用于细胞治疗的生物标志物制造技术

本发明专利技术涉及用于监测个体炎性病况进展的方法。在特定实施方案中，所述患者正在接受所述炎性病况的治疗并且所述方法包括监测一种或多种生物标志物的水平以监测疾病进展，例如以帮助临床医生优化治疗方案。在特定实施方案中，个体正在接受用间质干细胞(MSC)的治疗。在特定实施方案中，本发明专利技术涉及监测患有由软骨损伤或软骨退变表征的患者的自体或同种异体细胞治疗效果的方法，所述软骨损伤或软骨退变例如OA，例如以帮助从业者确定适当的时间以施用另一剂量的细胞。本发明专利技术还提供用于所述方法的试剂盒和组分。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】专利
本专利技术涉及用于监测个体炎性病况进展的方法。在特定实施方案中，患者正在接受炎性病况的治疗并且所述方法包括监测一种或多种生物标志物的水平以监测疾病进展，例如以帮助临床医生优化治疗方案。在特定实施方案中，个体正在接受用间质干细胞(MSC)的治疗。在特定实施方案中，本专利技术涉及监测患有由软骨损伤或软骨退变，例如OA，表征的病况的患者的自体或同种异体细胞治疗效果的方法，例如以帮助从业者确定适当的时间以施用另一剂量的细胞。本专利技术还提供方法中使用的试剂盒和组分。专利技术背景炎症和炎性病况是一般人群中严重的健康问题，并且甚至更确切地在老龄化人群中，其中慢性炎性病况可以呈现持续的衰竭性的和退化的机动性和疼痛，炎症可以作为对损伤或由物理、化学或生物制剂造成的异常刺激的响应而出现。当术语“炎症”用来表示病症时，是指由炎症产生、由炎症导致或者导致炎症的，不正常的或以正常方式不能解除的病理过程。炎症性病症可以是全身性的或局限于特定的组织或器官中。骨关节炎(OA)是自发性、无法治愈的慢性和衰竭性骨骼肌疾病并且在澳大利亚被超过140万人报告。OA发作与老化最密切相关，并且关键观察结果是软骨改变和疼痛。OA传统上被称为非炎性疾病，但越来越明显的是炎症在OA疾病进展中发挥着重要作用。通常用非类固醇抗炎药(NSAID)和止痛药管理OA患者以减轻OA症状并且以控制受影响的关节处的疼痛。目前，当NSAID以及皮质类固醇治疗不再有益，通常的治疗是全关节置换。这给30-60岁的患者带来重要问题。许多骨科外科医生对于对小于50岁的人进行关节置换是犹豫的，因为
植入物不太可能持续他们的一生。近年来，在医学研究中已经有向针对多种疾病的创新的再生治疗的转变。在关节疾病例如关节炎，许多研究小组已经使用OA的动物模型来探索成体间质干细胞(MSC)作为潜在的再生治疗的用途。在急性和慢性软骨损伤的动物模型中，用MSC的治疗产生半月板和透明软骨再生，以及OA类疾病进展、软骨损失、骨赘形成和软骨下增厚的减少。通过生物活性因子的分泌，这些细胞还已经被证实具有显著的抗炎性和免疫调节效果。脂肪组织是特别引人类注目的用于治疗目的的细胞来源，因为其包含的每克MSC是骨髓的每克MSC的500-1000倍。与丰富的MSC一起，脂肪组织还包含免疫细胞、血管平滑肌细胞、内皮细胞和周皮细胞，其总体被称为基质血管部分(SVF)。通过标准的吸脂技术获得大量脂肪组织的能力和快速分离SVF的能力允许临床上同一天的细胞治疗程序。例如，题为“Therapeutic methods using adipose tissue-derived cell suspensions comprising adipocytes”的国际专利申请PCT/AU2009/001070(WQ2010/020005)和澳大利亚专利申请第2009201915号，两者的内容均通过交叉引用并入本文，描述用于治疗包括OA的骨骼肌病况的自体脂肪来源的细胞治疗。题为“Therapeutics using multiple injections of cells”的澳大利亚专利申请第2013204930号描述了已经令人惊奇地鉴定了自体脂肪组织来源的细胞悬浮液可以被冷冻并且恢复用于作为有计划注射过程的随后施用，以提供与单剂量相比改进的治疗结果。其中描述了，令人惊讶地，此类冷冻细胞可以在不需要从冷冻保存中恢复后培养细胞的情况下使用。如AU2013204930中所述，这允许专利技术人开发治疗骨关节炎、以及包括疼痛的多种其他病况的改进的方法，其通过随时间向个体施用包含多个剂量的包含脂肪组织来源的非脂肪细胞的自体脂肪组织来源的细胞悬浮液的治疗过程，其中第一剂量包含新鲜制备的细胞悬浮液的一部分，并且随后的一剂或多剂包含细胞悬浮液的已经冷冻贮存的一部分。仍然存在对另外的方法的需求以有助于患有炎性病况、OA和相
关病症，以及其中涉及软骨损伤或软骨退变的其他病况的患者的治疗。专利技术概述本专利技术人认为拥有帮助治疗医师确定患者的炎性病况的进展的方法将是对他们有利的，例如以有助于关于向患者施用治疗剂量的适当的时间的指导决定，例如向患者施用一剂MSC，或一剂脂肪组织来源的细胞悬浮液，其可以是自体或同种异体细胞悬浮液，特别是不依赖于患者对自己病况的主观评价的方法，所述对自己病况的主观评价例如疼痛得分或不适水平的自我报告。如本文所述，提供了使用生物标志物以评价炎性病况的进展并且帮助鉴定由炎症表征的病况的基于间质细胞治疗的适当的治疗时间。本专利技术人已经鉴定了巨噬细胞迁移抑制因子(MIF)在正在接受针对炎性病况的间质干细胞治疗的患者的血清中是可检测的，所述炎性病况例如OA、神经变性疾病和溃疡性结肠炎，并且可检测的MIF水平与治疗结果相关，例如炎性病况的稳定或改善。在特定实施例中，在OA的治疗中举例说明了可检测的MIF水平与治疗结果相关，所述治疗结果例如降低的软骨降解。MIF是刺激受损组织降解的炎性细胞因子。本专利技术人还已鉴定CTX-II，II型胶原C-端端肽，在正在接受针对OA的患者的血清和尿中是可检测的，并且可检测的CTX-II水平与软骨降解相关。MIF的血清水平与MSC治疗后观察到的降低的组织降解相关，例如在OA中，降低的血清MIF与降低的尿液CTX II相关，CTX II是软骨降解的标志物。本专利技术人还已鉴定COMP是另外的与OA非常相关的软骨特异性分解产物。COMP在疾病进展期间增加(在血清中)。与CTX一样，本文的实施例展示了治疗后此标志物的稳定或略微减少。因此，在本专利技术的一个方面，提供了用于监测患有炎性病况的患者的疾病进展的方法，该方法包括确定来自所述患者的至少第一生物样品和第二生物样品中的生物标志物MIF的水平，其中与所述第一生物样品相比，在所述第二生物样品中所述生物标志物的水平的改变指示疾病进展。在此术语中，疾病进展可以是病况已经恶化、稳定或改
善。在实施方案中，与第一生物样品相比，第二生物样品中所述生物标志物的可检测的水平的增加指示炎性病况的病理进展或恶化。在实施方案中，与第一生物样品相比，第二生物样品中所述生物标志物的可检测的水平的降低指示炎性病况的稳定或改善。在本专利技术的另一方面，提供了治疗需要所述治疗的个体的炎性病况的方法，该方法包括向所述个体施用包含间质干细胞(MSC)的细胞悬浮液，其中该方法还包括确定来自所述患者的至少第一生物样品和第二生物样品中的生物标志物MIF的水平。在本专利技术的另一方面，提供了治疗需要所述治疗的个体的炎性病况的方法，该方法包括随时间向所述个体施用包含多个剂量的包含间质干细胞(MSC)的细胞悬浮液的治疗过程，其中该方法还包括确定来自所述患者的至少第一生物样品和第二生物样品中的生物标志物MIF的水平。在本专利技术的另一方面，提供了治疗需要所述治疗的个体的炎性病况的方法，该方法包括随时间向所述个体施用包含多个剂量的包含脂肪组织来源的非脂肪细胞的自体脂肪组织来源的细胞悬浮液的治疗过程，其中第一剂量包含新鲜制备的细胞悬浮液的一部分并且随后的一剂或多剂包含所述细胞悬浮液的已经冷冻贮存的一部分，该方法还包括确定来自所述患者的至少第一生物样品和第二生物样品中的生物标志物MIF的水平。在本专利技术的另一方面，本文档来自技高网...

【技术保护点】
用于监测患有炎性病况的患者的疾病进展的方法，所述方法包括确定来自所述患者的至少第一生物样品和第二生物样品中的生物标志物MIF的水平，其中与所述第一生物样品相比，所述第二生物样品中的所述生物标志物的水平的改变指示疾病进展。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2013.10.04 AU 20139038401.用于监测患有炎性病况的患者的疾病进展的方法，所述方法包括确定来自所述患者的至少第一生物样品和第二生物样品中的生物标志物MIF的水平，其中与所述第一生物样品相比，所述第二生物样品中的所述生物标志物的水平的改变指示疾病进展。2.如权利要求1所述的方法，其中与第一生物样品相比，第二生物样品中的所述生物标志物的可检测的水平的增加，指示炎性病况的病理进展或恶化。3.如权利要求1所述的方法，其中与第一生物样品相比，第二生物样品中的所述生物标志物的可检测的水平的降低，指示炎性病况稳定或改善。4.治疗需要所述治疗的个体的炎性病况的方法，所述方法包括向所述个体施用包含间质干细胞(MSC)的细胞悬浮液，其中所述方法还包括确定来自所述患者的至少第一生物样品和第二生物样品中的生物标志物MIF的水平。5.治疗需要所述治疗的个体的炎性病况的方法，所述方法包括随时间向所述个体施用包含多个剂量的包含间质干细胞(MSC)的细胞悬浮液的治疗过程，其中所述方法还包括确定来自所述患者的至少第一生物样品和第二生物样品中的生物标志物MIF的水平。6.治疗需要所述治疗的个体的炎性病况的方法，所述方法包括随时间向所述个体施用包含多个剂量的包含脂肪组织来源的非脂肪细胞的自体脂肪组织来源的细胞悬浮液的治疗过程，其中第一剂量包含新鲜制备的细胞悬浮液的一部分，并且随后的一剂或多剂包含所述细胞悬浮液的已经冷冻贮存的一部分，所述方法还包括确定来自所述患者
\t的至少第一生物样品和第二生物样品中的生物标志物MIF的水平。7.治疗需要所述治疗的个体的炎性病况的方法，所述方法包括随时间向所述个体施用包含多个剂量的包含脂肪组织来源的非脂肪细胞的同种异体脂肪组织来源的细胞悬浮液的治疗过程，其中所有剂量包含已经冷冻贮存的细胞悬浮液，所述方法还包括确定来自所述患者的至少第一生物样品和第二生物样品中的生物标志物MIF的水平。8.治疗需要所述治疗的个体的炎性病况的方法，所述方法包括以下步骤：向所述患者施用第一剂量的包含脂肪组织来源的非脂肪细胞的自体脂肪组织来源的细胞悬浮液，其中所述第一剂量包含新鲜制备的细胞悬浮液的一部分，确定来自所述患者的至少第一生物样品和第二生物样品中的生物标志物MIF的水平，其中所述第一生物样品是在开始所述治疗之前来自所述患者的基线样品，并且所述第二生物样品是在所述第一剂量后来自所述患者的样品，其中如果所述第二样品中的所述生物标志物MIF的水平与所述第一样品大致相同，施用另一剂量的所述自体脂肪组织来源的细胞悬浮液，其中所述另一剂量包含在开始治疗时已向患者施用过的细胞悬浮液的一部分，所述部分在使用之前已经冷冻贮存。9.治疗需要所述治疗的个体的炎性病况的方法，所述方法包括以下步骤：向所述患者施用第一剂量的包含脂肪组织来源的非脂肪细胞的同种异体脂肪组织来源的细胞悬浮液，确定来自所述患者的至少第一生物样品和第二生物样品中的生物标志物MIF的水平，其中所述第一生物样品是在开始所述治疗之前来自所述患者的基线样品，并且所述第二生物样品是在所述第一剂量后来自所述患者的样品，其中如果所述第二样品中的所述生物标志物MIF的水平与所述第一样品大致相同，施用另一剂量的同种异体脂肪组织来源的细胞悬浮液，其中所有剂量的细胞悬浮液在使用之前已经冷冻贮存。10.治疗需要所述治疗的个体的炎性病况的方法，所述方法包括以下步骤：向所述患者施用第一剂量的包含脂肪组织来源的非脂肪细胞的自体脂肪组织来源的细胞悬浮液，其中所述第一剂量包含新鲜制备的细胞悬浮液的一部分，确定来自所述患者的至少第一生物样品和第二生物样品中的生物标志物MIF的水平，其中所述第一生物样品和所述第二生物样品均在所述第一剂量后从所述患者获得，其中如果与所述第一样品相比，确定所述第二样品中的所述生物标志物MIF的水平增加，施用另一剂量的所述自体脂肪组织来源的细胞悬浮液，其中所述另一剂量包含在开始治疗时已向患者施用过的细胞悬浮液的一部分，所述部分在使用之前已经冷冻贮存。11.治疗需要所述治疗的个体的炎性病况的方法，所述方法包括以下步骤：向所述患者施用第一剂量的包含脂肪组织来源的非脂肪细胞的同种异体脂肪组织来源的细胞悬浮液，确定来自所述患者的至少第一生物样品和第二生物样品中的生物标志物MIF的水平，其中所述第一生物样品和所述第二生物样品均在所述第一剂量后从所述患者获得，其中如果与所述第一样品相比，确定所述第二样品中的所述生物标志物MIF的水平增加，施用另一剂量的所述同种异体脂肪组织来源的细胞悬浮液，其中所有剂量的细胞悬浮液在使用之前已经冷冻贮存。12.如权利要求4或5所述的方法，其中所述MSC选自自体细胞、同种异体细胞、脐带血细胞，以及扩增的脐带血细胞，或其混合物。13.如权利要求1至12中任一项所述的方法，其中所述炎性病况是由软骨损伤或...

【专利技术属性】
技术研发人员：本·赫伯特，
申请(专利权)人：赛尔爱迪尔私人有限公司，
类型：发明
国别省市：澳大利亚;AU