐酸吡哆锌(VB6)0.5mg、盐酸硫胺素(VB1)0.1mg、甘氨酸2mg。上述白芨组培苗鳞球茎诱导的培养基的制备方法包括以下步骤:(1)将白糖和卡拉胶进行预处理:分别将白糖和卡拉胶按照比例称量再加入10倍质量的蒸馏水溶解,静置1.5~3小时;(2)MS培养基母液的配制,包括母液1、母液2、母液3、母液4、母液5母液6、母液7和母液8的配制,其中:母液1的配制:称取85g KH2PO4置于烧杯中,加入蒸馏水搅拌溶解,定容至5000ml,保存到棕色磨合瓶中;母液2的配制:称取950g KNO3置于烧杯中,加入蒸馏水搅拌溶解,定容至5000ml,保存到棕色磨合瓶中;母液3的配制:称取825g NH4NO3置于烧杯中,加入蒸馏水搅拌溶解,定容至5000ml,保存到棕色磨合瓶中;母液4的配制:185g MgSO4·7H2O置于烧杯中,加入蒸馏水搅拌溶解,定
容至5000ml,保存到棕色磨合瓶中;母液5的配制:称取220g CaCl2·2H2O置于烧杯中,加入蒸馏水搅拌溶解,定容至5000ml,保存到棕色磨合瓶中;母液6的配制:分别称量8.3g KI、6.2g H3BO3、16.9g MnSO4·H2O、8.6g ZnSO4·7H2O、0.25g Na2MoO4·2H2O、0.025g CuSO4·5H2O和0.025g CoCl2·6H2O,加入烧杯中溶解,定容至5000ml,保存到棕色磨合瓶中;母液7的配制:分别称量100g肌醇、0.5g烟酸、0.5g盐酸吡哆醇(VB6)0.5mg、盐酸硫胺素(VB1)0.1g和2g甘氨酸,加入烧杯中溶解,定容至5000ml,保存到棕色磨合瓶中;母液8的配制:称量27.8g FeSO4·7H2O、37.3g Na2-EDTA·2H2O分别加入1000ml蒸馏水溶解,然后将两种溶液混合,加热并煮沸8分钟,并不断搅拌,使两种溶液充分螯合,再定容至5000ml,保存到棕色磨合瓶中;(3)将预处理的白糖和卡拉胶水溶液、10ml/L母液1、母液2、母液3、母液4、母液5;5ml/L母液6、母液7、母液8分别倒入灌装机中,再按比例分别加入BA、NAA、IBA、ZT、CCC、土豆汁、香蕉泥。加水定容,调节pH值至5.8,并搅拌20min后灌装,其中,灌装时间为1.5s,间歇时间为0.7s。将罐装好的营养液在122℃、0.16MPa的条件下灭菌20分钟,取出冷凝后制得该培养基。本专利技术白芨组培苗鳞球茎诱导培养基通过采用特定含量的MS培养基BA、NAA、IBA、ZT、CCC、土豆汁及香蕉泥的协同调节作用,经该诱导培养基不仅为白芨的组培提供丰富的营养元素,并且几乎100%的白芨苗在组培过程组中形成鳞球茎,且该鳞球茎均比黄豆粒大,具有鳞球茎的组培苗驯化移栽成活率提高到95%以上,且植株变异率低,植株结构完整健壮度好。并且通过组培技术
不受自然条件影响显著提高其繁殖系数,从而大大提高白芨的经济价值。具体实施方式下面结合实施例对本专利技术进行详细的描述,但它们不是对本专利技术的进一步限制。实施例1该白芨组培苗鳞球茎诱导培养基的配方为:MS+白糖30g/L+卡拉胶7g/L+BA0.3mg/L+NAA1.0mg/L+IBA0.4mg/L+ZT0.1mg/L+CCC4.0mg/L+土豆汁40ml/L+香蕉泥30ml/L。其中,MS基本培养基的配方为:每升培养基中含有的组分的含量如下:NH4NO31650mg、KNO31900mg、CaCl2·2H2O 440mg、MgSO4·7H2O 370mg、KH2PO4170mg、KI 0.83mg、H3BO36.2mg、MnSO4·H2O 16.9mg、ZnSO4·7H2O 8.6mg、Na2MoO4·2H2O 0.25mg、CuSO4·5H2O 0.025mg、CoCl2·6H2O 0.025mg、FeSO4·7H2O 27.8mg、Na2-EDTA·2H2O 37.3mg、肌醇100mg、烟酸0.5mg、盐酸吡哆醇0.5mg、盐酸硫胺素0.1mg、甘氨酸2mg。上述白芨组培苗鳞球茎诱导培养基的配制过程为:(1)、首先将白糖和卡拉胶进行预处理:分别将白糖和卡拉胶按照比例称量再加入10倍质量的蒸馏水溶解,静置2小时;(2)、MS基本培养基母液的配制:包括母液1、母液2、母液3、母液4、母液5、母液6、母液7和母液8的配制,其中母液1的配制:称取85g KH2PO4置于烧杯中,加入蒸馏水搅拌溶解,定容至5000ml,保存到棕色磨合瓶中;母液本文档来自技高网
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【技术保护点】
一种白芨组培苗鳞球茎诱导培养基,其特征在于:包括MS+白糖20~50g/L+卡拉胶5.5~10g/L+BA0.2~5mg/L+NAA0.1~2.5mg/L+IBA 0.3~1.0mg/L+ZT0.1~4mg/L+CCC2.0~10.0mg/L+土豆汁20~50ml/L+香蕉泥25~60ml/L。

【技术特征摘要】
1.一种白芨组培苗鳞球茎诱导培养基,其特征在于:包括MS+白糖20~50g/L+卡拉胶5.5~10g/L+BA0.2~5mg/L+NAA0.1~2.5mg/L+IBA 0.3~1.0mg/L+ZT0.1~4mg/L+CCC2.0~10.0mg/L+土豆汁20~50ml/L+香蕉泥25~60ml/L。2.根据权利要求1所述的白芨组培苗鳞球茎诱导培养基,其特征在于:该培养基包括:MS+白糖20~50g/L+卡拉胶5.5~10g/L+BA 0.2~5mg/L+NAA0.1~2.5mg/L+IBA 0.3~1.0mg/L+ZT0.1~4mg/L+CCC2.0~10.0mg/L+土豆汁20~50ml/L+香蕉泥25~60ml/L。3.根据权利要求1或2所述的白芨组培苗鳞球茎诱导培养基,其特征在于:每升MS培养基中含有的组分及各组分的重量如下:NH4NO3 1650mg、KNO31900mg、CaCl2·2H2O 440mg、MgSO4·7H2O 370mg、KH2PO4170mg、KI 0.83mg、H3BO36.2mg、MnSO4·H2O 16.9mg、ZnSO4·7H2O 8.6mg、Na2MoO4·2H2O 0.25mg、CuSO4·5H2O 0.025mg、CoCl2·6H2O 0.025mg、FeSO4·7H2O 27.8mg、Na2-EDTA·2H2O37.3mg、肌醇100mg、烟酸0.5mg、盐酸吡哆醇(VB6)0.5mg、盐酸硫胺素(VB1)0.1mg、甘氨酸2mg。4.一种权利要求1所述白芨组培苗鳞球茎诱导培养基的制备方法,其特征在于,包括:(1)首先将白糖和卡拉胶进行预处理:分别将白糖和卡拉胶按照比例称量再加入10倍质量的蒸馏水溶解,静置1.5~3小时;(2)MS培养基母液的配制,包括母液1、母液2、母液3、母液4、母液5母液6、母液7和母液8的配制,其中母液1的配制:称取85g K...

【专利技术属性】
技术研发人员:林忠全
申请(专利权)人:四川深达生物科技有限公司
类型:发明
国别省市:四川;51

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